L-精氨酸对脂多糖刺激的断奶仔猪肠道损伤的缓解作用

研究L-精氨酸(Arg)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪小肠黏膜蛋白质、DNA、RNA含量、二糖酶活性和血浆D-木糖含量的影响,旨在探讨L-Arg是否可以缓解LPS刺激所导致的肠道损伤.选取24头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成4个处理,每个处理6个重复.采用单因子设计(1)基础日粮(非应激对照组);(2)基础日粮 LPS(应激对照组);(3)基础日粮 LPS 0.5%Arg(0.5%Arg组);(4)基础日粮 LPS 1.0%Arg(1.0%Arg组).在第16天,给应激对照组、0.5%和1.0%Arg组注射100 μg/kg BW的LPS,非应激对照组注射等量的生理盐水.注射LPS 2 h后,按1 mL/kg BW的剂量分别给仔猪灌服D-木糖溶液,注射LPS 3 h后,采血,分离血浆待测;注射LPS后48 h屠宰仔猪,刮取小肠黏膜待测.结果表明(1)和非应激对照组相比,应激对照组的十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠、回肠黏膜DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均显著降低(P＜0.05),这表明LPS刺激导致断奶仔猪肠道损伤;(2)0.5%Arg组十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠黏膜DNA含量,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量以及1.0%Arg组空肠DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均高于应激对照组,且与非应激对照组无显著差异(P＞0.05).这表明L-Arg在一定程度上缓解了LPS刺激所造成的肠道损伤.     

日粮添加姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪生长性能和肠道组织形态的影响

为了解姜黄素对宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)断奶仔猪肠道组织形态和生长发育的影响,选取16头正常初生体重(normal birth weight, NBW)仔猪和16头IUGR仔猪,公母各半;26日龄断奶,分别饲喂基础日粮或姜黄素日粮(基础日粮+400 mg/kg姜黄素),即N(NBW+基础日粮)、NC(NBW+姜黄素日粮)、I(IUGR+基础日粮)和IC(IUGR+姜黄素日粮),每组8头,饲养至50日龄屠宰取样。结果显示:日粮添加姜黄素可以显著降低肠道隐窝深度(CD)(P0.05),显著升高肠道长度以及十二指肠绒毛高度(VH)和绒毛高度/隐窝深度比值(VCR)、空肠回肠VH和VCR的值(P0.05),显著提高干物质、粗蛋白、脂肪和总能量的表观消化率(P0.05);日粮添加姜黄素还可以提高肠道二糖酶活性、回肠黏膜胰岛素样生长因子(IGF-1)的含量以及IGF-1 mRNA表达量,增加肠道绒毛、微绒毛长度。提示:姜黄素可以改善IUGR断奶仔猪的肠道组织形态和消化吸收功能,促进生长发育。     

α-酮戊二酸对LPS慢性应激仔猪小肠黏膜形态与功能的影响

为了探讨α-酮戊二酸(AKG)能否缓解LPS慢性应激导致的仔猪小肠黏膜损伤及其机理,本试验研究了AKG对LPS慢性应激仔猪的小肠黏膜形态、血浆D-木糖的含量、血浆和小肠黏膜二胺氧化酶(DAO)活性及小肠黏膜mTOR及磷酸化的mTOR表达量的影响.18头(24±1)日龄健康断奶仔猪随机分成3个处理组(空白对照组、应激对照组、AKG组),每个处理6个重复.各组基础日粮一致,空白对照组和应激对照组饲喂基础日粮+1%淀粉,AKG组饲喂基础日粮+1%AKG.试验期为16 d.应激对照组和AKG组仔猪分别于第10、12、14和16天腹膜注射80μg·kg~(-1)BW的LPS,空白对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水.第16天注射LPS 2 h后,按0.1g·kg~(-1)BW的剂量给仔猪灌服D-木糖溶液,注射LPS 3 h后,前腔静脉采血.第17天屠宰取小肠组织样,刮取肠黏膜及制作组织切片.结果表明:(1)与空白对照组相比,应激对照组十二指肠、空肠和回肠黏膜绒毛高度/隐窝深度、空肠和回肠磷酸化mTOR/mTOR(P-mTOR/mTOR)显著降低(P<0.05),血浆DAO活性显著升高(P<0.05).(2)与应激对照组相比,AKG组十二指肠、空肠和回肠黏膜绒毛高度/隐窝深度、空肠黏膜DAO活性、血浆D-木糖及十二指肠、空肠和回肠黏膜P-mTOR/mTOR显著升高(P<0.05).结果显示,日粮中添加1%AKG可在一定程度上改善仔猪的小肠组织学形态和吸收功能,缓解LPS慢性应激导致的仔猪小肠黏膜损伤,这与mTOR信号通路有关.     

