地克珠利在雏鸡体内的药动学研究

目的应用高效液相色谱测定单次给药后雏鸡体内地克珠利的血药浓度,研究其药动学规律。方法44羽雏鸡按10mg／kg．BW经口单次灌服地克珠利预混剂,采用高效液相色谱系统的流动相为乙腈：0．1％三氟乙酸：水,流速1．0mL／min,分流比57：20：23,固定相为TC-C18柱,检测波长280nm,测定地克珠利血浆浓度,计算其药动学参数。结果在0．3125～20μg／mL范围内,地克珠利血药浓度呈线性关系,最低检测浓度为0．16μg／mL,回收率在79．75％以上,日内RSD小于5．68％。单剂量给药后地克珠利的主要药动学参数为：血药浓度峰值（Cmax）32．97μg／mL,达峰时间（Tpeak）1．64h,消除半衰期（T1／2β）24．29h,药时曲线下面积（AUC）349．47（mg／L）·h,血浆清除率（CL）0．03mg／kg·h。结论地克珠利在雏鸡体内代谢符合一级吸收的二室模型,药物吸收比较快和消除缓慢。     

络合铜对藻类、车轮虫的杀灭试验及对鳜鱼的安全性试验

络合铜杀灭藻类和车轮虫试验及对鳜鱼的安全性试验表明，水中络合铜在1．2μg／mL浓度时就可以有效地杀灭寄生于实验鱼鳃部的车轮虫，在2．0μg/mL浓度时可以有效地杀灭池塘微囊藻。相对硫酸铜来说，络合铜对鳜鱼的毒性较小，当水中浓度达到6．0μg／mL时对鳜鱼造成的死亡率也只有6．7％；而慢性毒性试验中，首日投药使水中药物浓度为0．6μg／mL，以后每天投与同样量的药物至第5天，实验鱼也未见任何异常表现。因此，对鳜鱼使用络合铜来杀灭纤毛虫类寄生虫，在有效使用浓度(1．2μg／mL)下是安全的。     

鸡毒支原体的分离鉴定和最低抑菌浓度测定

从山东、河北、北京和天津等不同地区分离、鉴定了4株鸡毒支原体，通过体外最低抑菌浓度测定发现泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉索、罗红霉素、林可霉素／壮观霉素合剂、氧氟杀星、乳酸红霉素和盐酸林可霉素对该4个菌株的最低抑菌浓度(MIC)平均值分别是0．0062μg/ml、0．0171μg/ml、0．0682μg/ml、8．5248μg/ml、8．5248μg/ml、0．1024μg/ml、0．4550μg/ml和15．4944μg/ml，同时发现不同菌株之间的最低抑菌浓度有明显的差异。该试验结果表明鸡毒支原体容易对抗菌药物产生抗药性，目前临床预防或治疗鸡毒支原体感染可选用泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素和氧氟杀星等药物，而常规使用的红霉素和罗红霉素效果不佳。     

岭南黄鸡内服穿心莲超细粉后血中穿心莲内酯浓度的测定

以穿心莲内酯为指标性成分，应用RP-HPLC法，测定了岭南黄鸡内服穿心莲超细粉后血浆中穿心莲内酯的含量。结果，在测定的时间段（服药后第0～6h），穿心莲内酯在血浆中均有分布，给药后约1h达到峰值，峰浓度约为1．75μg／mL；给药后第6h的峰浓度约为0．09μg／mL。平均绝对回收率为85．24％～91．18％，定量限、检测限分别为0．04和0．02μg／mL。研究结果为建立禽类血浆中穿心莲内酯的测定方法，对动物服用穿心莲后有效成分的吸收情况进行评价提供了基础资料。     

小鼠胚胎成纤维细胞饲养层制备条件的研究

为了建立活力稳定的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,本实验以13．5～14．5d的ICR小鼠胚胎为实验材料,以MTT法测定细胞活力,探讨了不同浓度的丝裂霉素C、丝裂霉素C不同处理时间及不同的成纤维细胞接种密度对MEF活力的影响。结果表明：10μg／ml的丝裂霉素C处理后的MEF活力比其他浓度（1μg／ml、5μg／ml、20μg／ml、30μg／ml）丝裂霉素C处理后的MEF活力稳定;用10μg／ml的丝裂霉素C处理2．5h,MEF活力比处理1．5h、3．5h、4．5h稳定;以2．5～35×10^5／ml密度接种于96孔板上,每孔200μl,MEF活力较接种密度为1．5×10^5／ml、4．5×10^5／ml、7．5×10^5／ml稳定。结论：用10μg／ml丝裂霉素C处理MEF 2．5h,2．5～3．5×10^5／m;密度接种于96孔板上,每孔200μl,以10％的胎牛血清培养液培养能得到活力稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。     

