睡眠剥夺对雄性小鼠体重及性行为的影响

为了探讨不同时程睡眠剥夺对雄性小鼠体重及性行为的影响,试验选用48只昆明成熟雄性小鼠,随机分为对照组(0 h)和试验组(1组、2组、3组),采用轻柔刺激法分别睡眠剥夺试验组小鼠24 h、48 h、72 h,测定体重及脏器系数,观察性行为的捕捉潜伏期与捕捉次数。结果表明:24 h睡眠剥夺后捕捉次数、小鼠体重、脏器系数无显著变化(P0.05),而捕捉潜伏期显著升高(P0.05);48 h睡眠剥夺后捕捉次数、小鼠体重极显著降低(P0.01),捕捉潜伏期显著升高(P0.05),但脏器系数无显著变化(P0.05);72 h睡眠剥夺后捕捉次数、小鼠体重极显著降低(P0.01),捕捉潜伏期极显著升高(P0.01),肾脏系数显著降低(P0.05),睾丸系数差异不显著(P0.05)。表明24 h睡眠剥夺对雄性小鼠体重与性行为未产生明显影响,48 h及72 h睡眠剥夺可使雄性小鼠体重及性行为活跃度显著降低。     

菟丝子水提液对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的保护作用研究

为了探讨菟丝子水提液对环磷酰胺(CP)所致雄性小鼠生殖损伤的保护作用,试验对SPF级KM雄性小鼠腹腔注射CP制作生殖损伤模型,再将其分为CP对照组及高、中、低剂量菟丝子组,各剂量组小鼠灌胃给予菟丝子水提液,观察菟丝子水提液对CP所致生殖损伤小鼠附睾系数、睾丸系数、精子密度、精子活率、精子活力、精子畸形率、睾丸形态的影响。结果表明:与CP对照组比较,高、中、低剂量菟丝子组均可显著提高小鼠附睾系数、睾丸系数、精子密度、精子活率、精子活力,并降低精子畸形率(P0.05)。同时,与CP对照组相比较,高、中、低剂量菟丝子组小鼠睾丸生精上皮明显变厚,生精细胞和间质细胞数量明显增多,管腔内各级精母细胞和精子细胞明显增多。说明菟丝子水提液对CP所致雄性小鼠生殖损伤具有保护作用。     

增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

为评价增精宝对雄性动物生精作用的影响,采用环磷酰胺致小鼠生精障碍为动物模型,考察不同剂量增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍的保护作用。结果显示,高剂量组对小鼠的附睾、睾丸、储精囊和前列腺均有较显著的促进作用;低剂量组精子总密度和精子活率均差异显著(P<0.05);高剂量组精子活率差异显著(P<0.05);对小鼠睾丸各倍体生精细胞比例的影响,高剂量组小鼠睾丸生精小管较为饱满,管腔内存在大量精子,生精上皮较厚,可见各级生精细胞排列整齐,界膜明显,睾丸间质细胞排列整齐。结论表明,增精宝两种剂量均能够显著促进环磷酰胺导致小鼠生精障碍的保护作用,高剂量组对雄性小鼠的作用尤为显著。     

3-甲基-4-硝基酚对雄性小鼠生殖毒性的研究

目的探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)对雄性小鼠的生殖毒性作用。方法 20只小鼠随机分成阴性对照组和PNMC组(分0.9、9和90mg/kg·bw组),经口灌胃染毒30天,观察睾丸和精子的形态变化。结果染毒组小鼠各剂量睾丸生精细胞发生坏死,曲细精管腔内出现细胞团,精子细胞分化异常,形成均质红染颗粒,睾丸曲细精管生精上皮/直径比值在90mg/kg组明显高于对照组;染毒组小鼠精子畸形率明显高于对照组(P<0.05),并且随着染毒浓度的增加,畸形率有增加的趋势。结论 3-甲基-4-硝基酚不仅可以引起生精细胞坏死和抑制精子形成,还可以诱导精子畸变,从而对生殖系统造成损伤。     

开放式采精对种公马采精和精液质量的影响

研究开放式采精对种公马采精准备时间、爬跨次数、射精时间、射精量、精子密度、精子活率和24h保鲜精精子活率的影响。6匹种公马分为试验组和对照组,试验组采用开放式采精,对照组采用普通密闭采精,测定上述指标并进行统计学分析。结果表明,种公马准备时间、爬跨次数和射精时间试验组均显著高于对照组,第二周试验组均极显著低于第一周试验组;试验组精子密度极显著高于对照组(P 0.01);精子活率各组无显著差异;24h精子活率试验组极显著高于对照组(P 0.01),而两周试验组无显著差异(P0.05)。种公马可适应开放式采精且采集的精液保鲜精活率较高。     

氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响

本试验探讨了氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响,为氟的生殖毒性研究与检测提供依据。选取8周龄性成熟雄性昆明小鼠20只,随机分为4组,对照组小鼠饮用蒸馏水,低、中和高氟组小鼠分别饮用含25、50和100 mg/L氟化钠的蒸馏水,于45 d后断颈处死小鼠,取小鼠附睾尾,经2.5%戊二醛固定后,采用透射电镜观察小鼠附睾中成熟精子的超微结构变化。与对照组相比,低氟组小鼠精子头部质膜断裂,部分脱落,个别线粒体肿胀、形态模糊;中氟组精子头部质膜脱落,顶体部分缺失,线粒体形状不规则,嵴间腔扩大;高氟组精子头部质膜脱落,线粒体排列不规则,出现空泡化,嵴结构模糊。结果表明,氟暴露小鼠附睾中成熟精子头、尾部中段均有不同程度的结构改变,尤以线粒体出现较明显的异常,且氟浓度越高,精子超微结构损伤越严重。     

热应激对小鼠附睾内精子的形态学影响

用不同温度（42℃、37℃和33℃）,每天在固定时间对小鼠实施1h的热应激处理。在热应激持续到8d、13d、21d、35d时,颈椎脱臼处死小鼠,取附睾尾制备精子悬液并测定其密度,用改良巴氏染色法检测精子顶体完整率和畸形率。结果：42℃组热应激处理的小鼠附睾内精子密度和顶体完整率,随着热应激持续时间的延长而不断降低,畸形率则不断升高,且与对照组间有显著（P〈0．05）差异;37℃和33℃组热应激处理的小鼠附睾内精子密度、顶体完整率和畸形率,随着热应激持续时间的延长都不断的增加,但都显著（P〈0．05）低于或接近（P〉0．05）对照组的水平。     

母猪低剂量深部输精技术研究

本研究旨在通过优化输精剂量和输精内管插入深度,为低剂量深部输精技术推广应用提供技术参考。实验一,检测12组不同有效精子数（30亿、15亿、7.5亿、5亿）和输精体积（80、60、40 mL）的低剂量猪精液分别保存12、24、48、72 h后的精子活率,30亿/80 mL为对照组,以寻找不影响保存效果和繁殖性能的最低输精剂量;实验二,评价筛选出的低剂量精液深部输精效果,常规输精30亿/80 mL为对照组,每组输精100头,测定母猪的受胎率、分娩率、产仔数等繁殖性能参数;实验三,测量统计大白、长白、二元不同品种和3胎以下、3胎以上不同胎次母猪深部输精内管插入深度。结果表明：与对照组相比,不同有效精子数和体积的精液在保存12、24、48、72 h后相同时间的精子活率无显著差异;10亿/80 mL、7.5亿/80 mL、15亿/40mL和7.5亿/40mL组低剂量精液保存72h后的精子活率低于保存12h(P<0.05);低剂量深部输精组的受胎率和分娩率与对照组无显著性差异;深部输精15亿/80 mL、15亿/40 mL和7.5亿/40 mL组不影响窝均产仔数（P>0.05）,提高了...     

鼠去透明带裸卵的体外受精及其胚胎发育

为了建立提高小鼠弱精子体外受精率的新方法，将小鼠宰杀在20℃下搁置14h，然后取出附睾尾精子进行冷冻保存。用解冻后活力明显下降的精子，与去透明带裸卵进行体外受精。结果显示，与带有颗粒细胞卵的体外受精率（0％） 透明带切开卵的体外受精率（4％－31％）相比，去透明带卵的体外受精率增至39％－68％（P＜0．01）；体外受精所 2细胞胚，经培养有74％－100％的胚胎发育至扩经囊胚；来自BDF1雄性小鼠精子的2细胞期体外受精胚，经体外培养至囊胚期后再移植，获得了正常新生小鼠，以上结果表明，去透明带裸卵与小鼠弱精子体外受精，可提高小鼠弱精子的利用率。     

水牛附睾尾精子的体外受精

采用肝素诱导获能 ,比较了 TAL P液和 BO液处理水牛附睾尾精子进行体外受精和细管冷冻精液体外受精的效果。结果表明 ,用 BO液和 TAL P液分别处理水牛附睾尾精子 ,受精后的卵裂率分别为 4 6 .6 7%和 5 3.73% ,发育率分别为 2 1.6 7%和 2 6 .87% ,其受精效果差异不显著。综合 2种方法 ,水牛附睾尾精子的受精率为 5 7.14 % ,受精后的卵裂率为 5 0 .39% ;发育率相对于培养卵为 2 4 .4 1% ,相对于卵裂卵为 4 8.4 4 % ;与细管冷冻精液 (5 6 .0 0 % ,5 4 .31% ,2 6 .72 % ,4 9.2 1% )相比 ,差异不显著。形态学观察还表明 ,用保温干储的方法可获得活率好、存活时间长的附睾尾精子。试验结果说明水牛附睾尾精子用于体外受精可以得到与细管冷冻精液相当的效果。     