甘氨酸对脂多糖应激断奶仔猪肠黏膜屏障的调控作用

本试验旨在研究日粮中添加甘氨酸（Gly）对脂多糖（LPS）应激断奶仔猪肠黏膜屏障损伤的保护作用。选用24头21日龄断奶仔猪，随机分为4组，即对照组（基础日粮）、LPS组（基础日粮+LPS）、1.0%Gly组（基础日粮+1.0%Gly+LPS）、2.0%Gly组（基础日粮+2.0%Gly+LPS）。预饲期7 d，正试期28 d，在试验第28天，LPS组、1.0%Gly组和2.0%Gly组仔猪腹腔注射LPS(100μg/kg BW)，对照组注射无菌生理盐水。注射4 h后，仔猪屠宰，取脾脏、肝脏、肠系膜淋巴结及空肠、回肠样品待测。结果表明：(1)各处理组的平均日增重、平均日采食量及耗料增重比无显著差异。(2)与对照组相比，LPS应激升高了回肠丙二醛（MDA）水平（P<0.05），降低空肠、回肠谷胱甘肽（GSH）水平（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加Gly降低回肠MDA水平、升高GSH水平（P<0.05）。(3)与对照组相比，LPS应激增加肝脏移位细菌数（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加Gly降低肝脏移位细菌数（P<0.05）。(4)与对照组相...     

植物多糖对断奶仔猪小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响

旨在探讨断奶仔猪饲粮中单独或联合添加黄芪多糖、牛膝多糖及白术多糖对其小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响。选取256头35日龄的杜长大三元杂交断奶仔猪,随机分为8个组,每组4个重复,每个重复8头猪,采用三因素两水平(2×2×2)试验设计,饲粮中黄芪多糖、白术多糖和牛膝多糖的添加水平均为0,800mg/kg,试验共进行28d。结果显示:植物多糖能显著提高断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠的黏膜绒毛高度,提高绒腺比(P0.05),3种多糖联用效果最适。与对照组相比,多糖组断奶仔猪回肠V/C比值显著提高(P0.05),各单一多糖组之间差异不显著(P0.05),3种多糖联合添加与两两添加及单一添加相比显著提高了V/C比值(P0.05)。多糖组断奶仔猪血清中二胺氧化酶(DAO)的活性、血清中内毒素(ET)含量及D-乳糖的含量均显著降低(P0.05),3种多糖联用效果最适。多糖能显著提高断奶仔猪肠道黏膜Occludin、Claudin和ZO-1的基因表达量(P0.05)。单一添加黄芪多糖、白术多糖及牛膝多糖能显著提高断奶仔猪肠道钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)的mRNA相对表达量(P0.05),对葡萄糖转运载体2(GLUT2)mRNA相对表达量有提高的趋势,但差异不显著(P0.05)。多糖两两联用及3种多糖联合添加能显著提高断奶仔猪肠道SGLT1和GLUT2mRNA相对表达量(P0.05)。结果表明,在断奶仔猪饲粮中添加植物多糖可显著改善断奶仔猪肠道黏膜形态结构和肠道的通透性,其机制可能与植物多糖改善断奶仔猪肠黏膜屏障功能作用有关。     

日粮中添加酿酒酵母对断奶仔猪小肠黏膜消化酶及免疫功能基因mRNA表达水平的影响

为了分析日粮中添加酿酒酵母对断奶仔猪小肠黏膜消化酶及免疫基因mRNA表达水平的影响,采用实时荧光定量PCR方法,随机选择26日龄断奶仔猪60头,分为3组(即对照组、酿酒酵母组及抗生素组)进行试验,测定肠道黏膜的消化酶基因[碱性磷酸酶(ALP)、氨肽酶N(APN))]和免疫功能基因(TLR-2、IL-8和TNF-α)mRNA表达水平。结果表明:与对照组相比,日粮中添加酿酒酵母能够极显著提高断奶仔猪十二指肠免疫基因TLR-2 mRNA表达水平(P0.01);与抗生素组相比,酿酒酵母组十二指肠、空肠和回肠黏膜消化酶基因ALP和十二指肠免疫基因TLR-2、IL-8、TNF-α以及回肠免疫基因TNF-αmRNA表达水平极显著提高(P0.01)。说明酿酒酵母能抑制仔猪断奶应激引起的肠道上皮细胞免疫炎症反应。     

