香蕉枯萎病菌4号小种拮抗细菌的筛选与鉴定

为了筛选出对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的生物防治细菌菌株,从香蕉根际土中分离得到87株细菌菌株,采用平板对峙法,筛选出7株对香蕉枯萎病菌4号生理小种具有拮抗作用的菌株,并进行了抑制枯萎病菌4号小种菌丝生长和孢子萌发的试验.结果显示,拮抗菌株255、D5、F2、ZK11、214、215、252的发酵液对菌丝具有显著抑制效果...     

抗香蕉枯萎病菌的卢娜林瑞链霉菌的分离及防效鉴定

为获得具有广谱抑菌活性的拮抗菌株,对海南多年连茬的健康香蕉园土壤进行微生物分离,并以香蕉枯萎病菌4号小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense Race 4)等9种病原菌为靶标菌株,采用平板对峙法、含药介质法、薄层层析法等对拮抗菌的抑菌活性进行评价,根据形态特征、培养性状、生理生化特征、细胞壁组成和16S rDNA序列分析对其进行鉴定。共分离得到放线菌25株,拮抗放线菌8株,其中B-03菌株对香蕉枯萎病菌4号生理小种菌丝生长和孢子萌发抑制率分别为85.43%和80.14%,对香蕉长形叶斑病菌等9种病原菌具有广谱抗性,菌丝生长抑制率、孢子萌发抑制率可达48.34%~85.43%和38.43%~80.14%。经鉴定该菌株为卢娜林瑞链霉菌(Streptomyces lunalinharesii),盆栽试验表明该菌株发酵液对香蕉枯萎病的防效达72.72%,具有良好的应用潜力。     

寿光设施番茄尖孢镰刀菌的分离、鉴定及番茄品种感病研究

从山东省寿光市温室、大棚发病番茄植株上分离纯化获得18个菌株（SG1～SG18），通过柯赫氏法则验证菌株致病性，并结合形态学、分子生物学等方法对菌株进行鉴定。结果表明：分离纯化的病原菌均为尖孢镰刀菌番茄专化型（Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici），所引起的病害为番茄枯萎病。其中菌株SG6、SG7、SG17为番茄枯萎病菌生理小种1，其余菌株为番茄枯萎病菌生理小种3。不同番茄品种接种3个番茄枯萎病菌生理小种的盆栽试验结果表明，釜山88是比较典型的番茄枯萎病菌3个生理小种的易感病品种，圣安妮和草莓番茄是适合寿光地区栽培的较抗番茄枯萎病品种。     

香蕉枯萎病菌4号生理小种分子检测与枯萎病生物防治研究进展

香蕉枯萎病菌根据鉴别寄主的不同分为4个生理小种,其中4号生理小种(FOCRace4)几乎对所有香蕉栽培种均致病,严重威胁香蕉产业的可持续健康发展。近年来在广东、海南等地相继出现由4号生理小种侵染引起的香蕉枯萎病,并有进一步扩展蔓延的趋势。迄今为止,还没有一种理想的药剂可以有效防治该病,因此加强香蕉枯萎病的检验检疫工作,寻找有效的防治方法,控制该病的蔓延和危害迫在眉睫,而发展一种快速检测4号生理小种的技术方法将为检验检疫提供有力的技术支持。另一方面,生物防治也将成为控制该病害的一个新途径。概述了香蕉枯萎病菌4号生理小种的生物学特性、DNA分子标记技术、特异引物PCR检测技术、生防菌株的筛选和植物提取物的筛选等方面的研究进展,以期能为香蕉枯萎病的检测和防治提供有益的借鉴。     

根肿菌Williams系统中各单孢生理小种的获得与鉴定

将根肿菌单孢分离技术和Williams生理小种鉴定方法结合,对中国9个大白菜主要产区的根肿菌进行单孢分离及生理小种鉴定。共获得281个单孢菌株,通过Williams鉴定,这些单孢菌株分别属于该系统中除5号生理小种之外的15个生理小种类型。其中4号生理小种所占比例最大,共191个,占67.97%,9个地区的优势生理小种均为4号小种。     

抗枯萎病粉蕉新品种育粉6号的选育

育粉6号是金粉1号粉蕉品种经组培诱变选育出来的抗香蕉枯萎病粉蕉新品种。新植蕉平均株高为335.3 cm，假茎基围、中围为84.2和57.5 cm，分别比金粉1号小27.1%、23.3%和11.5%。成熟果实可溶性固形物含量(w，后同)为28.9%、可滴定酸含量为1.4%、维生素C含量为12.8 mg·100 g-1、还原糖含量为14.4%，可食率为75.5%，风味甘甜无酸，品质优。新植蕉生长周期13～15个月，比金粉1号短2～3个月，宿根蕉生长周期比金粉1号短1～2个月。该品种高抗Foc 4号生理小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense race 4)，田间枯萎病发病率0.1%～5.0%。果实成熟后期无梅花点，货架期4～6 d。该品种在我国香蕉产区种植均表现出较好的适应性。平均单株产量22.5 kg，单位面积产量42 000kg·hm^-2(1860株·hm^-2)。     

