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《中国畜牧兽医文摘》2016,(5)
在Gene Bank中查找牛脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36),设计并合成巢式PCR引物,以6个品种牛肌眼肉组织DNA为模板,扩增获得1689bp和945bp目的片段,测序发现在197bp发生A/T突变,导致不结合bmo-mir-3232,新结合mtrmi R5277,odi-let-7b,str-mi R-8400-3p。 相似文献
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旨在探讨缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对肉鸡心肌脂肪酸代谢的影响。取9~12日龄鸡胚,采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化法分离培养心肌细胞,镜下观察细胞形态及活力,并对其进行免疫细胞化学鉴定。以低氧诱导因子1α(HIF-1α)为缺氧指标,化学缺氧模拟剂氯化钴(CoCl_2)处理鸡胚心肌细胞,构建细胞缺氧模型。为了确认MIF与磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的关系,在缺氧模型上用MIF抑制剂(ISO-1)阻断MIF,观测p-AMPK是否随MIF阻断而变化。利用Western bolt检测脂肪酸代谢关键酶脂肪酸转运酶(FAT/CD36)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)及肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT-1A)是否在缺氧状态下发生变化。结果:经差速培养的鸡心肌细胞纯度达90%以上;镜下观察,细胞呈梭形和不规则形,并可自发节律性搏动,频率80~130次·min~(-1)。Western bolt检测显示,经600μmol·L~(-1) CoCl_2处理心肌细胞24h,HIF-1α表达较正常对照组极显著升高(P0.01);100μmol·L~(-1) ISO-1阻断MIF后,MIF及p-AMPK表达量均明显降低(P0.01)。与正常组相比,缺氧组心肌MIF、p-AMPK、FAT/CD_(36)、p-ACC和CPT-1A表达均极显著升高(P0.01);ISO阻断组心肌各目的蛋白质的表达较缺氧组均极显著下降(P0.01)。缺氧条件下,心肌自分泌MIF增多,通过激活AMPK促进脂肪酸相继进入细胞质和线粒体,加强氧化供能,为缺氧提供代偿性保护。 相似文献
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《饲料工业》2015,(13)
以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞(DCMECs)为模型,研究辛酸钠对细胞脂肪酸摄取、转运和脂肪酸活化相关蛋白分化抗原簇36(CD36)、脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、脂酰辅酶A合成酶长链家族成员1(ACSL1)、脂酰辅酶A合成酶短链家族成员2(ACSS2)表达的影响。采用q RT-PCR检测目的基因相对表达丰度;Western blot检测目的蛋白相对表达水平。结果显示,与对照组相比,0.5、1、2 mmol/l的辛酸钠对CD36和ACSL1的m RNA表达和蛋白表达无显著性影响(P0.05);但辛酸钠以浓度依赖的方式降低或显著降低FABP3和ACSS2的m RNA表达和蛋白表达(P0.05)。试验结果揭示辛酸钠对乳腺上皮细胞内脂肪酸转运和短链脂肪酸的活化具有一定的抑制作用。 相似文献
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脂肪酸转位酶(CD36)具有广泛的生物学功能,能够促进长链脂肪酸转入脂肪细胞、心肌细胞和骨骼肌细胞,对细胞脂质代谢有重要调控作用。为探究CD36对鸭原代肝细胞和PC3细胞脂质效应,本试验采用Ⅳ型胶原酶消化法成功分离孵化了21日龄鸭胚原代肝细胞并进行培养,RT-PCR法获取鸭CD36基因序列,构建了携带HIS标签的pEGFP-N3-CD36真核表达载体pEGFP-N3-CD36-His,脂质体法转染至鸭胚原代肝细胞和PC3细胞,His标签检测试剂盒测定CD36在2种细胞中的过表达量,探讨鸭CD36基因过表达与原代肝细胞和PC3细胞中脂质性状的关联性。结果显示,pEGFP-N3-CD36-His重组质粒在鸭原代肝细胞和PC3细胞中均能发出绿色荧光,说明构建的载体转染成功;CD36过表达对2种细胞中脂质指标的影响相似,均与细胞中的甘油三酯(TG)呈极显著正相关(P<0.01),与总胆固醇(TCH)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)呈极显著负相关(P<0.01);揭示CD36基因过表达可能引起2种细胞中脂质代谢活动的不平衡而引起脂质代谢相关疾病的发生,为进一步研究CD36基因对细胞脂质代谢的调控奠定了基础。 相似文献