21日龄断奶对仔猪肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障的影响

本试验旨在研究21日龄断奶对仔猪肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障的影响。采用2×3双因子完全随机试验设计,组别(哺乳组、断奶组)和日龄(22、24和28日龄)为2个主效应。选取6窝体况相近的健康大白仔猪,每窝选取6头平均体重为(6.1±0.2)kg的仔猪,随机分为2组,分别为断奶组和哺乳组,每组18头,分别于22、24和28日龄时屠宰,测定其生长性能、肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障。结果表明:1)28日龄时,断奶组仔猪的末重和平均日增重均极显著低于哺乳组(P0.01)。2)组别和日龄对仔猪的空肠隐窝深度和绒毛高度/隐窝深度、回肠绒毛高度有极显著交互作用(P0.01);断奶组的空肠、回肠隐窝深度极显著高于哺乳组(P0.01),空肠、回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度极显著低于哺乳组(P0.01);哺乳组28日龄时的空肠绒毛高度/隐窝深度极显著高于22和24日龄时(P0.01),24日龄时的回肠绒毛高度极显著高于22日龄时(P0.01)。3)组别和日龄对仔猪的空肠黏膜二胺氧化酶(DAO)活性有显著交互作用(P0.05),断奶组的空肠、回肠黏膜DAO活性显著低于哺乳组(P0.05)。4)组别和日龄对仔猪空肠黏膜闭锁蛋白(occludin)的mRNA表达量有极显著交互作用(P0.01);空肠黏膜闭锁小带蛋白1(ZO-1)和哺乳组空肠黏膜occludin的mRNA表达量随着日龄的增加先升高后降低(P0.05);与哺乳组相比,断奶组回肠黏膜ZO-1、occludin和24日龄时空肠黏膜occludin的mRNA表达量显著降低(P0.05);24日龄时回肠黏膜ZO-1的mRNA表达量显著高于22日龄时(P0.05)。5)组别和日龄对仔猪空肠黏膜肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达量有显著交互作用(P0.05);断奶组24和28日龄时空肠黏膜TNF-α的mRNA表达量显著高于哺乳组(P0.05),空肠黏膜白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达量显著低于哺乳组(P0.05)。回肠黏膜白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达量随着日龄的增加而降低(P0.05)。综上所述,哺乳仔猪22~28日龄时肠道发育趋于成熟,而断奶会破坏仔猪肠道上皮细胞的结构和紧密连接蛋白的mRNA表达,引起肠道绒毛变短和脱落、肠道通透性增加和炎症反应,降低平均日增重。     

罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响

本试验旨在研究罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响。选取144头初始体重为(6.49±0.01) kg的21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组饲喂基础饲粮+100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素,罗伊氏乳杆菌组饲喂基础饲粮+5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1。试验期为14 d。结果显示:1)与对照组相比,饲粮添加抗生素显著提高了血清葡萄糖(GLU)的含量(P0.05),且显著降低了血清尿素氮(UN)的含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠胃动素(MLN)和空肠胆囊收缩素(CCK)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠MLN的mRNA表达量(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠Na+依赖性谷氨酰胺载体2(ASCT2)、阳离子氨基酸运载体1(CAT1)、小肽转运体1(PepT1)和空肠中性和碱性氨基酸转运载体(rBAT)以及空肠与回肠y+L氨基酸转运体1 (y+LAT1)的mRNA表达量(P 0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠y+LAT1、CAT1、PepT1和空肠与回肠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达量(P0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)、脂肪酸合成酶(FASN)和十二指肠与空肠脂肪酸结合蛋白3(FABP3)以及十二指肠、空肠与回肠过氧化物体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠ACCα的mRNA表达量(P0.05)。5)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了空肠和回肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠SGLT1、钠-葡萄糖协同转运蛋白3(SGLT3)的mRNA表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪的肠道营养物质转运具有良好的促进作用,表现为促进断奶仔猪肠道物理消化和化学消化,促进小肽、氨基酸及脂肪酸吸收转运,增强脂肪酸的合成。罗伊氏乳杆菌LR1在替代猪饲用抗生素方面具有巨大潜力,可用于开发新型猪饲料抗生素替代物。     