香蕉枯萎病菌4号生理小种密码子使用偏好性分析

为了解香蕉枯萎病4号生理小种基因组的密码子使用特点,掌握其基因编码规律,以香蕉枯萎病4号生理小种基因组的13 303条高置信蛋白的编码信息为数据来源,借助CodonW等软件对蛋白质的每个氨基酸编码数据进行统计分析,研究获得了UCC和CCC等8个密码子为最优密码子,第三个碱基为C的密码子具有更高的选择性。进一步统计分析了mRNA的编码区长度,发现密码子使用偏好性随着编码区的延长而降低,较长编码区的基因对密码子的使用无显著偏好性,为建立和优化香蕉枯萎病菌的遗传转化系统具有直接的指导作用。     

香蕉枯萎病菌1号和4号生理小种内切多聚半乳糖醛酸酶基因的比较

通过基因克隆和测序方法，对来自国内外尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f. sp.cubense(简称Foc) 1号和4号小种的6个菌株endo-PG基因同源性、与其他真菌的亲缘关系以及endo-PG基因和氨基酸序列进行分析，为香蕉枯萎病菌致病机制的研究奠定基础。结果表明，同小种的endo-PG序列同源性高，亲缘关系近，不同小种的同源性较低，亲缘关系较远；总体来说，4号小种比1号小种同源性更高，亲缘关系更近。在全基因序列分析中，没有发现明显的基因差异可以作为区分2个小种致病性差异的依据。根据预测的CDS序列翻译成氨基酸序列比对，发现6个菌株的endo-PG基因编码的氨基酸变异并没有引起相关保守结构域的变化，推测6个菌株的致病性可能与endo-PG基因的调控相关。     

韭菜对香蕉枯萎病菌4号生理小种的抑制作用及对香蕉枯萎病的防控研究（英文）

以香蕉枯萎病4号生理小种（Foc4）及巴西香蕉（AAA）和广粉1号粉蕉（ABB）为材料,研究了韭菜对Foc4的抑制作用及其对香蕉枯萎病的防控效果。结果表明,韭菜粗提取液能显著抑制Foc4菌丝的生长,孢子的萌发。透射电镜和激光共聚焦显微镜观察显示,韭菜对Foc4菌丝细胞结构有极大的破坏作用,并对其孢子有极高的杀灭作用。大...     

香蕉枯萎病拮抗放线菌的分离鉴定及抑菌机理分析

为丰富香蕉枯萎病生防菌资源,探究其抑菌机理,从润楠Machilus pingii根系土壤中分离筛选对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的放线菌,基于16S rRNA序列进化分析和生理生化特征,鉴定其种属。利用激光共聚焦显微镜评测盆栽试验的防控效果,并通过扫描电镜、透射电镜分析其对枯萎病菌孢子形态结构及超微结构的影响。结果表明,试验筛选出1株拮抗效果较好的放线菌,鉴定为链霉菌属,命名为JRGG-11。该菌对枯萎病菌4号生理小种(Foc 4)的抑菌率为(80.48±1.49)%,发酵液的抑菌率为(58.77±1.31)%,发酵液对Foc 4的盆栽防控效果为83.10%。菌株JRGG-11提取物对Foc 4菌丝生长抑制的EC_(50)为18.70μg/mL,当用4×EC_(50)处理时,Foc 4菌丝形态和细胞完整性被严重破坏,孢子萌发完全被抑制。说明链霉菌JRGG-11具有较好的生防潜能。     

生化标记在河北省栽培平菇种质资源鉴别中的应用研究

采用体细胞营养亲和测定和酯酶同工酶分析对河北省广泛栽培的54个平菇菌株进行了种质鉴别和遗传多样性研究。结果表明:54个平菇菌株经营养亲和测定划分成了12个不同营养亲和群,酯酶同工酶分析结果表明,同一营养亲和群内菌株酯酶同工酶酶谱相同,不同营养亲和群菌株酯酶同工酶酶谱有差异。聚类分析结果表明,不同营养亲和群菌株相似系数为53%~91%。     

利用甲基磺酸乙酯和枯萎病菌毒素诱变筛选香蕉抗毒素突变体

 以化学诱变剂甲基磺酸乙酯（EMS）和香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. cubense）4号生理小种的粗毒素为诱变剂,以香蕉愈伤组织和分化芽为筛选材料,通过多步筛选法,优化了筛选体系,并筛选出了抗香蕉枯萎病菌毒素的突变体。以体积百分比浓度为0.5%的EMS 分别处理香蕉愈伤组织和分化芽40 min,获得“半致死剂量”效应,对存活的香蕉愈伤组织和分化芽在依次递增的粗毒素浓度（5.0%→10.0%→12.5%）胁迫下进行定向筛选,获得了抗香蕉枯萎病菌毒素的愈伤组织块和分化芽,从抗病分化芽突变体获得了再生植株。对再生植株抗毒素的性能进行鉴定,其病情指数（24.72）显著低于对照植株（96.11）,抗毒素效果达到74.28%。     

