小杆线虫Rhabditis(Oscheius)sp.生物学特性测定

[目的]对从内蒙古自治区呼伦贝尔盟海拉尔市苜蓿根际土壤中分离出的小杆线虫(Rhabditis(Oscheius)sp.)的生物学特性进行测定.[方法]以大蜡螟(Galleria mellonella)和黄粉甲(Tenebrio molitor)老熟幼虫为寄主,测定小杆线虫的侵染力;以水浴方法测定小杆线虫的耐热能力.[结果]小杆线虫在10、20和40 IJs/虫的剂量下侵染力较低;但在80、160、320和640 IJs/虫的剂量下侵染力较高,侵染大蜡螟96 h、侵染黄粉甲120 h的校正死亡率均达90%以上;在80 IJs/虫的剂量下侵染力最高,侵染120 h,寄主的校正死亡率达100%.在所测试的较高剂量下,小杆线虫对黄粉虫的侵染效果低于对大蜡螟的侵染效果.侵染大蜡螟达到90%以上校正死亡率的侵染效果需96 h,而侵染黄粉虫达到同样的效果则需120 h,浓度1 000～5 000 IJ/ml的小杆线虫在36℃条件下水浴2 d,有25%左右的个体存活,水浴6 d,仍有3%～9%的个体存活,至第9天,线虫个体全部死亡;在38℃下水浴6 h,40℃下水浴2 h,线虫个体全部死亡.[结论]小杆线虫具有较强的侵染力和耐热能力,具有开发应用潜能.     

小杆线虫Rhabditis（Oscheius）sp.生物学特性测定（摘要）

[目的]对从内蒙古自治区呼伦贝尔盟海拉尔市苜蓿根际土壤中分离出的小杆线虫（Rhabditis（Oscheius）sp.）的生物学特性进行测定。[方法]以大蜡螟（Galleria mellonella）和黄粉甲（Tenebrio molitor）老熟幼虫为寄主,测定小杆线虫的侵染力;以水浴方法测定小杆线虫的耐热能力。[结果]小杆线虫在10、20和40 IJ/s虫的剂量下侵染力较低;但在80、160、320和640 IJs/虫的剂量下侵染力较高,侵染大蜡螟96 h、侵染黄粉甲120 h的校正死亡率均达90%以上;在80 IJs/虫的剂量下侵染力最高,侵染120 h,寄主的校正死亡率达100%。在所测试的较高剂量下,小杆线虫对黄粉虫的侵染效果低于对大蜡螟的侵染效果。侵染大蜡螟达到90%上校正死亡率的侵染效果需96 h,而侵染黄粉虫达到同样的效果则需120 h。浓度1 000～5 000 IJ/ml的小杆线虫在36℃条件下水浴2 d,有25%左右的个体存活,水浴6 d,仍有3%～9%的个体存活,至第9天,线虫个体全部死亡;在38℃下水浴6h、40℃下水浴2 h,线虫个体全部死亡。[结论]小杆线虫具有较强的侵染力和耐热能力,具有开发应用潜能。     

昆虫病原线虫的室内感染活性及其所受温湿度的影响

室内测定了SteinernemaCarpocapsaeOhio线虫对8种常见害虫的感染活性以及不同温湿度条件对该线虫感染活性的影响。结果表明:该线虫对甜菜夜蛾、小菜蛾、小地老虎、蛴螬以及大蜡螟等害虫的感染活性较高,48h感染死亡率为83%～93%;环境温度为20～35℃时该线虫对大蜡螟幼虫的感染活性较高,但低温(15℃左右)条件下,通过提高线虫用量以及延长试虫感染时间也可达到预期的防治效果;砂土含水量为5%～15%(w/w)时该线虫的杀虫活性最高,随湿度降低线虫感染活性明显降低;以大蜡螟、棉铃虫和甜菜夜蛾幼虫为寄主培养该线虫可以获得较高的产量。     

小杆线虫Rhabditis（Oscheius）sp．生物学特性测定

[目的]对从内蒙古自治区呼伦贝尔盟海拉尔市苜蓿根际土壤中分离出的小杆线虫[Rhabditis（Oscheius）sp．]的生物学特性进行测定。[方法]以大蜡螟（Galleriamellonella）和黄粉甲（Tenebriomolitor）老熟幼虫为寄主,测定小杆线虫的侵染力;以水浴方法测定小杆线虫的耐热能力。[结果l小杆线虫在10、20和40IJs／虫的剂量下侵染力较低;但在80、160、320和640IJs／虫的剂量下侵染力较高,大蜡螟96h、黄粉甲120h的校正死亡率均达90％以上;在80IJs／虫的剂量下侵染力最高,侵染120h,寄主的校正死亡率达100％。浓度1000～5000U／ml的小杆线虫在36℃条件下水浴2d,有25％左右的个体存活,水浴6d,仍有3％～9％的个体存活,至第9天,线虫个体全部死亡;在38℃下水浴6h、40℃下水浴2h,线虫个体全部死亡。[结论]小杆线虫具有较强的侵染力和耐热能力,具有开发应用潜能。     