控制包虫病的缓释剂型研究

我们对研制的４种抗包虫病犬用吡喹酮缓释剂进行了试验。通过人工感染表明，缓释包埋剂３号皮下植入７和８个月时，预防感染细粒棘球绦虫的保护率达９８．４６％和９７．７２％（Ｐ〈０．０１），在包虫病高发区进行了现场试验，１３３只犬植入８个月和１４个月时用槟榔碱泻下法抽检３８只，皆未发现细粒棘球绦虫的感染，而对照犬的感染率为２０％（Ｐ〈０．０５），此外，还研究了反相高效液相色谱检测犬应用吡喹酮缓释剂后的血药浓     

断奶仔犬营养性腹泻的防治

一、断奶仔犬的营养生理特点 （一）代谢机能旺盛,相对生长迅速 仔犬代谢旺盛,生长快,每千克体增重的蛋白质沉积量为4～7g,而成年犬每千克体增重沉积的蛋白质仅为0．1～0．2g,前者是后者的35～40倍;仔犬每千克体重需119～320mg钙,89～240mg磷。     

高效液相色谱法同时测定猪血浆中的SMM、SMZ和TMP

建立了同时测定SMM、SMZ和TMP血药浓度的HPLC方法。采用Waters HPLC系统，Waters ODS2柱，以乙腈：0．017mol／L磷酸液(20：80)为流动相，检测波长230nm。SMM、SMZ在0．05～10．0μg／mL范围内线性良好(r=0．99998)，TMP在0．01～2．0μg／mL范围内线性良好(r=0．99999)。平均方法回收率分别为94．5％、98．6％和86．8％。最低血浆检测浓度分别为SMM0．15μg／mL、SMZ0．15μg／mL，TMP0．03μg／mL。该法采血量少，样品预处理简单，检测快速、灵敏。     

复方苦参注射液的体外抗菌作用及急性毒性试验

采用试管二倍稀释法测定了复方苦参注射液对猪大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度（MTC）；采用小鼠肌肉注射复方苦参注射液测定半数致死量。结果：复方苦参注射液对猪大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为78μg/ml、0．41μg/ml、1250μg／ml；小鼠肌肉注射复方苦参注射液测定半数致死量为34．67mg／kg，95％置信区间为26．27mg/kg到38．87mg／kg     

长效环丙沙星注射液注射后不同时间猪血药浓度的测定

按 1 8mg/千克的剂量给 3头健康猪肌肉注射长效环丙沙星注射液 ,用高效液相色谱法测定血浆中药物的质量浓度 ,并用MCPKP药代动力学程序处理所得数据。结果发现该制剂的T1/2 β(消除半衰期 )为 3 0 91h± 0 83 )h ,Cmax(达峰浓度 )为 1 0 9μg/ml± 0 2 7μg/ml,体内消除较慢。肌注后有效血药浓度能维持 60小时     

不同来源单核细胞增多性李氏杆菌inlB和actA基因的克隆测序分析及基因缺失株的毒力试验

根据GeneBank上发表的单核细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)的内化素B(internalin B,inlB)和肌动蛋白A(actin A,actA)基因设计特异性引物,对5株不同来源的健康绵羊单核细胞增多性李氏杆菌和一株临床分离的单核细胞增多性李氏杆菌的inlB及actA基因进行PCR扩增,克隆测序分析其序列,并对2株部分基因缺失的单增李氏杆菌进行小鼠攻毒试验。结果表明:5株健康绵羊分离株单增李氏杆菌与临床分离株有较高的同源性,并且发现2株部分基因缺失的单增李氏杆菌;小鼠攻毒试验表明缺失株毒力有降低,但是不明显。     

马实验性软组织伤冷冻效应观察

选择营养中等的成龄健康蒙古马10匹,分为两组,均实验性地造成体表软组织伤(长12cm,深3cm切口),分别立即及24h后进行冷冻。对冷冻诱起马体表局部软组织坏死及其修复特点,以及冷冻性免疫作用进行了系统观察。结果:①体表软组织冷冻性坏死的性质,最初属凝固性坏死,以后呈干性或湿性坏疽变化;②在冷冻性损伤修复过程中,损伤深部健康组织首先形成肉芽组织分界面,成为防止感染的屏障和修复损伤的肉芽组织基础;在坏死组织脱落后,伤面pH为7.0～7.7,有利于肉芽再生和防止化脓性感染;修复过程明显见有组织坏死及肉穿组织生成,属第二期愈合,但愈合后不留功能障碍;③冷冻性坏死能诱起T淋巴细胞显著增多(冷冻后第三周t=2.8068,P<0.05,第四周t=6.4869, P<0.01),可作为冷冻性免疫力增强的指标之一。     

家蚕SOD的品种间差异研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶活性染色，分析了115个家蚕品种及遗传系统的血液SOD同工酶的酶谱。结果：不同品种及遗传系统间的酶谱存在着显差异。家蚕血液SOD在大部分供试品种及遗传系统中都能看到5条酶带，少数只能见到2条弱带，酶带最多达8条。品种及遗传系统间酶带的宽度及染色程度亦存在着明显的差异。     

