马哈利樱桃叶片再生的研究

利用马哈利樱桃的无菌苗叶片做外植体 ,进行离体叶片再生不定芽研究。结果表明 :培养基中添加的激素浓度、种类、配比均影响不定芽再生 ,BA诱导马哈利樱桃离体叶片再生的活性强于TDZ ;在WPM BA 5mg/L IBA 0 .7mg/L培养基上 ,通过 3次继代培养的不定梢的叶片 ,再生不定芽的频率达 5 2 .4%。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

不同培养条件对‘丰香’草莓离体叶片再生的影响

 以草莓品种‘丰香’离体叶片为外植体, 探讨了基本培养基、不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明, 基本培养基中以MS 最为适合,WPM、QL 、AS 培养基均不利于不定芽的再生, 而TDZ 的诱导效果好于BA。以MS 基本培养基附加TDZ2.0 mg·L - 1和IBA 0.8 mg·L ^-1可以使‘丰香’叶片不定芽的再生率高达72.33 % , 平均每叶再生芽5.59个。暗培养14 d 可以将‘丰香’叶片的不定芽再生率提高到90.09 %。硝酸银对于提高‘丰香’叶片的不定芽再生没有明显效果, 但在一定程度上改变了细胞分化的方向。     

甜樱桃砧木吉塞拉(Gisela)叶片再生体系研究

 以甜樱桃矮化砧木‘Gisela 5’和‘Gisela 6’的组培苗为试材，研究建立叶片的离体再生体系。结果表明，Gisela 6的再生能力高于Gisela 5；叶片正面接触培养基比背面接触培养基更有利于分化再生。用新梢顶端1~3节新展开的叶片制备外植体，分别接种在WPM+BA 7 mg/L+IBA 0.3 mg/L和WPM+BA 5 mg/L+IBA 0.5 mg/L的培养基上，黑暗处理15 d，Gisela 5的最高分化频率为75.1%，Gisela 6为100%。再生芽苗在三角瓶中生根容易，移人大田后生长正常。     

‘紫罗兰’白菜叶片再生体系的建立

以‘紫罗兰’白菜无菌苗叶片为外植体,研究了不同6-BA和NAA浓度组合对白菜真叶不定芽再生的影响,同时采用不同生根培养基对再生芽进行生根诱导。结果表明:诱导‘紫罗兰’白菜真叶分化的适宜培养基为MS+2mg/L 6-BA+1mg/L NAA+4mg/L AgNO3,每个外植体平均再生芽数为1.42个;生根培养基以MS+0.5mg/L NAA最佳,平均每个不定芽诱导根数为16.54个。该试验结果为‘紫罗兰’白菜材料的快速繁殖提供了理论和技术参考。     

'砀山酥'梨叶片再生体系的建立

以‘砀山酥’梨(Pyrus bretschneidericv.Dangshansu)叶片为材料,研究基本培养基种类、植物生长调节物质浓度、抗氧化剂、碳源对再生的影响,以及不同浓度生长激素对再生芽生根的影响。结果表明:NN69培养基是叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+6-BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+琼脂6 g/L为佳;AgNO3比活性炭和PVP更利于叶片的诱导;与蔗糖相比山梨醇更适宜作为叶片再生的碳源,最佳浓度是10 mg/L,叶片再生频率最高为74.03%,平均再生芽数1.01。生根培养基以ASH+IBA 10 mg/L+间苯三酚80 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L为佳,生根率高且根粗壮。     

草樱组织快繁技术的研究

以樱桃砧木草樱的嫩梢为外植体,进行离体培养,筛选出的启动培养基配方为MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA2.0 mg/L;诱导丛生苗的培养基配方MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L;诱导生根的培养基配方1/2MS+1AA 1.5 mg/L.     

多裂叶荆芥离体再生体系的建立

以多裂叶荆芥无菌幼苗根、茎段、叶片等为外植体,进行不定芽离体再生,建立了多裂叶荆芥离体快速繁殖体系,研究了不同外植体和附加不同外源激素配比对不定芽离体再生的影响。结果表明:多裂叶荆芥离体再生的最佳外植体为带有叶腋的茎段,诱导不定芽再生的适宜培养基为MS+0.2mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,每个外植体产生不定芽数平均为18个;不定芽增殖培养每4周为1个周期,理论年繁殖系数可达1×1812;当不定芽生长至3~4cm时移入生根培养基诱导生根;适宜的生根培养基为MS+0.2mg/L NAA,移栽成活率为53.85%。     

