不同方法构建磺胺甲基嘧啶免疫抗原的比较研究

探索了磺胺甲基嘧啶(SM1)免疫抗原合成的有效途径,采用重氮偶合法和戊二醛法分别合成SM1免疫抗原,并对其光谱特征和SM1-BSA的结合比进行了比较.结果表明,在合成磺胺甲基嘧啶免疫抗原中采用重氮偶合法比戊二醛法的效果要好.     

十二烷基苯磺酸钠对重氮偶合反应催化作用的研究

本文以十二烷基苯磺酸钠(简称为NaDBS)为阴离子相转移催化剂(anionic—PTC),对其在偶合反应中的催化性能进行了初步的研究。结果表明NaDBS确能使一些较难发生的重氮偶合反应顺利进行。本文使用一系列的苯胺衍生物作为重氮组份,以咔唑、二苯胺作为偶合组份,合成了九种偶氮化合物,其中有六种未见文献报道。最后对结果进行了详细的讨论。     

比较目测法和刈割测产法对草地地上干物质现存量的测定

通过对呼仑贝尔市鄂温克草甸草原地上干物质现存量进行目测法和刈割法比较试验,表明:目测样方数与地上干物质现存量呈显著正相关关系(P<0.05).且测得的地上现存量大小:A>B>C>D.受过训练的人员通过比较目测法测得草地地上干物质现存量(SDM)与刈割测得的地上现存量SDM最接近,其余首次进行该试验的工作人员测得的SDM与刈割测得的SDM差异很大.分别对目测样方数量、取样距离对SDM影响进行分析得出:随目测样方数量增加,目测SDM逐渐接近刈割测得的SDM;增加取样距离,4条曲线波动性增加,测得的SDM变化增大.     

改良重氮法合成米诺环素人工抗原及结果鉴定

分别采用重氮法、戊二醛法及改良重氮法将米诺环素半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原,3种方法的偶联比分别为5∶1,10∶1和15∶1;紫外光谱、红外光谱、凝胶电泳对改良重氮法合成的人工抗原进行鉴定,成功合成了人工抗原;将改良重氮法合成的人工抗原MNC-BSA免疫BALB/C小鼠,用间接ELJSA法测定抗体效价及其特异性.结果表明:小鼠血清抗体效价均在1∶12800以上,为研究制备米诺环素单克隆抗体奠定了基础.     

七叶鬼灯檠中多酚类化合物提取工艺研究与含量测定

研究了七叶鬼灯檠(Rodgersia aesculifolia)中多酚类化合物最佳提取工艺条件,并采用重氮试剂比色法对总多酚含量进行了测定。在单因素试验的基础上,用正交试验法对总多酚的提取工艺进行优选,选用L9(34)进行正交试验,以总多酚提取率为指标,研究提取溶剂种类、提取溶剂浓度、提取时间、料液比对总多酚提取率的影响。结果表明,最佳提取工艺为:料液比为1∶10的60%甲醇中性溶液,不加超声连续回流提取3次,每次30 min。重氮试剂比色法测得七叶鬼灯檠中总多酚含量为28.32%。提取工艺科学、合理。     

含活性官能团光响应单体的合成及表征

以对氨基苯甲酸为原料经酯化、重氮-偶合、烷基化取代和硫代反应合成了含巯基羧基的光响应性功能单体,获得了较好的收率.用1H-NMR证实了该功能单体的结构,并研究了其光响应性能.     

小鼠血清抗磺胺二甲氧嘧啶抗体的研制

将磺胺二甲氧嘧啶(SDM)与载体牛甲状腺球蛋白(BTG)偶联,构建SDM完全抗原SDM-BTG。用SDM-BTG免疫小鼠,诱导小鼠产生血清抗SDM抗体。ELISA检测表明:SDM-BTG免疫小鼠所产生的多克隆抗体与SDM-BSA包被抗原的结合有较强的特异性和较高的亲和力。     

空间数据挖掘在ITS中的研究进展

智能交通系统(ITS)是解决当今交通问题最有前途的方向之一,交通信息的分析处理是其核心问题。本文首先介绍了智能交通系统和空间数据挖掘的概念,剖析了当前智能交通系统的发展现状及SDM应用的可能,并在分析交通信息的特征及空间数据挖掘(SDM)可发现的知识类型的基础上,提出了几种SDM在ITS中的应用模型。最后总结了SDM在ITS中进一步发展需要考虑和注意的问题。     

磺胺甲基异噁唑(SMZ)和复方磺胺甲基异噁唑(SMZ—TMP)在家兔体内代谢动力学的研究

选甩健康家兔24.只分成两组,分别以单剂量一次耳静脉推注SMZ(100mg/kg)和SMZ(100mg/kg)—TMP(40mg/kg),并在用药前和用药后的不同间隔时间从颈静脉采血。以重氮偶合比色法测定血药浓度,用SHARP 5100计算器进行数据处理。每只实验兔血药浓度一时间曲线均符合无吸收因素二室模型。主要动力学参数是:静注SMZ组T1/2β=2.89h,Vd=5.63(100ml/kg)、TCP=5.06h。静注SMZ—TMP组T1/2β=2.6311h、Vd=5.2672(100ml/kg)、TCP=4.894h。     