谷氨酰胺干预断奶仔猪肠道黏膜受损中免疫能力的作用

本试验旨在研究日粮中添加谷氨酰胺(Gln)对大肠杆菌型脂多糖(LPS)诱导肠道黏膜损伤后断奶仔猪免疫性能的影响。选取28日龄健康断奶仔猪24头,随机分为3组,每组8个重复。其中,空白对照组和LPS组饲喂常规基础日粮,Gln组饲喂添加1%谷氨酰胺的基础日粮。试验期30d,于试验期第22、25、28、30天对LPS组和Gln组腹腔注射LPS(按体重以100μg·kg-1给予),空白对照组腹腔注射等体积的无菌生理盐水。第30天对仔猪进行前腔静脉采血并屠宰采取所需样品,检测血清中免疫球蛋白、相关炎症因子浓度及各肠段中这些炎症因子基因的表达丰度。与空白对照组相比,LPS组和Gln组血清IgM水平显著提高40.00%和62.86%(P0.05);LPS组血清IL-8含量显著提高7.11%(P0.05),而Gln组则无明显变化。不论在LPS攻毒前还是攻毒后,日粮添加Gln均可显著提高仔猪血清IL-17含量(P0.05)。与空白对照组相比,LPS组和Gln组十二指肠中IL-8mRNA表达水平显著降低了35.06%和44.16%(P0.05)。对于IL-12βmRNA的表达水平,在空肠和回肠中Gln组中的表达水平较LPS组高,但在十二指肠中有所降低(P0.05)。在十二指肠与空肠中,IL-17αmRNA的表达丰度在三组间存在差异(P0.05),特别是在十二指肠和回肠中,Gln组的表达丰度达到最高;LPS组和Gln组空肠中IL-17αmRNA相对表达量显著降低58.16%和56.07%(P0.05)。结果提示,日粮中添加1%的谷氨酰胺能够在一定程度上改善LPS诱导肠道损伤后断奶仔猪的免疫力,减轻应激反应造成的机体损伤。     

谷氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响

本试验旨在研究谷氨酸(Glu)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响。选择24头断奶仔猪分为4个组,分别为对照组、LPS组、LPS+1.0%Glu组和LPS+2.0%Glu组,每组6个重复,每个重复1头猪。于试验第28天,试验组猪注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,4 h后屠宰,取肠道样品待测。结果表明:1)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪空肠三磷酸腺苷(ATP)、腺苷酸池(TAN)含量和能荷(EC)显著降低(P0.05),一磷酸腺苷(AMP)/ATP值显著升高(P0.05);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组显著提高了空肠ATP、二磷酸腺苷(ADP)和TAN含量(P0.05)。2)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪回肠柠檬酸合成酶和α-酮戊二酸脱氢酶系活性极显著降低(P0.01),空肠α-酮戊二酸脱氢酶系活性有降低趋势(P=0.092);与LPS组相比,除LPS+1.0%Glu组回肠柠檬酸合成酶活性显著降低(P0.05)外,Glu对空肠和回肠三羧酸循环关键酶活性无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,LPS刺激导致空肠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)及回肠沉默信号调控因子1(Sirt1)和PGC1α的mRNA表达量极显著降低(P0.01);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组有提高空肠PGC1α(P=0.067)和回肠Sirt1(P=0.053)mRNA表达量的趋势,LPS+1.0%Glu组有提高回肠Sirt1 mRNA表达量的趋势(P=0.070)。由此可见,Glu可以改善LPS刺激导致的肠道能量损耗状态。     

地衣芽孢杆菌对脂多糖应激仔猪肠道形态、肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响

本试验旨在研究地衣芽孢杆菌对脂多糖(LPS)应激仔猪肠道形态、肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响。试验选用35日龄、平均体重为(10.0±0.5)kg的苏山猪90头,随机分成3组(对照组、LPS组和BL+LPS组),每组3个重复,每个重复10头仔猪。其中,对照组和LPS组仔猪均饲喂基础饲粮;BL+LPS组仔猪饲喂添加500 mg/kg地衣芽孢杆菌的基础饲粮。预试期3 d,正试期21 d,于正试期第21天从每个重复中选2头仔猪腹腔注射LPS(LPS组和BL+LPS组)或等量的灭菌生理盐水(对照组),注射24 h后屠宰取样。结果显示:1)与对照组相比,LPS应激显著降低了仔猪十二指肠二胺氧化酶(DAO)、空肠一氧化氮合成酶(NOS)活性及空肠一氧化氮(NO)含量(P<0.05),显著提高了血浆中NO含量和NOS活性(P<0.05);显著降低了空肠绒毛高度和绒隐比、回肠绒隐比(P<0.05);显著降低了十二指肠、空肠和回肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)、十二指肠和回肠超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05);显著降低了空肠上皮细胞中淋巴细胞、空肠和回肠上皮细胞中杯状细胞数量(P<0.05);显著降低了血清免疫球蛋白G(IgG)含量,提高了回肠黏膜白细胞介素-6(IL⁃6)和白细胞介素-1β(IL⁃1β)含量(P<0.05)。2)与LPS组相比,饲粮添加地衣芽孢杆菌显著提高了LPS应激仔猪回肠DAO和NOS活性(P<0.05);显著提高了空肠黏膜GSH⁃Px活性显著提高(P<0.05),显著降低了十二指肠黏膜丙二醛(MDA)含量(P<0.05);显著提高了血清IgG含量(P<0.05)。由此可见,LPS应激导致仔猪肠黏膜损伤,在饲粮中添加地衣芽孢杆菌可提高LPS应激仔猪的肠黏膜抗氧化能力和免疫力,一定程度上促进肠道形态的修复,减缓LPS应激导致的肠道损伤。     