樱桃砧木‘大青叶’茎段离体培养与快繁技术

以引种栽培的樱桃砧木‘大青叶’茎段为试材,探讨基本培养基和植物生长调节剂对茎段腋芽萌发、生长与增殖的效应,筛选离体培养的最适培养基。结果表明：MS＋6－BA0．5mg／L＋zT 0．1mg／L＋蔗糖20g／L＋琼脂0．6mg／L、MS＋6－BA1．0mg／L＋ZT 0．1g／L＋蔗糖20g／L为丛生芽诱导及分化增殖的最适培养基;1／2MS＋IBA 0．7mg／L＋NAA 0．2mg／L＋琼脂0．6mg／L为生根诱导的最佳培养基配方。     

印度彩叶榕‘红关公’离体培养体系的研究

以印度彩叶榕‘红关公’茎尖及带腋芽茎段为材料,以MS为基本培养基附加不同的激素组合,筛选最佳培养基配方,成功的建立了‘红关公’的离体快繁优化体系。结果表明:外植体初代诱导最佳培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率达66.7%;丛生芽增殖培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数达2.43;最佳生根培养基为:1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L,其生根率达100%。该研究成功建立了印度彩叶榕‘红关公’的离体再生体系,为其规模化生产提供技术支撑。     

樱桃砧木叶片再生系统建立及抗菌肽基因转化

 以优良樱桃砧木新品系98-1、Colt、大青叶为试材进行叶片离体再生及根癌农杆菌介导遗传转化，建立了高频率再生系统，并获得抗菌肽转基因植株。诱导叶片再生的最佳培养基为MS附加BA 1.0—2.0 mg/L、NAA 0.3—0.5 mg/L、GA 0.5 mg/L、AgNO3 5.0—10.0 mg/L。农杆菌及受体感受态是影响转化的关键，延迟筛选可提高叶片中转化细胞对卡那霉素的抗性而利于再生。PCR及Southern Blot检测为阳性，表明抗菌肽基因已整合到樱桃砧木98.1基因组。     

苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养及其叶片不定梢诱导

【目的】建立苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养快繁技术体系及其离体叶片不定梢再生技术体系,为工厂化生产优质苗木及利用生物技术手段改良品种奠定技术基础。【方法】以苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的半木质化新梢为试材,建立初代无菌试管苗。以试管苗为试材,研究了基本培养基、植物生长调节物质对试管苗继代生长及生根的影响。以离体叶片为外植体,研究了细胞分裂素种类和浓度及碳源对不定梢再生的影响。【结果】半木质化新梢在芽启动培养基上的腋芽萌发率达85%以上。在基本培养基MS和QL上,试管苗的增殖没有显著差异,但生长表现不同,QL培养基上的增殖苗表现出该品种田间生长的红色特征。当细胞分裂素为BA时,蔗糖比D-山梨醇易诱导出叶片不定梢;当细胞分裂素为TDZ并且浓度较高时,D-山梨醇比蔗糖易诱导出叶片不定梢。以添加3 mg·L-1BA和30 g·L-1蔗糖处理获得的不定梢再生率最高,为71.6%。生根诱导,基本培养基1/2MS比1/4MS有效,生长素IBA比NAA有利于提高生根率。【结论】苹果砧木‘BP-176’试管苗适宜的继代增殖培养基为添加1.0 mg·L-1BA和0.1 mg·L-1IBA的QL培养基;最佳不定梢再生培养基为:NM+3 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,最高生根率为69.8%。     

草莓主栽品种再生和转化的研究

 建立草莓主栽品种高效、稳定的离体再生体系和遗传转化体系, 获得了转基因植株。‘弗吉尼亚’和‘森嘎拉’的叶片离体再生芽频率达到100 %。试管苗叶片与农杆菌菌株EHA105 共培养3 d。共培养后的叶片在附加卡那霉素40 mg/L 的再生培养基上选择培养4周后, 外植体再生出转化芽, 弗吉尼亚的转化芽再生频率可达6. 8 %。采用组织化学染色法对随机选取的10 个GUS 基因转化植株进行基因表达测定, 结果5 个植株强烈表达GUS 活性。转bar 基因植株在附加除草剂草丁膦10 mg/L 的培养基上能够正常分化, 在田间对草丁膦表现出强烈抗性。转基因植株开花、结果正常。     

薰衣草叶片高频再生体系的建立

 以薰衣草叶片为外植体进行了离体再生研究。结果表明: 叶片愈伤组织诱导最佳的培养基是MS + 2,4-D 0.1 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L, 诱导率高达100%; 液体悬浮—固体培养芽分化率达92.5% , 芽数/愈伤组织达6.6; 正交试验筛选出芽增殖最佳培养基为MS +NAA 2.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L + IAA 1.0 mg/L, 其增殖系数高达8.7; 在芽增殖培养基上可直接生根, 生根率达100%。     

