黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附及肠道定植规律的研究

[目的]研究黏红酵母(Rhodotorula glutinis)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus casei)对牙鲆肠黏液的黏附能力,探讨黏红酵母在牙鲆肠道中的定植规律及对牙鲆抗病能力的影响。[方法]采用体外黏液黏附模型测定上述4株益生菌的黏液黏附能力,平板菌落计数法测定黏红酵母在肠道的数量。[结果]黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附能力最强,其次是鼠李糖乳杆菌,纳豆芽孢杆菌黏附能力最弱。投喂含黏红酵母饲料的牙鲆肠道其酵母数量达到了103～104cfu/g内含物。鳗弧菌攻毒后,对照组牙鲆死亡率显著高于黏红酵母组。[结论]黏红酵母在牙鲆肠道具有较好定植潜能并能降低牙鲆因弧菌引起的死亡率,因此具有较好的应用前景。     

4株内生真菌对沙地云杉立枯病的抗病作用

  目的  探究沙地云杉Pieca mongolica内生拮抗菌对沙地云杉立枯病菌Fusarium sp.的拮抗作用,旨在为利用生物资源、开发生防菌提供依据。  方法  以前期筛选出的4株具有强拮抗作用的沙地云杉内生真菌互隔链格孢菌Alternaria alternata (SDYS36)、三线镰刀菌Fusarium tricinctum (SDYS63)、产黄青霉菌Penicillium chrysogenum (SDYS95)、聚多曲霉菌Aspergillus sydowii (SDYS180)为材料,以沙地云杉立枯病菌为靶标菌,采用体外对峙和盆栽试验,测定内生真菌对病原菌的体外拮抗性及感病幼苗的形态和相关生理指标变化,通过显著性分析筛选优势拮抗菌株。  结果  4株内生拮抗菌对立枯病菌均表现出体外拮抗活性,SDYS180的发酵液拮抗活性最高,达78.67%;SDYS95的菌株拮抗活性最高,达69.64%;SDYS63的挥发性代谢产物拮抗活性最高,达16.94%。4株内生拮抗菌对盆栽沙地云杉立枯病菌均表现出不同程度的拮抗活性,接种SDYS180促进染病幼苗的组织生长,株高、地径和根长分别提高17.12%、32.64%和16.56%;接种SDYS95的染病幼苗可溶性蛋白质质量分数提高13.41%,丙二醛质量摩尔浓度降低5.27%,过氧化物酶活性提高224.46%,超氧化物歧化酶活性提高37.05%,过氧化氢酶活性提高9.02%。  结论  菌株SDYS180和SDYS95是筛选出的防治沙地云杉立枯病的优势拮抗生防菌。图8表1 参23     

贵州省黔东南州太子参斑点病的调查及防治

[目的]分离获得太子参斑点病的致病菌,并筛选出对太子参斑点病抑菌效果较好的杀菌剂。[方法]从病叶中分离得到病原菌,采用菌丝生长速率法分别测定多菌灵、百菌清、代森锰锌及甲基托布津对该病原菌的抑菌活性。[结果]镜检结果表明,太子参斑点病的主要致病菌为斑点叶点霉属（Phyllosticta commonsii）和链格孢属（Alternaria sp.）。抑菌试验结果表明,4种药剂对太子参斑点病均有抑制作用,其中多菌灵效果最好,抑菌率达到76.6%;甲基托布津次之,抑菌率为72.3%;代森锰锌为68.7%;百菌清为44.7%。[结论]50%多菌灵WP对太子参斑点病的抑菌效果最好。     

Biocontrol Efficacy of Two Antagonistic Yeasts Against Postharvest Diseases in Peach Fruits During Storage Periods

Two antagonistic yeasts, Thichosporon pullulans and Cryptococcus laurentii, were investigated for their biocontrol potential to blue mold rot and rhizopus rot on harvested peach fruits (Prunus persica L. Batsch, cv. Okubao), alone or in combination with a Iow dose of iprodione (50 μg mi-1 ). The results indicated that T. pullulans and C. laurentii were effective at reducing disease incidence and severity of blue mold rot and rhizopus rot in peach fruits. Biocontrol efficacy of C. laurentii and T. pullulans were significantly enhanced by combination with a Iow dose of iprodione (50 μg mi-1) against blue mold and rhizopus rot in peach fruits. T. pullulans and C. laurentii combined with a low dose of iprodione (50 μg mi-1 ) resulted in better disease control than either iprodione or the yeasts used alone. Dipping fruits in suspensions of antagonist cells showed the similar control effect as the treatment with iprodione (500 μg ml-1 ).     

