甘蓝型油菜蛋白质双向电泳体系的建立

选用油菜品种08127,采用TCA-丙酮提取方法,pH 4~7胶条和改进的IEF聚焦程序,得到较好的蛋白质双向电泳结果,建立了一种适合甘蓝型油菜的双向电泳体系;利用其他甘蓝型油菜品种的幼苗、叶片和茎中的蛋白检验了建立的实验体系,都能得到较好的蛋白质双向电泳结果;利用该实验体系比较甘蓝型油菜幼苗不同发育时期蛋白质双向电泳图,找到二者之间的差异点,选取部分点成功进行了质谱分析。     

百脉根侧部花瓣发育突变体的研究(英文)

为了研究调控花瓣形状发育的基因网络,我们在豆科模式植物百脉根中筛选影响侧部花瓣发育的突变体。我们鉴定了两个独立的突变体:kew2和kew3。这两个突变体有相似的表型:突变体的侧部花瓣转化为类似野生型的腹部花瓣。遗传分析表明kew3和已报道的kew1等位,由同一个单隐性基因位点控制。kew1突变体定位于基因座位KEW1,与豌豆K位点直系同源。kew2的遗传分析暗示在侧部花瓣发育中有其它遗传因子与kew有相互作用。对这些突变体的分析和基因克隆有助于阐明两侧对称花型发育的调控机制和理解两侧对称花型的进化途径。     

牡丹的花型和花色

<正>牡丹品种繁多,根据萼片、雄蕊、雌蕊发育情况,形成了多姿形美的花型,五彩缤纷的花朵。花大而香,以黄、绿、肉红、深红、银红为上品,尤其黄、绿为贵,故又有"国色天香"之称。花型花型是牡丹重要的观赏性状。牡丹的花型主要由花瓣的多少、形状和排列方式决定,另外雌雄蕊的数量、位置和瓣化程度也起一定作用。牡丹的花型根据花瓣由少到多依次为单瓣型、荷花型、菊花型、蔷薇型、托桂型、台阁型、皇冠型、绣球型。单瓣型花瓣1~3轮,宽大平展,雌雄蕊(花心)正常,结实能力强。代表     

水稻籽粒蛋白双向电泳条件的优化及其蛋白组学方法的比较

探讨适用于籽粒蛋白组学研究的策略,对深入研究籽粒的发育过程具有重要的意义。本文对比了3种不同的蛋白提取方法,优化了双向电泳中自制管胶一向的等电聚焦条件和IPG干胶条一向的等电聚焦时间,以MALDI-TOF/MS、Western-blot和磷酸化蛋白组学3个重要的蛋白质组学研究方法对胶内蛋白质鉴定分析。结果表明,可溶性蛋白提取法最适用于籽粒蛋白组学的研究; 电泳条件优化后,得到了较优的2-DE图谱; 胶内蛋白点适用于质谱分析、蛋白表达量验证(Western-blot)及籽粒蛋白的磷酸化组学的研究。本研究为下一步在蛋白组水平上分析籽粒发育提供了技术支持。     

草原龙胆雄蕊发育特定阶段差异蛋白质组学的初步研究

在高等植物发育过程中,会发生许多形态学和生理学特征上的改变。为了更好地研究草原龙胆特定发育阶段雄蕊内蛋白质组的差异,以草原龙胆栽培品系49号为试材,利用荧光差异双向电泳技术(2D-DIGE)研究了草原龙胆孢原细胞与小孢子母细胞的差异表达蛋白质组,分析了差异表达蛋白质在草原龙胆雄蕊发育过程中的可能作用。结果表明:利用De Cyder软件分析获得了72个主要差异蛋白质点,其中表达上调点为35个,表达下调点为37个。使用MALDI-TOF-TOF质谱仪对胶上消化后的差异蛋白点进行质谱分析,可信度达到90%以上的蛋白质点为15个,分别为5-甲基四氢蝶酰三谷氨酸高半胱氨酸甲基转移酶、S-腺苷甲硫氨酸合成酶、33 kDa光系统Ⅱ放氧复合体、核酮-1,5-二磷酸羧化酶、质体分裂环状蛋白、34 kDa的线粒体外膜膜孔蛋白、70 kDa热激蛋白、磷酸甘油酸激酶、蛋白水解酶复合体β6型亚单位、天冬氨酸蛋白酶、对ATP和Zn~(2+)依赖型金属蛋白酶和未知功能蛋白等。因此,在草原龙胆雄蕊发育的特定阶段由于蛋白质组的差异表达,导致雄蕊在形态学和生理学特征上发生改变。     