紫叶稠李叶片离体培养再生植株

以紫叶稠李为试材,采用组织培养方法,研究不同激素对其试管苗不定芽诱导、不定芽生根及成苗影响。结果表明:叶片切块可诱导产生大量的不定芽,MS附加0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的培养基不定芽诱导率为50.1%;利用植物激素0.5mg/L BA,0.5mg/LNAA,0.5mg/L KT和0.2mg/L IBA的组合,不定芽可多次继代培养增殖;不定芽在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上生根,生根率为67%。该试验结果说明,紫叶稠李试管苗叶片可作为外植体离体培养获得再生植株,BA是主要的调控植物激素,IBA对生根有一定促进作用。     

雪莲果离体培养及植株再生体系的建立

对雪莲果幼嫩叶片和腋芽离体培养与植株再生过程进行了研究,建立了雪莲果的再生体系.该体系以雪莲果叶片和腋芽为材料进行离体培养,结果表明:MS可作为雪莲果再生体系的基本培养基;叶片、腋芽诱导愈伤组织和不定芽培养基为MS 6-BA 2/0 mg/L NAA 0.2mg/L 蔗糖3%;继代培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L 蔗糖3%;生根培养基为1/2 MS IAA 0.3 mg/L 蔗糖3%.     

中国樱桃‘对樱桃’不定根离体再生植株的研究

 采用中国樱桃‘对樱桃’( Prunus pseudocerasus) 无菌生根苗的不定根作为外植体, 成功诱导了胚性愈伤组织, 实现了通过分化不定芽和诱导初生体细胞胚两种方式再生植株。根切段在MS + NAA1.0 mg/L + BA 0.05 mg/L + IBA 0.05 mg/L 培养基诱导获得胚性愈伤组织, 诱导频率达54.2 % , 该愈伤组织在MS + NAA 1.0 mg/L + BA 0.5 mg/L 培养基上不定芽分化率为100 % , 不定芽在MS + BA 0.5 mg/L + IBA 0.1mg/L 培养基上生长发育良好, 转入MS + NAA 0.02 mg/L + IBA 0.02 mg/L 生根培养基生根率达100 %; 整体不定根系统在MS 附加2 ,4-D 1.0～3.0 mg/L 和BA 0.5 mg/L 的培养基上同时诱导初生体细胞胚发生和单极不定芽发生, 每外植体上平均体细胞胚数5～25 个, 不定芽3～22 个。体细胞胚转到MS + BA 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L 培养基上发育为完整植株, 植株再生率100 %。     

不同基因型梨叶片离体培养和植株再生

 以‘巴梨’、‘身不知’和‘早酥’梨试管苗叶片为外植体, 对不定芽进行了诱导、增殖和生根。重点探讨了基本培养基、植物生长调节剂配比、AgNO₃ 不同浓度和NH4⁺-N与NO3^--N比例对不定芽再生的影响。结果表明, MS + TDZ 0.5 mg/L + IBA 0.1 mg/L为‘巴梨’叶片不定芽发生的最佳培养基。在QL + TDZ 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上, 暗培养3周后转光下培养, ‘身不知’和‘早酥’分别获得89.6%、81.2%的不定芽再生率和3.45、3.73的平均再生芽数; 对‘巴梨’和‘早酥’不定芽再生有效促进的AgNO₃ 浓度范围为0.1～0.5 mg/L, 0.1～4.0 mg/L的AgNO₃、1∶2～7的NH₄⁺-N∶NO ₃^--N和21.50mmol/L的K+对‘身不知’叶片再生均有促进作用, 缺乏NH₄⁺-N不利于不定芽的再生; 转移到MS+BA1.0 mg/L + IBA 0.1 mg/L培养基上能快速增殖; 在MS、1 /4MS + IBA 1.0～2.5 mg/L +蔗糖5～15 g/L +活性炭0.5～1.0 g/L上获得了不同程度的生根苗。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

朝天椒子叶离体培养与植株再生体系的建立

以贵州黎平朝天椒地方种为试材,取其无菌苗子叶作外植体,采用植物固体培养基组织培养法,研究了培养基激素配比、无菌苗生理年龄、子叶部位等对朝天椒子叶的离体接种、诱导愈伤、不定芽分化、芽茎伸长、诱导生根、驯化移栽、成苗等离体培养及植株再生阶段的影响。结果表明:朝天椒子叶适宜芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L,芽分化率达100%;适宜芽伸长的培养基为MS+KT 2mg/L,芽伸长率可达50%;适宜生根的培养基为MS无激素培养基,生根率可达44%。单个外植体平均分化含15~18个不定芽的芽丛(14~16个芽茎),出苗6~7株。从子叶外植体接种至再生苗出瓶需50~55d,再生苗移栽成活率达98%。该研究构建了贵州朝天椒的高效离体培养植株再生体系,为朝天椒的组织快繁和遗传转化奠定了重要的基础。