籼稻花药培养诱导条件优化

以福稻88//华占/甬优2640的F1代为材料进行花药培养。采用正交试验法设置预处理温度、预处理时间、热激温度、噻重氮苯基脲(Thidiazuron,TDZ)浓度4种因素各4个水平,共16种处理组合,对不同条件下花药诱导出愈率进行比较。结果表明,直观分析确定的4个因素最优组合为预处理温度10℃、预处理时间8 d、热激温度37℃、TDZ浓度0.10 mg/L,但考虑到因素间的交互作用,进一步分析得到最优组合为预处理温度10℃、预处理时间8 d、热激温度37℃、TDZ浓度0.05 mg/L。     

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。     

磺胺间甲嘧啶人工抗原的制备

采用重氮化法,将磺胺间甲嘧啶(SM1)与牛血清蛋白(BSA)偶联制备合成抗原BSA-SM1,并用作免疫抗原,用紫外扫描法和聚丙烯酰胺电泳法对其进行鉴定,并测得偶联的结合比.结果表明,通过紫外扫描和聚丙烯酰胺电泳法的测定证明偶联成功,偶联的结合比为9:1.用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,获得了高效价的pAb,为SM1残留免疫学检测方法的建立奠定了基础.     

Synthesis and Identification of SG-BSA and SG-OVA

Hapten sulfaguanidine （SG） was coupled with carrier protein bovine serum albumin （BSA） to form a full antigen SG- BSA by diazotization and glutaraldehyde methods. Ovalbumin （OVA） was used as protein carrier to couple with Hapten SG by glutaraldehyde method. Then, the immunogen and the coating antigen were purified by dialysis and gel exclusion chromatography. The conjugated ratio of SG to BSA in artificial antigen was 5.3 （using diazotization method） and 6.5 （glutaraldehyde method）, and the conjugated ratio of SG to OVA in coating antigen was 2.3 （glutaraldehyde method） by UV-visible spectrophotometer. The coupling was successful according to the analysis of sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE）. BALB/c mice were immunized with the antigen （SG-BSA）, and the titers of antiserum were tested to be 1 ： 6 400 and 1 ： 400 after three periods of immunities by indirect ELISA, which further identified the success of the synthesis of both immunogen SG-BSA and coating antigen SG-OVA.     

磺胺间二甲氧嘧啶人工抗原的合成与鉴定

用重氮化方法将SDM偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成免疫抗原BSA-SDM和包被抗原OVA-SDM,通过紫外扫描(UV)、SDS-PAGE凝胶电泳试验。结果显示:BSA-SDM和OVA-SDM的UV与BSA、SDM的相比均发生了改变,出现了明显的特征峰。这表明半抗原和载体偶联成功。用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价。结果表明,获得了高效价的pAb,为SDM残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

磺胺嘧啶多克隆抗体的制备

为制备磺胺嘧啶(sulfadiazine,SD)多克隆抗体(pAb),用重氮化方法将SD偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成免疫抗原BSA-SD和包被抗原OVA-SD。用紫外扫描、SDS-PAGE凝胶电泳试验检测,结果表明偶联成功。用BSA-SD免疫新西兰大白兔,间接ELISA测定多克隆抗体效价。阻断ELISA结果显示:SD单克隆抗体(pAb)的IC50达19.19ng/mL,和其他磺胺类药物交叉反应小于等于2.7%。结果表明,获得了高效价和特异的pAb。     

苦参碱人工抗原的合成与鉴定

【目的】合成并鉴定苦参碱人工抗原,以获取具有特异性和高亲和性的苦参碱多克隆抗体,为建立苦参碱的酶联免疫分析方法奠定基础。【方法】通过对槐果碱不饱和双键进行亲核加成、叠氮化、催化氢化合成苦参碱半抗原13氨基苦参碱(ST),并经MS、NMR法对其结构进行鉴定;采用戊二醛法将半抗原与载体蛋白偶联合成苦参碱的人工抗原(ST-BSA和ST-OVA),经紫外光谱扫描法、SDS-PAGE法、红外光谱扫描法对人工抗原进行鉴定;将制备的苦参碱人工抗原免疫健康新西兰大白兔获得苦参碱的多克隆抗体,通过间接非竞争ELISA方法测定其效价。【结果】成功合成了一种苦参碱半抗原13-氨基苦参碱(ST),与载体蛋白BSA、OVA偶联后得到了免疫原(ST-BSA)和包被原(ST-OVA),免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,效价达到128 000。【结论】成功合成了苦参碱人工抗原,为苦参碱免疫分析方法的研究提供了条件。     

氨基隐性孔雀石绿抗体的制备及ELISA方法的建立

以N,N-二甲基苯胺、对硝基苯甲醛为原料,合成改造了氨基隐性孔雀石绿半抗原,并通过紫外、红外、质谱鉴定。结果表明,氨基隐性孔雀石绿半抗原改造成功。采用重氮化法合成了氨基隐性孔雀石绿人工抗原,并通过紫外光谱进行鉴定,结果显示偶联蛋白成功。免疫大白兔制备了隐性孔雀石绿抗体,抗体效价达6.4×10~4。建立了隐性孔雀石绿ELISA方法,最低检测线为0.1μg/L。     

磺胺二甲基嘧啶人工抗原合成及多克隆抗体制备

磺胺二甲基嘧啶(SM2)为只具有反应原性而无免疫原性的半抗原。本试验将SM2重氮化后分别连接人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA),合成人工抗原,经紫外光谱扫描验证偶联结果,计算结合比分别为4∶1、3∶1。用偶联物SM2-HSA免疫新西兰白兔,以SM2-OVA为包被原,4次免疫后ELISA方法测定抗血清效价为1∶12 800。表明抗原合成成功,这为小分子药物残留的免疫学检测奠定了技术基础。