L-精氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠黏膜免疫的影响。选用24头21日龄断奶仔猪,随机分为4个处理,即对照组(基础日粮)、LPS组(基础日粮+LPS)、0.5%Arg组(基础日粮添加0.5%Arg+LPS)、1.0%Arg组(基础日粮添加1.0%Arg+LPS)。结果表明:LPS刺激损伤小肠黏膜结构;Arg则有效阻止LPS应激导致的肠道损伤,维持肠黏膜结构的完整性;LPS刺激显著增加仔猪小肠肥大细胞数(P<0.01);1.0%Arg则减少肥大细胞数(P<0.05);LPS刺激降低回肠IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05),而0.5%Arg则增加IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05)。这表明LPS刺激可导致仔猪小肠黏膜结构受损,免疫屏障功能降低,而日粮添加精氨酸可有效阻止LPS对肠黏膜屏障的损伤,促进及改善肠黏膜结构及免疫屏障功能。     

饲用凝结芽孢杆菌对感染产肠毒素大肠杆菌K88断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响

本文旨在研究饲用凝结芽孢杆菌对感染产肠毒素大肠杆菌(ETEC) K88断奶仔猪生长性能和肠道菌群、形态及细胞因子表达的影响。试验选用32头25日龄断奶的健康"杜×长×大"商品公猪,按照初始体重一致原则分成4个组,每组8个重复,单笼饲养。ETEC K88感染前7 d,2个组饲喂基础饲粮(BD组),另外2个组饲喂在基础饲粮中添加1.0×10~7CFU/g凝结芽孢杆菌的饲粮(PD组)。第8天起,开展2×2双因素试验,4个组设计如下:1) NCH+BD组,口服生理盐水、饲喂基础饲粮;2) NCH+PD组,口服生理盐水、饲喂添加凝结芽孢杆菌饲粮;3) CH+BD组,口服ETEC K88、饲喂基础饲粮;4) CH+PD组,口服ETEC K88、饲喂添加凝结芽孢杆菌饲粮。试验猪口服5 mL ETEC K88(活菌数1.0×10~9CFU/mL)或5 mL 0.9%生理盐水,持续3 d。试验用凝结芽孢杆菌是经体外牛津杯法确定的1株对ETEC K88具有良好抑菌效果的菌株,添加量1.0×10~7CFU/g。试验第11天,取仔猪空肠、回肠、盲肠及食糜样本,测定肠道菌群、形态及细胞因子表达量。结果表明:1)ETEC K88感染处理显著降低断奶仔猪平均日增重和平均日采食量、空肠和盲肠食糜中乳酸杆菌数量、空肠和回肠绒毛高度以及空肠黏膜白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达量(P0.05);同时,显著提高断奶仔猪料重比和腹泻指数、空肠和盲肠食糜中大肠杆菌数量、空肠和回肠隐窝深度以及空肠黏膜白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达量(P0.05)。2)饲用凝结芽孢杆菌处理显著提高断奶仔猪平均日增重和平均日采食量、空肠和盲肠食糜中乳酸杆菌数量、空肠和回肠绒毛高度以及空肠黏膜IL-10 mRNA表达量(P0.05);同时,显著降低断奶仔猪料重比和腹泻指数、空肠和盲肠食糜中大肠杆菌数量、空肠和回肠隐窝深度以及空肠黏膜IL-6 mRNA表达量(P0.05)。3)除腹泻指数外,ETEC K88感染处理与饲用凝结芽孢杆菌处理之间对其他指标均无显著互作效应(P0.05)。结果提示,无论是否ETEC K88感染处理,饲用凝结芽孢杆菌均可通过平衡肠道菌群、维持肠道正常形态和缓解肠道炎症反应,改善断奶仔猪生长性能。     