6种杀菌剂对兰花枯萎病菌抑制作用比较

为筛选防治兰花枯萎病的有效药剂,采用菌落直径法和孢子萌发法测定并比较了6种杀菌剂对兰花枯萎病菌的室内抗菌活性。结果表明:新型杀菌剂啶菌恶唑对病菌菌丝生长的抑制活性最高,同时对病菌孢子萌发也有较高活性;三唑类杀菌剂苯醚甲环唑对病菌菌丝生长抑制活性较高,但对病菌孢子萌发抑制活性最低;二甲酰亚胺类杀菌剂腐霉利对病菌菌丝生长和孢子萌发都有一定的抑制作用,但该药对菌丝生长的抑制作用有限,其EC90值明显低于啶菌恶唑和苯醚甲环唑;甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂啶氧菌酯在离体条件下对菌丝的抑制活性较低,但其对孢子萌发有较高活性;有机硫杀菌剂代森锰锌对病菌孢子萌发的抑制活性最高,但对菌丝生长的抑制活性很低;苯并咪唑类杀菌剂甲基托布津对孢子萌发有一定的抑制活性,但对菌丝生长的抑制活性很低。试验结果可以为兰花枯萎病的田间防治提供有益参考。     

党参茎基腐病镰孢菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性研究

为明确党参茎基腐病害的病原、致病性和优势病原种类及其对不同杀菌剂的敏感性,采用组织分离法进行病原菌分离,并根据其培养性状、形态学和分子生物学特征进行鉴定,同时采用平皿菌丝生长抑制法测定不同药剂的敏感性。结果表明,该病害的病原为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、茄病镰孢菌(F. sonali)和木贼镰孢菌(F. equiseti),其中尖孢镰孢菌为优势种。室内致病性测试结果表明,3种镰孢菌均可引起党参茎基腐病,其中尖孢镰孢菌的致病性最强,显著高于其他2种菌。供试药剂对菌丝生长均有抑制作用,苯醚甲环唑对3种镰孢菌具有很强的抑制活性,同时3种镰孢菌对吡唑醚菌酯的敏感性较高。     

刺参机体酵母菌组成及其拮抗活性的研究

采用PDA、YPD、MEA培养基从刺参Apostichopus japonicus的体表、肠道和呼吸树分离出23株酵母菌,使用玻璃珠破碎方法提取其DNA,然后用酵母菌通用引物NL-1/NL-4从DNA中成功扩增出26S rDNA片段,将PCR产物迸行测序,将各菌株序列在GenBank数据库中进行检索,从Blast比对结果中取相似性最高的序列,用Mega 4.0软件对所有序列进行聚类分析,采用邻接法构建系统发育树.结果表明:从大连柏岚子海域刺参中分离出的菌株分别属于红酵母属、梅奇酵母属和丝孢酵母属,从大连市黑石礁海域刺参中分离出的菌株分别属于红酵母属、假丝酵母属、德巴利氏酵母属、有孢汉逊酵母属和毕赤酵母属;以8株刺参病原菌作为指示菌,采用双层琼脂扩散法对分离菌株的拮抗活性进行测定,获得拮抗酵母菌17株,占总测试菌株的73.9％,从刺参机体的体表、肠道和呼吸树可以筛选出不同得率的活性菌株,其抗菌谱和活性强度各不相同,其中C11菌株的抗菌谱最广,抗菌活性最强;从肠道分离出的拮抗菌C11、C14和C21菌株的胞外产物经硫酸铵沉淀后也具有抗菌活性,C14菌株胞外产物经65％硫酸铵沉淀获得的粗提物对热和蛋白酶K敏感,表明其拮抗物质为蛋白质.     

酵母拮抗菌与碳酸氢钠配合对番茄果实采后病害的防治效果研究

 本文研究了酵母拮抗菌（Crytococcus laurentii）与不同浓度的碳酸氢钠（NaHCO3）配合使用对番茄果实采后灰霉病（Botrytis cinerea）和绵腐病（Pythium aphanidermatum）的防治效果，以及碳酸氢钠对酵母菌和病原菌生长的影响。结果表明，C. laurentii与碳酸氢钠配合使用对番茄果实灰霉病和绵腐病均有明显的防治效果，其中，C. laurentii与5% NaHCO3合用的效果最好。在含有不同浓度碳酸氢钠的PDA培养基上病原菌B. cinerea和P. aphanidermatum的生长都受到了显著抑制，其中碳酸氢钠对B. cinerea的抑制作用较强于对P. aphanidermatum的抑制。同样，酵母菌在含有碳酸氢钠的NYDB培养基和番茄果实伤口上的生长也受到抑制。     

耐三唑类杀菌剂木霉突变体TUV-13遗传稳定性的研究

应用紫外诱变和含药培养基诱导相结合的方法,获得了一株对三唑类杀菌剂有较好耐药性的哈茨木霉突变体TUV-13.分别测定该突变体继代培养的5代,10代和20代对腈菌唑耐受能力和对病原菌的拮抗性,结果表明:该突变体的抗药性可以稳定遗传,且对病原菌的拮抗性也未丧失.同时,应用RAPD分子技术分析了不同世代菌株间的相似性.     

