大白菜“早熟5号”不定芽再生体系的优化

选用大白菜品种“早熟5号”为材料,分析了外植体、苗龄、AgN03和植物激素对其不定芽再生的影响.结果表明:不同外植体类型中,采用4～5d苗龄的带柄子叶为外植体再生频率最高,添加AgN03后在3～7 mg/L的浓度范围内外植体分化率大幅度提升,分化率最高达到78.33％,带柄子叶于MS+6- BA 5 mg/L+ NAA 1 mg/L+ AgNO33 mg/L培养基上不定芽分化率最高,达到86.41％.     

榨菜子叶和带柄子叶再生植株的研究

以榨菜子叶及带柄子叶等为外植体,在添加不同激素的MS培养基上,经不定芽诱导,不定芽伸长,生根等步骤,获得了完整的再生植株.结果表明:4 d苗龄的子叶再生能力最强,带柄子叶的最佳苗龄为5～6 d.子叶和带柄子叶分别在MS BA 2 mg/L NAA 0.4 mg/L AgNO3 5 mg/L和MS BA 2 mg/L NAA 0.2 mg/L AgNO3 5 mg/L的培养基中不定芽分化的效果较好.不同基因型间对子叶外植体的再生影响不大,但对带柄子叶的再生影响较明显.     

芥蓝子叶离体培养再生植株的研究

以芥蓝Brassica alboglabra Bailey品种‘尖叶夏芥兰’带叶柄子叶和不带叶柄子叶切块为外植体，探讨了直接分化形成不定芽以及不定芽生根的适宜培养基组成．结果表明：带叶柄子叶比不带叶柄子叶切块的不定芽分化率高，其中在MS＋0．05mg／L NAA＋2．0mg／L6-BA＋30．00g／L蔗糖＋8．00g／L琼脂（pH5．8）培养基上，带叶柄子叶的不定芽分化率达93．75％；将分化形成的不定芽转接到不添加NAA和添加0．1mg／LNAA的生根培养基中，不定芽生根率分别达到100％和86．11％，其中以后者所形成的根多且较粗壮．     

雪里蕻高效再生体系的建立

以雪里蕻(Brassica juncea Coss. var. multiceps Tsen et Lee)子叶、带柄子叶、子叶柄和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行分化培养.结果表明:在4种外植体中,带柄子叶不定芽分化能力最强.子叶和带柄子叶不定芽分化的最适培养基分别为MS+2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+5 mg/L AgNO3和MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+5 mg/L AgNO3.带柄子叶和子叶不定芽分化的最佳苗龄都为5 d.AgNO3能显著地促进带柄子叶不定芽的分化,以5 mg/L的浓度为最佳.不同基因型对带柄子叶不定芽分化影响不大,但对子叶影响较明显.不定根诱导的最佳培养基为MS+0.2 mg/L NAA.     

大白菜外植体分化诱导及村植株再生的研究

利用大白菜的下胚轴、子叶切块和带柄子叶等外植体诱导分化和植株再生。结果表明：在ＭＳ＋１￣２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上获得的无菌苗质量最好，分化能力最强；在ＭＳ＋５．０／ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ分化培养基上，直插的带柄子叶分化频率最高，接种后４０天达４１．２％，并能形成大量不定芽（多者一个外植体可达２０多外不定芽）；幼苗在ＭＳ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上能正     

I-72杨再生体系的建立

以水培I-72杨（Populus euramericana San Martino）的叶片和叶柄为外植体,探讨了I-72杨植株再生的方法。结果表明：I-72杨愈伤组织诱导和不定芽分化的最佳培养基为MS＋BA 0．5mg／L＋NAA0．1mg/L,愈伤组织诱导率为97．0％,不定芽分化率为91．1％;在诱导培养基中添加Vc（150 mg／L）能有效地抑制叶片的褐变,褐变降低率达25．0％;不定芽在MS＋BA 0．3mg／L＋NAA 0．05mg／L培养基中继代增殖系数为6．3;添加0．8mg／L GA3对继代培养中不定芽的伸长和增殖有显著效果;在生根培养基1／2MS＋NAA 0．05mg／L＋IBA0．2mg／L上,生根率达93．5％。     

罗汉果叶片培养及其不定芽形成的细胞学观察

以罗汉果叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、不同培养方式、不同植物生长调节剂对不定芽分化的影响,并对不定芽的形成进行了细胞组织学观察。结果表明：基本培养基以改良MS较为适宜,在附加6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L的固体培养基中,平均每块愈伤组织再生芽高达5．6个。叶片正面接触培养基的培养方式芽分化率达到90．3％。芽苗在1／2MS＋NAA0．2mg／L＋IBA0．5mg／L＋蔗糖20∥L的固体培养基中诱发生根效果最好。硝酸银对不定芽分化具明显效果,分化率达到86．7％。细胞学观察发现,不定芽起源于叶片紧密愈伤组织表层。     