α-酮戊二酸对脂多糖应激仔猪肠黏膜能量代谢的影响

试验研究13粮添加1%α-酮戊二酸(AKG)对多次脂多糖(LPS)刺激仔猪肠黏膜能量代谢的影响.选用24头体重(7.25±0.23)kg健康杜洛克×长白×大白断奶仔猪,随机分成3个组(对照组、LPS组、AKG组),每组8个重复,每个重复1头猪.对照组和LPS组饲喂基础日粮+1%淀粉,AKG组饲喂基础日粮+1%AKG,在试验第10天、第12天、第14天和第16天分别在LPS组和AKG组仔猪的腹膜注射80 μg/kg LPS,对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水.第17天仔猪麻醉后进行屠宰,刮取肠黏膜检测腺苷酸水平变化.试验结果显示,日粮中添加AKG可显著提高十二指肠黏膜二磷酸腺苷水平(P<0.05),并有效缓解LPS刺激导致的十二指肠和空肠黏膜的三磷酸腺苷和腺苷酸池水平的降低,提高空肠和回肠黏膜能荷水平.结果表明,仔猪日粮中添加1%AKG可以缓解LPS应激引起的肠黏膜能量代谢障碍,有利于肠黏膜屏障保护.     

表皮生长因子对脂多糖刺激断奶仔猪肠道钠磷转运载体蛋白Ⅱb表达的影响

本试验旨在研究表皮生长因子(EGF)对脂多糖(LPS)刺激的应激状态下仔猪肠道钠磷转运载体蛋白Ⅱb(NaPi-Ⅱb)表达的影响。本试验由2部分组成,1)细胞试验:以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型,试验设4个组,对照组(0 ng/mL EGF,0μg/mL LPS)、EGF组(100 ng/mL EGF,0μg/mL LPS)、LPS组(0 ng/mL EGF,1.0μg/mL LPS)、EGF+LPS组(100 ng/mL EGF,1.0μg/mL LPS),每组3个重复; 2)动物试验:选取24头体重接近、健康状况良好的21日龄"长白×大白"二元杂交断奶阉公猪[平均体重(5.76±0.38) kg],随机分为4个组,对照组(基础饲粮)、EGF组(基础饲粮+2 mg/kg EGF)、LPS组(基础饲粮+腹腔注射100μg/kg BW LPS)、EGF+LPS组(基础饲粮+2 mg/kg EGF+腹腔注射100μg/kg BW LPS),每组6个重复,每个重复1头猪。结果表明:1)细胞试验中,与对照组相比,EGF组IPEC-J2细胞NaPi-Ⅱb mRNA及蛋白表达显著下降(P0.05),而EGF+LPS组细胞NaPi-Ⅱb mRNA及蛋白表达显著增加(P0.05),EGF与LPS免疫应激的互作效应对NaPi-Ⅱb mRNA及蛋白表达影响显著(P0.05)。2)动物试验中,各组间血清钙(Ca)含量无显著差异(P0.05),LPS组血清磷(P)含量显著高于对照组、EGF组、EGF+LPS组(P0.05),EGF组血清碱性磷酸酶(ALP)活性显著高于LPS组(P 0.05),EGF与LPS免疫应激互作效应对血清P含量影响显著(P 0.05),对血清Ca含量和ALP活性影响不显著(P 0.05)。与对照组相比,EGF组空肠与回肠NaPi-Ⅱb mRNA表达显著下降(P 0.05),而EGF+LPS组空肠与回肠NaPi-Ⅱb mRNA表达显著增加(P0.05),EGF与LPS免疫应激互作效应对空肠与回肠NaPi-Ⅱb mRNA表达影响显著(P0.05)。细胞与动物试验结果表明,EGF对NaPi-Ⅱb的表达起抑制作用,但在免疫应激状态下可促进NaPi-Ⅱb的表达,表明EGF可促进应激状态下肠道P的主动转运。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪肠道损伤的缓解作用

试验研究了N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激仔猪小肠黏膜DNA含量、RNA/DNA和TP/DNA比值、二糖酶活性及空肠黏膜occludin相对表达量的影响,探讨NAC对LPS刺激所导致的肠道损伤是否具有缓解作用。选取24头健康仔猪,采用单因子设计随机分成4个处理组:空白对照组、LPS组、0.025%NAC组和0.05%NAC组。每个处理6个重复,每个重复1头猪。空白对照组和LPS组饲喂基础日粮,0.025%NAC组和0.05%NAC组在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.025%NAC和0.05%NAC。于试验第17 d,对LPS组、0.025%NAC组和0.05%NAC组仔猪分别腹膜注射100μg/kg BW的LPS,空白对照组注射等量的生理盐水。注射LPS后6 h屠宰全部仔猪,刮取小肠黏膜。结果表明:①与空白对照组相比,LPS组的空肠黏膜RNA/DNA和TP/DNA比值均显著升高(P<0.05),空肠黏膜DNA含量,十二指肠黏膜乳糖酶活性,空肠黏膜麦芽糖酶、乳糖酶活性及空肠黏膜occludin相对表达量均显著降低(P<0.05)。②与LPS组相比,0.025%NAC组空肠黏膜RNA/DNA比值显著降低(P<0.05),空肠黏膜DNA含量、十二指肠黏膜乳糖酶活性及occludin相对表达量均显著提高(P<0.05);0.05%NAC组空肠黏膜RNA/DNA和TP/DNA比值均显著降低(P<0.05),十二指肠黏膜乳糖酶活性,空肠黏膜麦芽糖酶、乳糖酶活性及occludin相对表达量均显著提高(P<0.05)。试验结果表明,日粮中添加0.025%或0.05%NAC对LPS刺激所导致的肠道损伤有缓解作用。     