小鼠去透明带裸卵的体外受精及其胚胎发育

为了建立提高小鼠弱精子体外受精率的新方法 ,将小鼠宰杀在 2 0℃下搁置 14 h,然后取出附睾尾精子进行冷冻保存。用解冻后活力明显下降的精子 ,与去透明带裸卵进行体外受精。结果显示 ,与带有颗粒细胞卵的体外受精率(0 % )和透明带切开卵的体外受精率 (4%～ 31% )相比 ,去透明带卵的体外受精率增至 39%～ 6 8% (P<0 .0 1) ;体外受精所获的 2细胞胚 ,经培养有 74 %～ 10 0 %的胚胎发育至扩张囊胚 ;来自 BDF1雄性小鼠精子的 2细胞期体外受精胚 ,经体外培养至囊胚期后再移植 ,获得了正常新生小鼠。以上结果表明 ,去透明带裸卵与小鼠弱精子体外受精 ,可提高小鼠弱精子的利用率     

柠檬酸对小鼠精子特性和睾丸组织形态结构的影响

60只雄性小鼠随机分为4组,每天分别腹腔注射0.2mL的0.9%生理盐水或7.5、15、30g/L CA,于14、21d测定曲细精管精子的生成及附睾内精子特性的相关数据。结果显示,随柠檬酸处理剂量的增加精子的生成数减少。14d时,对照组与15、30g/L CA组间、7.5、30g/L CA组间曲细精管内精子的生成差异显著（P〈0.05）;21d时,对照组与柠檬酸处理组间及7.5、15g/L CA与30g/L CA处理组间曲细精管内精子的生成有显著差异（P〈0.05）。柠檬酸对附睾精子品质的影响表现为：对照组与柠檬酸处理组间及柠檬酸处理组间精子密度和活动率差异均显著（P〈0.05）;对照组和15、30g/L CA处理组及15g/L CA与30g/L CA处理组间精子活力差异显著（P〈0.05）;精子的畸形率随柠檬酸浓度的增加而增加,15g/L CA处理组精子畸形率显著高于对照组（P〈0.05）,30g/LCA处理组显著高于对照组和7.5g/L CA（P〈0.05）处理组。组织形态学观察结果表明柠檬酸能破坏睾丸正常组织形态结构。柠檬酸高剂量组的生精小管内生精细胞排列疏松、紊乱,生精细胞间出现空隙;生精小管中的生精细胞脱落或退化,精原细胞、精母细胞和精子数量明显减少。研究表明,外源柠檬酸雄性小鼠具有显著的生殖遗传毒性。     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响

旨在研究PNPLA5基因对雄性大鼠繁殖性能的影响。本研究以PNPLA5敲除型雄性大鼠(KO)为试验组,野生型大鼠(WT)为对照组,分别饲喂普通饲料,并采集大鼠附睾精子及睾丸组织。利用繁殖试验检测配种后雌鼠的妊娠率及平均产仔数,精子运动性能分析检测精子运动能力,Western blot检测精子中线粒体功能相关细胞色素C(cytochrome C,Cytc)与细胞色素C氧化酶亚基IV(cytochrome c oxidase subunit IV,COX IV)的表达水平,HE染色检测睾丸组织形态。结果表明:与野生型雄性大鼠相比,PNPLA5敲除型雄鼠与野生型雌鼠配种后,雌鼠的妊娠率极显著下降(P<0.01);精子的曲线运动速度显著降低(P<0.05)及渐进运动精子的百分率极显著降低(P<0.01);PNPLA5敲除型大鼠精子中细胞色素C表达量下调,细胞色素C氧化酶亚基IV表达量上调,但差异均不显著(P>0.05);PNPLA5基因缺失引起大鼠睾丸组织结构疏松,曲细精管中各阶段生精细胞排列紊乱,上皮细胞脱落至管腔。综上表明,本研究发现PNPLA5基因敲除能够引起雄性大鼠繁殖能力降低,为家畜繁殖研究提供重要的参考依据。     

测定冻精酶活性的高低预测精液品质

[目的]为了通过测定牛冻精谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的活性高低来预测精液品质.[方法]用人医血清酶类测定的赖氏法测定两种酶的活性.[结果]表明:谷丙转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.01),与顶体完整率呈显著负相关(P＜0.05);谷草转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.05),与顶体完整率呈极显著负相关(P＜0.01).[结论 ]谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性愈高,精子活率和顶体完整率愈低,精子品质下降.     