玉米籽粒蛋白质双向电泳技术体系的优化

为了获得玉米籽粒双向电泳中蛋白质提取的最佳方法,建立最佳的玉米籽粒蛋白双向电泳技术体系,对酚抽提法、三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA/丙酮沉淀法)和可溶性蛋白提取法3种不同提取方法得到的蛋白质进行了分析,并在相同条件下进行双向电泳比对分析,结果表明:可溶性蛋白提取法获得的蛋白纯度高、浓度适中、双向电泳蛋白质点最丰富,最适合双向电泳研究;利用可溶性蛋白提取法获得的蛋白,对第一向等电聚焦参数等条件,以及不同p H值范围的IPG预制凝胶条进行了比较分析,结果表明:采用p H值3~10的IPG预制凝胶条时,采取电压梯度上升的方式,总聚焦70 000 Vhs、上样量800μg效果最佳,采用p H值4~7的IPG预制凝胶条时,总聚焦80 000 Vhs、上样量900μg效果最佳,并且采用p H值4~7的IPG预制凝胶条相比p H值3~10的凝胶条能分离到更多的点,最后结合蛋白质点MALDI-TOF-TOF质谱鉴定分析,建立了一套适用于玉米籽粒的蛋白质双向电泳技术方法,即采用可溶性蛋白提取法提取蛋白,采用24 cm、p H值4~7的IPG干胶条,上样900μg电泳效果最佳,等点聚焦程序:500 V、1 h,1 000V、1 h,2 000 V、1 h,4 000 V、2 h,8000 V、4 h,8 000 V、80 000 Vhs,500 V保持。试验研究为后续玉米籽粒发育差异蛋白研究奠定了技术基础。     

奶牛血浆蛋白质组学研究中双向凝胶电泳条件的优化

摘要：【研究目的】血浆蛋白组成复杂、信息含量丰富。血浆蛋白质结构和数量的改变,对疾病诊断和治疗具有重要的意义;【方法】双向电泳技术是蛋白质组研究中比较常用的一种蛋白质分离技术。根据血浆蛋白动态范围大,高丰度蛋白对分析存在干扰的特点,设计了两种实验方案,并比较了这两种方案的优缺点,;另外对双向电泳过程中的血浆样品的采集,样品制备,等电聚焦,聚丙烯酰胺电泳和图像分析步骤的注意事项进行讨论,为血浆作为诊断蛋白质组的应用提供参考。【结果】使用热SDS法处理样品可分离出230个可以重复的蛋白点。Aurum Affi-Gel Blue Mini columns除白蛋白柱处理样品分离了156个可重复的蛋白点;【结论】热SDS法处理血浆样品联合pH4-7的IPG胶条的方案,步骤简单,分离效果好。     

毛尖紫萼藓(Grimmia pilifera)总蛋白质双向电泳体系的建立

为开展毛尖紫萼藓(Grimmia pilifera)的蛋白质组学研究,本研究对毛尖紫萼藓(Grimmia pilifera)总蛋白质提取方法和双向电泳参数进行了筛选和优化,以期建立适合毛尖紫萼藓蛋白质双向电泳的实验体系。分别采用Tris-酚抽提法和TCA-丙酮法对毛尖紫萼藓总蛋白质进行提取,比较分析了两种蛋白质提取方法的效果,并研究了IPG胶条的pH范围及蛋白质电泳上样量等因素对毛尖紫萼藓蛋白质双向电泳结果的影响。结果发现,在SDS-PAGE电泳结果中,与TCA-丙酮法相比,Tris-酚抽提法提取的蛋白质条带清晰,数目较多,完整性较好;在双向电泳结果中发现,与pH值为3~10的IPG胶条相比,使用pH值为4~7的IPG胶条的双向电泳图谱蛋白质点清晰且分布均匀,更适合毛尖紫萼藓的蛋白质组学分析;使用24 cm的pH值为4~7胶条,上样1200μg蛋白质时,电泳结果中可分辨的蛋白质点最多,且形状规则,水平和垂直拖尾情况较轻,图像清晰。本研究基于Tris-酚抽提法建立的毛尖紫萼藓蛋白质双向电泳体系获得的蛋白质样品质量好,电泳分辨率高,为毛尖紫萼藓进一步的蛋白质组学研究提供理论参考。     