绿原酸对仔猪生长性能、血清免疫球蛋白及肠道黏膜形态与消化吸收能力的影响

本试验旨在研究绿原酸(CA)对仔猪生长性能、血清免疫球蛋白及肠道黏膜形态与消化吸收能力的影响。试验选取24头初始体重相近[(9.45±0.20)kg]的健康"杜×长×大"三元断奶仔猪,随机分为4组:1)对照组,基础饲粮;2)CA250组,基础饲粮+250 mg/kg CA;3)CA500组,基础饲粮+500 mg/kg CA;4)CA1000组,基础饲粮+1 000 mg/kg CA。每组6个重复,每个重复1头猪。试验期为14 d。结果表明:1)各组间平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均无显著差异(P0.05),CA1000组料重比(F/G)显著低于对照组(P0.05)。2)各组间血清免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量均无显著差异(P0.05),CA1000组血清免疫球蛋白G含量较对照组和CA250组显著升高(P0.05)。3)CA1000组十二指肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(V/C)值均显著高于对照组(P0.05),试验组十二指肠隐窝深度均显著低于对照组(P0.05);CA1000组空肠绒毛高度和绒毛宽度显著高于对照组(P0.05);各组间回肠绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度及V/C值均无显著差异(P0.05)。4)试验组十二指肠蔗糖酶活性均较对照组有所增加,但无显著差异(P0.05),麦芽糖酶活性均较对照组显著升高(P0.05);各组间空肠蔗糖酶活性无显著差异(P0.05),试验组空肠麦芽糖酶活性较对照组有所上升,但差异不显著(P0.05);各组间回肠蔗糖酶活性无显著差异(P0.05),CA1000组回肠麦芽糖酶活性显著高于对照组(P0.05)。5)各组间十二指肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)基因相对表达量均无显著差异(P0.05);各组间空肠SGLT1基因相对表达量也无显著差异(P0.05),CA1000组空肠GLUT2基因相对表达量显著高于对照组(P0.05);试验组回肠SG LT1基因相对表达量均较对照组有所增加,且CA1000组显著高于对照组(P0.05),但各组间回肠GLUT2基因相对表达量无显著差异(P0.05)。综上所述,断奶仔猪饲粮中CA的适宜添加量为1 000 mg/kg,添加该剂量CA能显著降低仔猪F/G,增强免疫功能,改善小肠形态与消化吸收能力,从而提高断奶仔猪生长性能。     

丁酸梭菌抑制脂多糖致急性应激大鼠肠道损伤的效果研究

本试验旨在研究丁酸梭菌(Clostridium butyricum)对健康大鼠生长性能及脂多糖(LPS)致急性应激大鼠肠道结构、肠道二糖酶活性及肠道炎症的影响。选取36只雄性SD大鼠,按体重分为对照组、LPS组和LPS+丁酸梭菌组,每4只大鼠1笼,每组3笼。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,LPS+丁酸梭菌组在基础饲粮的基础上添加0.05%丁酸梭菌。试验第40天,LPS组、LPS+丁酸梭菌组大鼠称重后按照4 mg/kg BW的剂量腹腔注射LPS(LPS浓度为1.5 mg/m L,注射量在1.0 m L左右),对照组大鼠腹腔注射1 m L生理盐水,3 h后处死采样。结果表明:1)丁酸梭菌对健康大鼠末重、平均日增重、平均日采食量、料重比未产生显著影响(P0.05)。2)与对照组相比,注射LPS显著增加了十二指肠隐窝深度(P0.05),显著降低了十二指肠绒隐比、空肠黏膜厚度以及空肠、回肠上皮淋巴细胞数(P0.05)。与LPS组相比,预防性饲喂丁酸梭菌能显著降低十二指肠隐窝深度(P0.05),显著提高空肠黏膜厚度及上皮淋巴细胞数(P0.05)。3)与对照组相比,注射LPS显著降低了十二指肠蔗糖酶和空肠麦芽糖酶活性(P0.05)。与LPS组相比,预防性饲喂丁酸梭菌能抑制LPS对十二指肠蔗糖酶活性的降低,LPS+丁酸梭菌组十二指肠蔗糖酶活性与对照组相比差异不显著(P0.05)。4)与对照组相比,注射LPS显著增加了空肠及回肠髓过氧化物酶(MPO)活性及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P0.05)。与LPS组相比,预防性饲喂丁酸梭菌显著降低了空肠与回肠MPO活性及空肠IL-6、TNF-α含量(P0.05),LPS+丁酸梭菌组回肠IL-6、TNF-α含量虽无显著降低(P0.05),但较对照组也未见显著增加(P0.05)。由此得出,丁酸梭菌对健康大鼠生长的无负面影响,给大鼠预防性饲喂丁酸梭菌可抑制LPS急性应激下LPS对肠道蔗糖酶活性的降低,缓解对肠道黏膜结构的破坏,提高肠道免疫功能,降低肠道炎症。     