昆虫病原线虫（Steinernema longicaudum BPS品系）生物学测定

研究旨在明确采自北京平谷圣泉庵橡树根际土壤中昆虫病原线虫(Steinernema longicaudumBPS)的生物学特性,进而明确开发应用的可能性.结果显示:在剂量10和20 IJs/幼虫下,BPS对寄主幼虫的侵染效果相近,大蜡螟的校正死亡率分别为40.0%和36.7%,黄粉甲的分别为50.0%、53.3%;在剂量40、80、160 IJs/幼虫下,BPS的侵染力随剂量的增高而增大,大蜡螟和黄粉甲的校正死亡率分别为73.3%、86.7%、90.0%和70.0%、80.0%、90.0%;在剂量320和640 IJs/幼虫下的侵染效果(校正死亡率100%)相近.BPS经4 0℃水浴处理l h校正死亡率达98%,处理3 h,线虫100%死亡;经37℃、36℃和34℃水浴处理10 h,校正死亡率分别为92.4%、55.4%和45.7%,处理20 h,线虫100%死亡.该线虫在30℃条件下的水平运动能力比在18℃和25℃的强,有34.6%的线虫用24 h的时间运动到3.6 cm处.研究结果表明BPS具有较强的侵染力、耐热性和水平扩散能力,据此初步分析BPS具有被开发应用潜能.     

不同品系昆虫病原线虫对大蜡螟羧酸酯酶活性的影响

对不同品系昆虫病原线虫对大蜡螟(Galleria mellonella)5龄幼虫处理12 h的羧酸酯酶活性进行研究。结果表明:在供试的5种品系线虫中,NC34处理的大蜡螟-αNA羧酸酯酶活力最高,是CK的2.047倍;其次是Otio品系的处理,为CK的1.965倍。-βNA羧酸酯酶活性以Otio处理的酶活力最高。由此可见,不同品系昆虫病原线虫对大蜡螟羧酸酯酶活性的影响存在着明显差异。     

昆虫病原线虫抗干燥能力及其对梨小食心虫致死能力研究

为筛选出抗干燥能力较强的昆虫病原线虫,采用小空间控制饱和盐液法测定了10个昆虫病原线虫品系的抗干燥能力,结果表明:不同昆虫病原线虫品系抗干燥能力不同.在25℃、相对湿度50.5%的小空间控制器中处理9 h后,Steinernema carpocapsae GA品系的存活率最高,达到75.1%,且复苏后线虫对大蜡螟致死率...     

昆虫病原线虫与吡虫啉混用对异迟眼蕈蚊幼虫的毒力测定

【目的】为了解决生产中韭菜异迟眼蕈蚊(Bradysia difformis Frey)防治难、农药残留超标等问题,将昆虫病原线虫与高效低毒的化学杀虫剂减量混用,是一种高效环保的防控手段.【方法】以甘肃省分离得到的优良昆虫病原线虫Steinernema feltiae 0619HT品系,高效低毒农药吡虫啉为研究材料,采用药膜法测定了吡虫啉原药单用、与昆虫病原线虫斯氏线虫Steinernema feltiae 0619HT品系混配,对韭菜异迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力,并计算毒力回归方程及致死中浓度LC_(50),以评价线虫与吡虫啉混用对韭菜异迟眼蕈蚊的控制效能.【结果】昆虫病原线虫Steinernema feltiae 0619HT品系,以1 000 Ijs/mL与低剂量10 mg/L的吡虫啉混配,韭菜异迟眼蕈蚊幼虫的校正死亡率达73.3%,比单用吡虫啉(校正死亡率为43.3%)的毒力更高(P0.05).【结论】昆虫病原线虫与低剂量吡虫啉混用,对异迟眼蕈蚊的毒力增强,具有明显的增效作用,可起到吡虫啉减量增效的效果.     