三种拮抗菌生物处理对凤凰水蜜桃保鲜效果的系统研究

由于水蜜桃采后极易腐烂变质,延长其贮藏期成为当前的研究热点。鉴于使用化学保鲜剂对环境和人体存在危害,观测和比较了3种病原菌拮抗菌——罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii),季也蒙假丝酵母(Candida guilliermondii)和丝孢酵母(Trichosporonaquatile)对白花水蜜桃(Prunus persica)采后保鲜品质的影响。试验采取直接喷果的方式,果实处理后装入保鲜袋置于常温条件下(28~30℃),24 h后测量其生理指标。结果表明:罗伦隐球酵母保鲜效果最优,季也蒙假丝酵母保鲜效果其次,均好于丝孢酵母保鲜效果。由于这3种酵母菌作为工程菌容易获得,相对安全,因此,对凤凰水蜜桃而言,拮抗菌制剂作为相对有效且无污染的生物保鲜剂,适宜推广应用。     

50%翠贝干悬浮剂对香蕉黑星病的毒力测定及防治试验

香蕉黑星病是香蕉的重要病害,在华南蕉区可周年广泛发生,严重危害蕉叶和蕉果.2003～2004年采用新型杀菌剂50%翠贝千悬浮剂对香蕉黑星病菌进行毒力测定、防治试验,研究结果表明,50%翠贝干悬浮剂对香蕉黑星病菌有良好的抑制作用,防治香蕉黑星病效果优良,安全性高;施药3次后20天,50%翠贝干悬浮剂2000倍的防治效果达到80.01%,显著优于对照药剂75%百菌清可湿性粉剂800倍的防效,建议在生产上推广应用.     

白头翁叶斑病菌对7种杀菌剂的敏感性测定

采用生长速率法测定白头翁叶斑病菌(Ascochyta anemones Kab.et Bub.)对70％甲基硫菌灵WP、75％百菌清WP、50％代森锰锌WP、50％多菌灵WP、25％嘧菌酯SC、10％苯醚甲环唑WP、40％氟硅唑EC7种常用杀菌剂的敏感性.结果表明,白头翁叶斑病菌对不同杀菌剂的敏感程度存在明显差异,对50％代森锰锌WP的敏感性最高,EC50值为24.400 3 mg/mL;对10％苯醚甲环唑WP最不敏感.     

长白山欧李白粉病无公害防治研究

采用石硫合剂、波尔多液及无公害生产允许使用的翠贝为防治药剂,对长白山欧李进行无公害防治研究,结果表明,萌芽前地上部喷施5Be的石硫合剂、萌芽后地上部喷施0.5Be的石硫合剂、6月20日开始,每隔10d左右喷施一次240倍石灰或少量波尔多液能够有效地防止白粉病的发生,其防治效果可以达到长白山欧李无公害生产要求;感病时喷施50%的翠贝3000倍液,对长白山欧李白粉病也具有一定的治疗效果,但不宜长期使用。     

不同杀菌剂对立枯丝核菌的室内毒力测定

采用生长速率法在室内测定了6种杀菌剂对棉花立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)的毒力作用.结果表明,6种杀菌剂对棉花立枯丝核病菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中甲基立枯磷对立枯丝核菌的抑菌效果最佳,抑制中浓度(EC50)为0.042 mg/kg,其次为多菌灵,EC50为0.044 mg/kg.相关分析表明药剂浓度与抑制作用呈正相关.     