水稻生育后期蛋白质组差异表达的图谱分析

从蛋白质组学角度对水稻生育后期的叶片蛋白质组变化进行了研究,利用Imagemaster 2D Elite 5.0软件对所得到的双向电泳图谱进行分析比较,以揭示水稻叶片蛋白质组的表达差异。结果表明,经图谱分析共得到差异蛋白质点47个,其中孕穗期及抽穗期新增蛋白质点6个,21个随生育进程表达丰度增加,6个蛋白质点表达丰度逐渐减弱,其它14个蛋白质点呈无规则变化,多表现为在某个生育时期具有峰值;蛋白质是细胞功能执行者,受细胞功能或细胞环境变化的影响,因此,上述蛋白质发生变化的原因可能与水稻后期的发育转变有关系     

2D-DIGE蛋白质组技术体系及其在植物研究中的应用

蛋白质组技术是植物基因功能鉴定和分析的强有力工具.经典的双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术,但差异蛋白质组分析使其具有更大的挑战性,因此在蛋白质水平的基因表达的定量分析研究需要更高灵敏度和更宽动力线性范围的技术.双向差异凝胶电泳(two dimension difference gel electrophoresis,2D-DIGE)是一种新出现的荧光标记的定量蛋白质组学技术,比经典的2-DE具有更高的动力学范围和灵敏性.该方法通过引入内标使得多个样品在一块胶上分离,进而减少了实验条件不一致引起的误差.2D-DIGE结合质谱、生物信息学及高可信度的统计分析使得成功地定量、鉴定植物蛋白质成为可能.本文综述了2D-DIGE蛋白质组学的基本原理,实验方法,2D-DIGE蛋白质组的优缺点和可能解决的方法,以及该技术体系在植物研究中的应用.     

Product Development Method Based on Product Development Domain

Product development is an integrated and interactive process. This paper proposes that there are three domains in the process of product development, i.e. product domain, organization domain and process domain, viewed at three angles of product, organization and process of product development. It is proposed that product domain is the core of these three domains, and then gets interrelations within them. The method of classifying parts and components in product domain is put forward, and the corresponding organization domain and process domain are put forward. The direction of parts and components domain is pointed out. In the end, this paper gives an example applied to the method in a motorcycle enterprise.     

Tourism Development and Sustainable Development of Disaster Site

The necessity of developing tourism in disaster sites was explored,famous disaster sites in the world were taken for example,and strategies for the tourism development of disaster sites proposed according to the basic theories of sustainable development.     

农业专家系统开发平台的研究现状及发展趋势

在中国，特殊的国情造成农业专家一般对计算机及其相关技术十分陌生，知识工程师对于农业知识知之更少，使得开发农业专家系统十分困难。专家系统开发平台的出现，使这个问题得到了缓解。农业专家无需掌握过多的编程知识就能建造性能良好的专家系统，而知识工程师只需研制开发平台，并根据领域使用要求，修改完善平台，无需掌握领域知识，两者相得益彰。在此，综述了近几十年国内外农业专家系统开发平台的研究及应用现状，提出了存在的问题，并介绍了农业专家系统开发平台的发展趋势，为农业专家系统开发平台在中国农业信息化中更好地服务提供参考依据。     

棉花生长发育模拟模型COTGROW的建立 Ⅱ 发育与形态发生

ＣＯＴＧＲＯＷ是一个可用于栽培管理的棉花生长发育模拟模型,它考虑了棉花的碳素平衡、发育与形态发生、水分平衡、氮素平衡、磷和钾的吸收及中国的常规栽培措施。本文对其中的棉花发育和形态发生部分进行了描述,并利用在河南安阳进行的田间试验进行了初步验证。结果表明,模型能较好地模拟株高、单株主茎节数和果枝数、叶面积指数等。     

我国蓝莓产品开发和未来发展建议

蓝莓含有丰富的营养物质和多种保健功效,我国蓝莓产品的开发仍具有很大的潜力.本文概述了蓝莓活性成分,阐述了蓝莓产品的开发现状和未来发展方向,以期为蓝莓产业的发展和综合利用提供参考.