抗真菌药安特芬的小鼠微核试验与精子畸形试验研究

采用小鼠精子畸形试验和微核试验,对安特芬(特比萘芬)进行体内致突变性评价。微核试验:小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),连续两次灌胃,间隔24 h,末次灌胃6 h后处死小鼠,取股骨制成骨髓涂片,Gimsa染色,读取微核率;精子畸形试验:雄性小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),灌胃5 d,首次给药35 d后处死小鼠,取附睾制片,读取精子畸形率。试验结果显示,安特芬试验组小鼠微核发生率与阴性对照组差异不显著(P＞0.05),而阳性对照组微核发生率极显著高于阴性对照组(P＜0.01);安特芬试验组小鼠精子畸形率与阴性对照组差异不显著(P＞0.05),阳性对照组精子畸形率极显著高于阴性对照组(P＜0.01)。研究结果表明,新药安特芬在推荐剂量下无体内致突变作用。     

几种常用营养试剂对波尔山羊精子活率的影响

本实验旨在研究常用的几种营养试剂对波尔山羊精子活率的影响。在25℃时，第一组（果糖、葡萄糖、蔗糖）精子活率最高（0.92）；第二组（鲜牛奶、印黄）精子活率最低（0.70）；第三组（果糖、葡萄糖、蔗糖鲜、牛奶、卵黄）精子活率居中（0.81），差异极显著（P＜0.01）；在－196℃时，第三组精子活率最高（0.51）；第一组精子活率最低（0.30）；第二组精子活率居中（0.48），差异极显著（P＜0.01）。结果表明，对于采精后立即实施人工授精或短时间保存精液（25℃），使用糖类试剂最好，若长时间保存精液（－196℃），糖类和奶类及卵黄混合试剂最好。     

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻—解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。     

奶山羊XY精子分离及低剂量输精效果研究

用假阴道法采集6只西农萨能羊种公羊精液,经过7h运输,利用流式细胞仪进行XY精子分离、冷冻.对16只阴道硅胶栓+孕马血清同期发情处理的母羊,撤栓后58～66 h采用腹腔内窥镜子宫角低剂量输入106个有效Y精子,与用同一头种公羊人工授精配种的10只母羊进行对照.结果表明:1份(11号公羊)精液能够达到60%活率,X精子分离速度(4 200 sperm/sec)不同于Y精子分离速度(4 500 sperm/sec),共获得66管冻精(X31管,Y35管),X、Y型冻精活率分别为0.45±0.04和0.43±0.03;2 h存活指数均为0.05;顶体完整率分别为(70.1±10.1)%和(68.9±6.8)%;每管有效精子数为104.85万±6.11万和103.20万±8.31万;性别比分别为94.36%和96.19%.腹腔内窥镜低剂量冻精输精试验中,试验组出生率为25%,而对照组为90%;试验组4只羔羊全部为雄性;试验组和对照组母羊妊娠期、羔羊出生重等差异不显著.因此,利用流式细胞分选和冷冻技术可以获得高纯度奶山羊冷冻X和Y精子,并通过腹腔镜低剂量输精能够获得健康后代.     

As_2O_3对小鼠雄性生殖系统的毒性作用

为了研究三氧化二砷(As_2O_3)对雄性小鼠生殖系统的影响,将40只6周龄雄性小鼠随机分为4组,以0,3,6,9 mg/kg的剂量连续4周皮下注射As_2O_3溶液,观察睾丸和附睾病理变化,检测精子活力、血浆和睾丸中砷含量、睾酮含量、抗氧化指标(MDA、GSH-Px)、生殖相关标志性分子AR、GPx5和Miwi基因表达以及Miwi定位表达。结果显示,As_2O_3处理组中睾丸生精管畸形,管内生精细胞排列紊乱,附睾管内精子和生精细胞显著减少。随着As_2O_3浓度的增加,精子活力下降,血浆和睾丸中的砷含量增加,睾酮水平降低。在血浆和睾丸中,MDA和GSH-Px含量在6和9 mg/kg As_2O_3组显著增加(P0.05)。生殖相关标志性分子AR、GPx5和Miwi的表达量与对照组相比显著降低(P0.05)。Miwi在睾丸初级精母细胞中的定位表达随着As_2O_3剂量的增加明显降低。上述结果表明,As_2O_3诱导小鼠发生氧化应激,阻碍了小鼠的精子成熟和精子发生,导致生殖毒性。