斯氏线虫对马尾松主要钻蛀性害虫的防治试验

在每头纵坑切梢小蠹老龄幼虫上放入100条侵染期斯氏线虫后进行不同温度下的防治试验,结果表明在15～30℃的范围内幼虫死亡率较高,尤以25℃下防治效果最好,处理5天后幼虫死亡率即达100%;在10℃和35℃条件下,幼虫死亡率极低,仅为10%和18%;在10℃下线虫仍保持较高侵染力,当移入25℃下培养后很快恢复活动;在35℃条件下线虫大部分迅速死亡.说明温度对线虫处理害虫的致死率及致死速度有明显影响.剂量测定试验结果表明,处理多种钻蛀性害虫的斯氏线虫最佳使用剂量为2 000条/mL.冬春季进行大规模杀虫试验防治效果优于夏秋季.     

昆虫病原线虫共生菌对玉米螟幼虫的杀虫活性

本研究自5个昆虫病原线虫品系离体培养得到35株共生细菌菌株 ,生物测定结果表明:SteinernemaSsy3线虫品系的共生菌对玉米螟(Ostriniafurnacalis)幼虫有较高的胃毒毒力 ,对存活虫的生长发育有明显的抑制作用。对高毒力菌株相关因子的研究表明 :高毒力菌株Ssy-1B经50℃处理10min及18W紫外灯下60cm高度垂直照射60min杀虫活性仍很稳定 ;Ⅰ、Ⅱ型共生菌对大蜡螟(Galleriamellonella)的血腔毒力均很高     

伯氏致病杆菌(Xenor habdus bovienii BE)杀虫活性物质的分离和生物测定

对斯氏线虫(Steinernera feltiae)比利时品系的共生菌伯氏致病杆菌(Xenorhabdus bovienii BE)进行发酵培养,测定结果显示,该菌发酵液对供试昆虫大蜡螟老龄幼虫有很高的血腔毒性.对发酵液硫酸铵盐析和乙酸乙酯抽提物等衍生物进行测定,发现共生菌的杀虫物质主要为胞外和胞内蛋白成分,且胞内粗提蛋白活性明显高于胞外蛋白.对两种粗提蛋白进行Marker分子量范围为(1.43～9.72)×104 的SDS-PAGE分析,发现胞外粗提蛋白在此分子量范围内没有明显的条带,而胞内粗提蛋白则有较明显的5个条带.研究表明胞内粗提蛋白具有较高的热稳定性,测定的盐析最佳硫酸铵饱和度为80%,此粗提蛋白在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50值分别为4.731 6 g/L和 1.571 5 g/L;其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 253.757 9 μg/g.胞内粗提蛋白凝胶过滤后呈现4个峰值,分别对其进行SDS-PAGE分析,只有浓度较大的峰值1和4产生明显条带,分子量分别为6.64×104 和(2.01～2.90)×104 的2种复合蛋白;分别对它们进行血腔和口服毒性生物活性测定,发现分子量为(2.01～2.90)×104的2种复合蛋白杀虫活性高于分子量为6.64×104 蛋白的杀虫活性,其在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50分别为 0.377 2 g/L和 0.123 8 g/L,其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 93.002 1 μg/g.     

麦叶蜂幼虫感染异小杆线虫的时间-剂量-死亡率模型研究

在异小杆线虫LN2品系对麦叶蜂5龄幼虫的小规模敏感性试验基础上,进行了室内毒力测定实验,利用时间-剂量-死亡率分析技术对生测数据进行了处理。结果表明,48 h该品系的LD50为1 840线虫/虫。在9 000线虫/虫、4 500线虫/虫、2 250线虫/虫、1 130线虫/虫、560线虫/虫、280线虫/虫6个浓度梯度的处理下,LT50依次为41、44、47、51、56和61 h。和几率分析技术相比,时间-剂量-死亡率分析兼顾时间效应与剂量效应,可以用于昆虫病原线虫毒力评价。     

斯氏线虫对麦叶蜂的时间-剂量-死亡率模型分析

在小规模敏感性试验基础上进行了斯氏线虫对麦叶蜂5龄幼虫的室内毒力测定,并利用时间-剂量-死亡率分析技术对生测数据进行处理。结果表明,48 h斯氏线虫All品系的LD50为600线虫/虫;在4 500、2 250、1 130、560、280、140线虫/虫6个剂量处理中斯氏线虫的LT50分别为36,40,44,48,51,54 h。与传统机率分析技术相比,时间-剂量-死亡率分析同时考虑时间效应与剂量效应,适于评价昆虫病原线虫毒力。     