8种杀菌剂对柠檬黑星病原菌的室内毒力测定

为筛选出防治柠檬黑星病的高效低毒药剂供生产使用,采用生长速率法于室内测定了8种杂菌剂对柠檬黑星病原菌的毒力。结果表明,供试的8种药剂对菌丝生长均有不同程度的抑制作用,分析各药剂间的EC50值可知,300g/L爱苗EC抑菌作用最强,其EC50仅为0.067 8μg/mL;25%咪酰胺EC和50%施保功WG抑菌作用次之,EC50分别为1.000 1μg/mL和1.907 3μg/mL。以上3种药剂可进行大田试验,具有推广应用的价值。     

3种杀菌剂对小麦黑胚病菌的毒力测定及病害防治作用

采用分生孢子萌发率和菌落直径比较了3种杀菌剂对小麦黑胚病主要致病菌小麦根腐离蠕孢(B ip olaris sorok injana)和链格孢霉(A lternaria a lterna ta)的毒力作用,并在温室盆载和田间小区试验条件下进行了防治效果研究。结果表明,不同杀菌剂、同种杀菌剂不同浓度之间存在明显毒力差异。从分生孢子萌发率看,敌力脱浓度为0.250μL/mL时对小麦黑胚病2种病原菌分生孢子萌发抑制率高达99%以上,代森锰锌浓度为350μg/mL时的抑制率达94.5%以上,而多菌灵浓度为500μg/mL时的抑制率不到40%,远远低于以上两种药剂。从菌落直径看,敌力脱的致死中浓度(EC50)值最小,对小麦黑胚病菌菌丝生长的抑制作用最强。在小麦灌浆初期对温室盆栽和田间小区种植的感病品种丰舞981于人工接种前2 d和接种后4 d分别喷施3种杀菌剂,小麦黑胚率调查结果与室内抑菌实验结果相似,敌力脱和代森猛锌对小麦黑胚率有较好的控制作用,而多菌灵效果较差。接种病原菌后4 d喷药处理的防病效果明显优于接种前2 d的喷药处理。     

4种杀菌剂对八仙花叶点霉菌的毒力测定

采用平皿生长速率法,测定了4种杀菌剂对八仙花叶斑病的病原叶点霉菌的室内毒力。结果表明,4种药剂对该病原菌都有抑制作用。杀灭尔、多菌灵、灭菌宝和福星4种药剂对叶点霉菌的有效中浓度(EC50)分别为244.37,72.70,126.76和5.25mg/L,其中福星对叶点霉菌的抑制效果最好。4种药剂的相关系数均在0.96以上,药剂浓度与抑制作用呈正相关。     

莼菜叶斑病的防治药剂研究

莼菜作为绿色蔬菜珍品,是石柱出口及农民致富的支柱产业之一,而莼菜叶斑病在当地的发生危害越来越严重。本研究通过室内平板筛选和田间小区试验,以获得对莼菜叶斑病有较好防效的杀菌剂。研究结果表明,戊唑醇、苯醚甲环唑、苯甲?丙环唑、吡唑醚菌酯的平板抑菌效果较好,对病原菌的生长抑制率可达75%;而吡唑醚菌酯的田间防效最好,3次用药后8天、16天对莼菜叶斑病的相对防效为43.6%和47.8%,并且对植株生长未见影响。以上结果表明吡唑醚菌酯可以作为防治莼菜叶斑病的备选药剂。     

利用种衣剂防治马铃薯晚疫病的初步研究

为了研制防治马铃薯晚疫病的种衣剂,利用菌落直径法测定了4种内吸性杀菌剂对致病疫霉菌的毒力并检测了它们对马铃薯出苗的影响.测定结果表明,灭克锰锌和甲霜灵对晚疫病菌的毒力最强,其中EC50s分别为1.55μg·mL-1和1.63μg·mL-1;霜霉威对晚疫病菌的毒力次之,其中EC50为5.43μg·mL-1;乙磷铝对晚疫病菌毒力最差,其EC50为246.58μg·mL-1.但是由于灭克锰锌严重影响马铃薯出苗率,所以,甲霜灵和霜霉威被选为防治马铃薯晚病种衣剂的有效成分.室内接种薯片培养试验证明,高浓度(800μg·kg-1)种衣剂对薯片上晚疫病菌的控制作用很强,持效期至少1个月以上.但室内试验证明利用种衣剂处理薯片,并不能控制苗期晚疫病菌对马铃薯叶片的侵染.     

落叶松八齿小蠹伴生真菌富士长喙壳的防治研究

筛选落叶松八齿小蠹伴生真菌富士长喙壳(Ceratocystis fujiensis)的拮抗菌株和杀菌剂,旨在为该伴生真菌的生物防治和化学防治提供科学依据。通过22个菌株与3株富士长喙壳(CF1、CF2、CF3)的拮抗培养,筛选出相对抑制效果在3.00以上的拮抗菌:CF1有3株,CF2有8株,CF3有4株。菌株Bipolaris sorokiniana在拮抗培养中,自身的生长速率被促进,说明其拮抗效果明显。在所选用的15种杀菌剂中,10种杀菌剂对3株富士长喙壳生长抑制率大于50%,3个菌株抗药性的强弱能力为:CF3>CF2>CF1。