L-精氨酸对脂多糖诱导的断奶仔猪肠道黏膜屏障损伤的缓解作用

试验研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪肠道黏膜屏障损伤的缓解作用.选择21日龄断奶的杜×长×大断奶仔猪18头,平均体重(7.52±0.92)kg,采用单因子试验设计,分为3个组:基础日粮(对照组)、基础日粮+LPS(LPS组)和基础日粮+LPS+0.5%Arg组(0.5%Arg组)(每组6个重复,每个重复1头猪).试验期为18 d.试验第18天,LPS组和0.5%Arg组腹腔注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水.注射LPS后4 h前腔静脉采血,屠宰,刮取小肠黏膜.结果表明:1)与对照组相比,LPS刺激显著降低十二指肠黏膜中二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05),与LPS组相比,0.5%Arg显著增加了十二指肠和回肠黏膜中DAO活性(P<0.05);2)与对照组相比,LPS对血浆D-乳酸含量无显著影响(P>0.05),而与LPS组相比,0.5%Arg显著降低了血浆中D-乳酸的含量(P<0.05);3)与对照组相比,LPS刺激显著增加了十二指肠黏膜中内皮素-1(ET-1)的含量(P<0.05).而与LPS组相比,0.5%Arg显著缓解了十二指肠黏膜中ET-1含量的上升(P<0.05);4)与对照组相比,LPS刺激显著增加了回肠黏膜中丙二醛(MDA)和空肠黏膜中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及空肠黏膜中GSH与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值(GSH/GSSG)(P<0.05),而与LPS组相比,0.5%Arg显著缓解了LPS导致的回肠黏膜MDA和空肠黏膜GSH含量的上升(P<0.05).这表明,L-Arg可通过降低肠黏膜中ET-1含量、降低机体的过氧化水平来缓解LPS导致的肠道黏膜屏障损伤.     

甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸对断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能及胰蛋白酶活性的影响

研究甘氨酰谷氨酰胺(Gly-Gln)和牛磺酸(Tau)对断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能的影响。以28日龄杜长大断奶仔猪为研究对象,采用随机分组设计法将72头健康、体重相近仔猪分为4组,每组3个重复,每重复6头,公母各半,进行为期28 d的饲养试验。4个处理组分别为:基础日粮(对照组)、基础日粮+0. 25%甘氨酰谷氨酰胺(Gly-Gln组)、基础日粮+0. 1%牛磺酸(Tau组)、基础日粮+0. 25%甘氨酰谷氨酰胺+0. 1%牛磺酸(复配组)。研究甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸对早期断奶仔猪小肠黏膜中抗氧化功能以及胰腺及空肠内容中胰蛋白酶活性的影响。结果显示:Gly-Gln组显著或极显著提高了十二指肠、空肠、回肠黏膜中的超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,显著提高了空肠黏膜中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性(P0. 05); Tau组显著提高了空肠黏膜中的SOD活性(P0. 05);复配组显著提高了空肠黏膜中的GSH-Px、SOD活性以及回肠黏膜中的SOD活性(P0. 05); Gly-Gln组和Tau组均提高了胰脏中的胰蛋白酶活性(P0. 05),复配组则显著高于对照组(P0. 05)。研究结果表明,饲粮中分别或同时添加甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸可以提高小肠各段黏膜的GSH-Px、SOD活性和GSH含量,同时提高仔猪的抗氧化能力及提高胰脏和空肠内容物中的胰蛋白酶活性。