家蚕卵无胶着力基础品种的创建

用多元杂交方法，育成蚕卵无胶着力兼斑纹限性基础品种9357、9214等，其综合经济性将达到实用水平，并配成四元杂交种在农村试用，效果良好。     

实验性脾虚证大鼠免疫细胞因子变化及四君子汤对其影响

本文分别通过大鼠肌肉注射利血平和口服小承气汤两种方法复制脾虚证动物模型,比较研究了脾虚证大鼠细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)的含量变化,并用四君子汤治疗以反证.结果表明,不论利血平法复制脾虚证动物模型,还是小承气汤复制脾虚证动物模型,均表现为外周血IL-2、IL-6和TNF含量明显低于正常对照组与四君子汤治疗组(P＜0.01),对照组与治疗组之间除利血平所致脾虚证动物模型用四君子汤治疗后TNF含量明显高于对照组(P＜0.05)以外,以上其它指标均无明显差异(P＞0.05).说明脾虚大鼠产生IL-2、IL-6和TNF等细胞因子能力下降,使免疫功能处于低下状态,四君子汤治疗能够提高脾虚证大鼠产生细胞因子的能力,从而达到健脾益气调整机体的免疫功能.     

苜蓿自交不亲和性研究

实验中探讨了苜蓿自交不亲和性和遗传特征。结果得出:1.苜蓿自交结荚百分率为0～92％,平均为27.6％。苜蓿自交不亲和性在群体中呈连续、偏态分布。2.苜蓿自交不亲和性反应主要发生在雌蕊组织下部(子房及子房腔)。3.确定自交不亲和或自交亲和性的判别函数方程为Y=-0.0804x_1—0.5228x_2+0.6117_3。4.苜蓿自交不亲和性受单位点、复等位基因控制,并具有CSI遗传特点。5.S基因与过氧化物同工酶基因(Prxl)为连锁,两者间重组值为27％。6.PSC的遗传力h~2=62％,选择无论对亲和性和不亲和性均为有效。根据本试验结果讨论了苜蓿SI的测度指标、授粉方式及不亲和性的数量差异问题,并探讨了紫花苜蓿与黄花苜蓿种的分类差异,认为两者理应属同一种或种内不同生态型。     

A和B亚群禽白血病病毒gp85基因的表达及其抗血清的亚群特异性比较

为制备快速鉴定禽白血病病毒A和B亚群（Avian leukosis virus subgroup A/B,ALV-A/B）的特异性诊断试剂,并鉴定分析ALV-A SDAU09C1株和ALV-B SDAU09C2株抗血清的亚群特异性,将两株病毒的gp85基因进行克隆、原核表达后,免疫家兔分别制备抗ALV-A和ALV-B的血清。血清交叉中和反应显示,SDAU09C1株和SDAU09C2株间的抗原同源性相关系数r=0.366,属于不同亚群;间接免疫荧光表明,两种抗血清均与ALV-A和ALV-B反应,但与ALV-J无反应。结果表明本试验制备的重组蛋白具有较好的反应原性,制备的二种兔抗血清可快速识别ALV-A/B与ALV-J。     

基于E^rns蛋白的猪非典型瘟病毒间接ELISA检测方法的建立

猪非典型瘟病毒(APPV)是新近发现的仔猪先天震颤的病原体,其血清学检测方法亟待建立.E^rns蛋白是APPV诱导机体产生中和抗体的重要保守性抗原,是血清学检测的特异性靶标之一.本研究制备了猪非典型瘟病毒原核表达的Erns蛋白,以其作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法.结果表明,最佳抗原包被浓度为8μg/mL,最佳血清稀释度为1:10,阴阳性临界值D450=0.318,灵敏度达到1:64,特异性好,与猪瘟、猪伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪流感及圆环病毒病的阳性血清均不发生交叉反应.该检测方法重复性好,批内变异系数最大值为7.84%,批间变异系数最大值为8.57%.利用建立的间接ELISA方法对50份猪临床血清样本进行了检测,其阳性率为10%.基于Erns蛋白间接ELISA检测方法的建立为APPV的流行病学调查和临床诊断提供了有效的工具.     

龙角蚕中肠组织cDNA文库的构建

用建立非表达文库的方法 ,从龙角性状家蚕中肠组织的mRNA合成cDNA片段 ,重组入噬菌体λgt10的EcoRI的位点之间 ,所构成的基因非表达文库库容量为 1.3× 10 6,经大肠杆菌C60 0与C60 0hlf菌株平皿测定 ,重组率为 70 %。     

野桑蚕血缘对家蚕性状的影响

用家蚕雌与野桑蚕的雄交配,得到961B、961C、961D、961E四个形态性状不同的蚕品种.经与亲本比较,这4个带有野桑蚕血缘的蚕品种表现出龄期经过短,健康性增强,但茧层量低,交配能力弱,不受精卵多,卵质较差.