不同饲料配方对大蜡螟生长影响评价

[目的]对大蜡螟人工饲料配方进行研制和优化筛选。[方法]以大蜡螟2龄幼虫为供试虫源,对4种人工饲料配方（配方1和2为本研究室研制,配方3和4参照文献）进行比较与评价。[结果]4种配方中,以配方2饲养的大蜡螟幼虫存活率最高,达89．3％,体重增加量和发育历期分别为0．30g/条和19d,极显著优于配方1和3,大蜡螟雌蛹重（0．235g）与配方4的无显著差异,显著高于配方1和3。各配方对大蜡螟的成虫羽化率和雌虫产卵量无影响。配方1的饲料成本最低,为8．96元／kg,配方4的最高,达13．59元／kg。从综合投入和产出考虑,以配方2饲养大蜡螟幼虫的成本最低（5．82元／kg）,产出效率最高,达2．703g／（0．016元·d）。[结论]配方2（1050g饲料中含玉米粉、奶粉、麦麸、酵素、丙三醇、蜂蜜分别为300、100、200、100、150、200g）对犬蜡螟幼虫的饲养效果最好,产出效率高,成本低。     

嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus ne matophilus HB310对3种十字花科蔬菜害虫杀虫活性的研究

嗜线虫致病杆菌XenorhabdusnematophilusHB310是与昆虫病原线虫SteinernemacarpocapsaeHB310共生的细菌。对X.nematophilusHB310杀虫活性的测定结果表明:该共生菌菌液对小菜蛾、菜粉蝶和云斑粉蝶等幼虫均有较高的胃毒杀虫活性,饲喂蘸有该菌液的甘蓝叶片72h后,小菜蛾2龄幼虫、云斑粉蝶1龄幼虫校正死亡率达100%,96h菜粉蝶1龄幼虫、云斑粉蝶4龄幼虫的校正死亡率也分别达到100%。云斑粉蝶1龄幼虫最敏感(LC50为6 4998×105cells/mL),其次为小菜蛾2龄幼虫(LC50为1 3614×106cells/mL)和菜粉蝶1龄幼虫(LC50为2 7418×106cells/mL)。深入研究发现胃毒杀虫活性物质在该菌对数生长初期就开始产生,对数生长中期已达到最大量。生测结果表明:胞内、胞外分泌物中都含有较强的胃毒杀虫活性物质,5 994×108cells/mL的原菌液、细胞及同样浓度的菌液上清和胞内上清120h对1龄菜粉蝶幼虫的胃毒杀虫活性均在90%以上,上清的胃毒活性最低,与原菌液、细胞及胞内上清的胃毒活性差异显著。X.nematophilusHB310的Ⅱ型菌菌液的胃毒杀虫活性较低,只有Ⅰ型菌的1/3左右。     

Isolation and molecular characterization of entomopathogenic nematode,Heterorhabditis sp. from an arable land in Nigeria

The occurrence of entomopathogenic nematodes(EPNs) in arable soil samples from Nigeria was investigated using Baermann extraction tray and insect-bait(White's trap) techniques. Isolates were tested for infectivity using the larvae of Galleria mellonella(greater moth) and Tenebrio molitor(mealworm). The study revealed a new species of Heterorhabditis(MT371593) in soil samples that were randomly collected from an arable farmland cultivated with cassava TMS-30572 at the Teaching and Research Farm of Landmark University, Nigeria. Amplification of the internal transcribed spacer region(ITS) of the ribosomal DNA produced a nucleotide sequence of 933 base pairs(bp). A BLASTN search of Gen Bank showed that the sequence of the Nigerian isolate is identical at 99% similarity to that of Heterorhabditis sp. from Thailand. Infectivity test of the isolate showed 100% mortality against T. molitor larvae within 48 h of exposure while only 80% mortality was recorded for G. mellonella after 1 week of exposure. This is the first account of Heterorhabditis sp. in Nigeria. The varying degrees of infectivity against mealworm and greater moth observed in this study proved that the Nigerian isolate of Heterorhabditis sp. could potentially be an attractive option in the management of insect pests of cash crops.     

亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种对大蜡螟幼虫磷酸酶活力的影响

本文研究了亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种对大蜡螟幼虫磷酸酶活力的影响。结果表明,经苏云金杆菌蜡螟亚种(Bacillus thuringiensis galleriae)晶体蛋白处理后大蜡螟幼虫肠道酸性磷酸酶比活力升高,电泳分析表明肠道碱性磷酸酶活力降低,同功酶谱无明显变化。组织化学染色结果也表明,中肠细胞碱性磷酸酶活力下降。但幼虫血淋巴碱性磷酸酶活力及同功酶谱都没有明显变化。