Bioassay method for testing Fusarium wilt disease tolerance in transgenic banana

Fusarium wilt caused by the fungus, Fusarium oxysporum f.sp. cubense is a major factor limiting commercial banana production in Malaysia. Field evaluation of banana plants for Fusarium wilt disease has not been effective as the infection period is slow and other variables such as distribution of inoculum concentration is difficult to control. Therefore, a study was carried out to develop a semi-qualitative bioassay for early and rapid susceptibility tests against Fusarium wilt disease in banana plantlets. The induction of sporulation and germination of Foc race 1 (VCG 01217) were firstly determined. Then, the effect of inoculum density of fungal spores on the magnitude of infection in Pisang Rastali (AAB) plantlets was carried out. The concentration of hydrogen peroxide (H₂O₂) and other enzyme activities such as phenylalanine ammonia lyase (PAL), chitinase, glucanase, peroxidase (PER) and polyphenol oxidase (PPO) in infected roots of banana plants were determined to relate to the levels of tolerance or susceptibility to Fusarium wilt disease. Using similar conditions, transgenic Pisang Rastali (AAB) was tested to investigate the effectiveness of this bioassay. Hydrogen peroxide and phenylalanine ammonia lyase is the most sensitive compound and enzyme detectable after inoculated with Fusarium spores. The chitinase, β-1,3-glucanases, peroxidase and polyphenol oxidase enzymes activity of transgenic plants were higher than untransformed plantlets. The results obtained indicate that the use of these biochemical parameters has the potential to predict the levels of tolerance or susceptibility to Fusarium wilt disease in other banana cultivars.     

香蕉品种对枯萎病菌感病性与对病菌毒素敏感性之间的相关性

为明确香蕉品种对香蕉枯萎病菌感病性与对病菌粗毒素敏感性之间的相关性,采用根部病菌孢子接种测定了36份香蕉品种苗对香蕉枯萎病菌4号生理小种的感病性,以及采用植株根部和叶片毒素处理测定了5份香蕉品种苗对病菌粗毒素的敏感性。结果表明,天宝角蕉(AAA)、柴蕉(AAA)、广粉1号(AAB)和贡蕉(AA)表现抗病,哥斯达黎加蕉(AAA)和抗枯5号(AAA)表现中抗;感病品种对毒素的敏感性高于抗病品种。通过香蕉不同品种的病情指数、萎蔫指数和叶片损伤面积的差别分析,发现香蕉苗期对枯萎病菌感病性与对病菌粗毒素敏感性之间存在正相关性,60d龄期的假植苗病情指数与其叶片损伤面积之间存在显著的正相关性。因而叶片毒素处理法测量香蕉假植苗中部叶片损伤面积可作为一种快速区别香蕉抗病能力的有效方法。     

香蕉枯萎病菌新毒素——白僵菌素的鉴定

 调查并分离了广东、海南、广西、福建和云南等香蕉枯萎病疫区的一批病原菌样本。利用高效液相色谱—电喷雾离子阱质谱（HPLC-ESI-MS）法对所分离的28个Fusarium oxysporum f. sp. cubense菌株的次生代谢产物进行初步分析。发现了分子量为179 D的镰刀菌酸及分子量约为783 D的未知产物;利用¹H-NMR对一株4号生理小种的未知产物进行了结构测定,结果表明该化合物为白僵菌素。离体试验表明白僵菌素能够导致香蕉假茎腐烂。     

香蕉对尖孢镰刀菌热带4号小种的抗性评价方法的建立

为了准确快速地评价香蕉对枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. cubense）热带4号小种（Tropical race 4,Foc TR4）的抗性,在温室条件下以浸根法和改良的灌根法将Foc TR4接种至不同抗性的香蕉品种,比较分析接种后香蕉的发病情况,并检测了两个Foc TR4的特异引物的扩增效率,以完善评价方法。结果显示,利用两种方法接种都能体现香蕉的抗性,但改良的灌根法在孢子浓度为1 × 10⁴时的接种效果最好,接种后各品种发病情况与品种本身的实际抗性最为接近。特异引物Foc TR4 F/R的扩增效率较高,1次和2次PCR分别能有效检测发病等级为3和1以上的香蕉球茎。     

应用UP-PCR进行瓜类保护地土壤镰孢菌多样性分析

采用Universally Primed PCR（UP-PCR）技术对分离自辽宁省瓜类作物保护地土壤中的25株镰孢菌菌株和3株对照镰孢菌菌株进行了遗传多样性分析。筛选出6个扩增多态性好且稳定的通用引物，共扩增出73条带，其中多态性条带66条，占总条带数的90.4 %。当相似系数为0.736时，可将28株镰孢菌菌株划分为8个类群，其中14株尖孢镰孢菌菌株聚为一个类群。     

香蕉枯萎病菌的风险性分析

由尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f.sp.cubense引起的香蕉枯萎病是世界性的香蕉毁灭性病害之一,也是国际植物病害检疫对象和我国广东省、福建省补充的植物检疫对象.为加大对该病的防治和检疫力度,控制其扩散、蔓延和危害,保护香蕉生产的安全,促进我国香蕉非疫区的建设,通过全面搜集香蕉枯萎病菌的...