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本研究旨在揭示一磷酸腺苷激活蛋白酶(AMPK)基因在北京油鸡(BJY)腿肌中的表达规律及其在肌内脂肪(IMF)沉积的中的作用.选择体质量一致的1日龄北京油鸡(BJY)90只,随机分为6组,每组15只,饲养于标准鸡舍,饲养过程自由采食和饮水,在相同营养标准和管理条件下饲养至1、56、112日龄进行屠宰,测定腿肌AMPK各亚基基因和脂肪代谢基因表达水平与肌内脂肪的含量,通过计算2-△△CT值来衡量不同阶段基因相对表达量的差异.研究结果表明,BJY鸡腿肌AMPKα2和AMPK γ2基因在56日龄的表达量低于1(P>0.05)和112日龄(P<0.05)的表达量,与腿肌肌内脂肪(IMF)含量及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和γ、脂肪酸转位酶CD36(FAT/CD36)、脂肪酸合成酶(FAS)、Ca信号受体(CASR)等基因表达量的变化趋势一致;而AMPKβ1、AMPKβ2和AMPKγ1基因的56日龄表达量高于1(P<0.05)和112日龄(P>0.05)的表达量,与腿肌肌内脂肪含量及脂肪代谢基因(PPARα、PPARγ、FAT、FAS、CASR)的变化呈相反趋势.细胞培养研究表明,前体脂肪细胞经过AMPK激活剂AICAR处理后,细胞脂质蓄积能力和PPARα、PPARγ基因表达有所降低,而经过抑制剂Compound C处理后,细胞脂质蓄积能力和PPARα、PPARγ基因表达会增加.这些结果表明AMPK对脂肪细胞的脂质蓄积有一定的抑制作用.因此,AMPK基因对肌内脂肪沉积具有一定调控作用,特别是AMPKβ1、AMPKβ2和AMPKγ1基因具有显著的负调控作用. 相似文献
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本研究以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究外源添加不同浓度游离α-亚麻酸(LNA)对细胞脂肪酸代谢相关靶基因mRNA转录水平的影响.体外培养的奶牛乳腺上皮细胞,以牛血清白蛋白(BSA)代替胎牛血清为对照组,BSA与不同浓度LNA为试验组,试验培养36 h,采用RT-qPCT对目的基因进行定量,检测其表达丰度.结果显示:1)0.625~5.000μmol/L LNA极显著上调了脂肪酸转运基因中CD36的表达(P<0.01),而较高浓度(≥5μmol/L)的LNA下调了另2种转运蛋白,即长链酰基辅酶A合成酶-1基因(ACSL1)和脂肪酸结合蛋白-3(FABP3)基因的表达(P<0.01);2)LNA对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸合成相关基因表达丰度的影响具有剂量效应,较高浓度(≥5μmol/L)的LNA极显著降低脂肪酸合成酶(FASN)基因和硬脂酰去饱和酶(SCD)基因mRNA转录水平(P<0.01);3)LNA的浓度对过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARG)基因的mRNA转录水平没有显著影响(P>0.05),但所有浓度的LNA均极显著降低了固醇调节元件结合蛋白-1(SREBF1)基因的mRNA转录水平(P<0.01).本试验结果证实,长链脂肪酸LNA对乳腺上皮细胞脂肪酸关键合成酶的基因转录具有抑制作用,而CD36在长链脂肪酸转运进入奶牛乳腺上皮细胞的过程中具有重要作用. 相似文献
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试验旨在研究在奶牛乳腺上皮细胞培养液中添加不同浓度的乙酸对细胞活力及CD36和FABP3 mRNA相对表达量的影响。将传第三代的乳腺上皮细胞悬液接种于细胞培养板上,每孔加入含10%FBS的DMEM/F12培养液,于37℃、5%CO2培养箱培养48 h。将培养48 h的奶牛乳腺上皮细胞培养孔随机分为1个对照组和5个试验组。每组分别加入含0、4、6、8、10、12 mmol/l乙酸的DMEM/F12培养液,并用1 g/l无脂肪酸的BSA替代培养液中的FBS,其中0 mmol/l为对照组。结果表明,细胞相对增殖率随着乙酸浓度的增加呈显著的二次曲线增加(P=0.005),以4~8 mmol/l乙酸处理组的细胞活力较高。随着乙酸添加浓度的增加,CD36的相对表达量呈显著的一次线性(P=0.011)和二次曲线(P=0.000)降低,以8~12 mmol/l乙酸组较低;FABP3的表达量呈显著的一次线性(P=0.001)和二次曲线(P=0.010)增加,以10~12 mmol/l乙酸组较高。乳腺上皮细胞活力与乙酸浓度呈显著的剂量依赖关系,低浓度的乙酸可促进奶牛乳腺上皮细胞活力,而高浓度则表现出抑制作用。不同浓度的乙酸处理组均下调了CD36 mRNA相对表达量,上调了FABP3 mRNA表达量。 相似文献
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L一肉碱(L—Carnitine)是一种类维生素制品.主要功能是参与动物体内脂肪酸代谢,作为载体将长链脂肪酸从线粒体膜外输送到膜内促进脂肪酸的B一氧化,将脂肪酸氧化并释放能量。L-肉碱也可以作为添加剂补充于动物饲料中.提高动物的生产性能、瘦肉率,并降低脂肪含量,改善肉质,其应用前景十分广阔。本文就L一肉碱的特性、生理功能以及在猪生产中的应用作一综述。 相似文献
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对6种常见家畜乳、肉、油的脂肪酸组成进行比较,分析了饱和脂肪酸(SFA)、不饱和脂肪酸(USFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)的构成比例,USFA/SFA、MUFA/SFA、PUFA/SFA比值,人体必需脂肪酸(EFA)所占比例,以及SFA:MUFA:PUFA比例。结果表明,不同家畜乳、肉、油的脂肪酸组成有所区别,但其分类排序基本相近。反刍动物产品SFA占总脂肪酸的比例高于单胃动物,USFA占比与之相反。单胃动物产品U/S值、M/S值、P/S值以及EFA所占比例均显著高于反刍动物产品。对3种畜产品脂肪酸指标的平均值进行比较可知,马、驴产品的PUFA占比、P/S值、EFA占比以及S:M:P比例,均优于其他几种畜产品,因此其脂肪酸组成的营养价值较高。 相似文献
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为了研究共轭亚油酸(CLA)对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸摄取与转运相关基因mRNA转录的影响,试验采用组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞,外源添加不同浓度的c9,t11-CLA与t10,c12-CLA作用乳腺上皮细胞48 h,应用实时荧光定量PCR技术,测定相关基因mRNA的转录。结果表明:1)与对照组相比,两种CLA均显著降低了脂蛋白脂肪酶(LPL)基因mRNA的表达丰度(P<0.05);2)150μmol/L c9,t11-CLA显著上调分化抗原簇36(CD36)基因mRNA的转录水平(P<0.05),其转录水平随t10,c12-CLA浓度增加显著上升(P<0.05);3)150μmol/L c9,t11-CLA和不同浓度的t10,c12-CLA均可显著上调乙酰辅酶A结合蛋白(ACBP)的转录(P<0.05);4)与对照组相比,两种CLA均显著下调脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因mRNA的转录水平(P<0.05)。说明两种CLA均显著下调LPL mRNA和FABP3 mRNA的转录水平,150μmol/L的两种CLA异构体上调CD36和ACBP的转录水平。 相似文献
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脂肪酸的优化平衡,对于幼小动物及哺乳期动物,具有重要意义。幼小动物生长期及哺乳母猪泌乳期,对于脂肪的需求及利用率,有着特殊的要求。脂肪酸碳链的长短、饱和程度及双键的数目与位置,决定着不同生理阶段动物对代谢能值及脂肪利用率的高低。乳仔猪与哺乳母猪日粮的脂肪酸优化平衡,是近年来营养学家们普遍关注的问题。粉末脂肪可实现对于特殊生理阶段的能量供给时,不同脂肪酸组合优化及乳化。脂肪酸优化平衡及乳化处理后的粉末脂肪,具有消化利用率高、真正满足动物不同阶段能量需求、提供必需脂肪酸、促进动物快速生长、提高动物繁殖能力、改善饲料适口性及使用便利等优点。本文主要就脂肪特性、营养价值、消化利用及试验应用等方面做一综述,以期为乳化均衡粉末脂肪的研究与应用提供参考。 相似文献
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中链脂肪酸甘油酯目前作为食品添加剂广泛应用于食品加工中。研究发现,中链脂肪酸甘油酯不仅对动物具有特殊的营养作用,同时具有抗菌、抗病毒作用。在动物生产中使用中链脂肪酸甘油酯,可防治动物疫病、改善生产性能、延长畜产品保存期。作者认为,随着研究的深入,中链脂肪酸甘油酯将广泛应用于畜牧业生产中。 相似文献