大白菜子叶高频再生体系的建立

以大白菜(Brassica campestrisL ssp.pekinensis)为材料,MS为基本培养基,研究了不同基因型、不同外植体类型、不同激素组合及预培养处理条件对不定芽再生的影响。结果表明:基因型、外植体类型、激素组合和预培养条件对不定芽的形成均具有十分明显的影响。3个基因型间,‘85-1’的再生频率最高,‘天津青麻叶’次之,‘北京新三号’最低;2种外植体中,带柄子叶的再生频率显著高于下胚轴;22个激素组合中,TDZ 0.7 mg/L+NAA 0.5 mg/L组合的再生频率最高(72.5%,‘85-1’带柄子叶);7个预培养处理中,0.5 mg/L 2,4-D预培养1d的效果最好,不定芽再生频率达到87.7%,且芽数多、质量好。     

京彩甜椒离体培养及植株再生的研究

利用甜椒的下胚轴、子叶、带柄子叶的外植体诱导分化和植株再生。结果表明：带柄子叶的分化能力最强，6-9d苗龄的带柄子叶在MS 5.0mg/L6-BA 0.5-1.0mg/L IAA 4.0mg/L AgNO3培养基上，分化频率最高可达100%。并形成大量的不定芽（1个外植体可产生15-20个以上的芽），幼苗在MS 0.2mg/L IAA培养基上能正常生根，长成健壮的再生植物。     

不同基因型黄瓜离体再生及其影响因素的研究

以6个黄瓜(Cucumissativus L.)自交系为试验材料,研究不同的基因型、外植体类型和激素组合等因素对黄瓜离体植株再生的影响。结果表明,不同基因型黄瓜材料的再生能力差别较大;带柄子叶比下胚轴和不带柄子叶的再生率高,是比较理想的外植体材料;较低的6-BA/IAA配比促进黄瓜不定芽的分化;6-BA/IAA配比较高则适合再生芽的伸长;添加0.5mg/LAgNO3可以促进不定芽发生,5～6d苗龄的外植体分化再生频率较高;在供试的6个试验材料中,M8,M10的再生频率较强,分别达到96%和90%。高频率不定芽诱导分化培养基为:MS+IAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L+AgNO30.5mg/L;不定芽伸长的培养基为MS+IAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30.5mg/L;高效生根诱导培养基为MS+IAA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。     

激素TDZ对促进白菜下胚轴不定芽再生的效应分析

以华阳三号(HY)大白菜和苏州青(SZQ)小白菜下胚轴为外植体，MS为基本培养基，将TDZ与NAA配置不同激素浓度组合，观察TDZ对下胚轴不定芽再生的影响，并对各组合的培养效果进行了比较。结果表明，TDZ能较好地促进大白菜下胚轴不定芽再生，在MS 0．5mg／LTDZ 0．5mg／L NAA的培养条件下，HY的不定芽再生频率达到45％，且再生周期短，芽点多，再生芽正常，可以满足植物遗传转化需要。TDZ很难诱导SZQ小白菜下胚轴不定芽再生，只能诱导产生大量愈伤组织。     

小白菜再生培养基中适宜激素浓度的筛选

以子叶盘和下胚轴切段为外植体，研究了小白菜再生培养基中不同激素及其浓度水平对外植体产生愈伤、不定芽和根的影响。结果表明，小白菜子叶盘的再生频率较下胚轴的高。较适宜的愈伤组织诱导培养基为MSB 2，4-D0.1mg/L AgNO35.0mg/L，诱导频率为28.3％，较适宜的不定芽诱导培养基为NSB 6-BA4.0mg/L IAA0.1mg/L AgNO35.0mg/L，诱导频率为94.1％，较适宜的生根培养基为MSB IAA0.15mg/L，生根率为95.0％。     

甘蓝型油菜花茎高效再生体系研究

研究了甘蓝型油菜花茎外植体高效诱导不定芽的再生体系,结果表明:以含有2,4-D(0.5￣1.0mg/L)的培养基对外植体进行预培养,以及在分化培养基中加入AgNO3(2￣6mg/L),可显著降低外植体褐化坏死的频率,提高了不定芽的发生频率及其再生能力;6BA(2.5mg/L)与NAA(0.1mg/L)配合使用有利于提高不定芽发生频率;再生的不定芽90%可长根。     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用 9 个辣椒品种(Capsicum annuum L.)的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上,对苗龄、基因型、不同外植体、激素组合和 AgNO3等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明,苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响;AgNO3的加入可使芽分化率平均提高 20 %～30 %,并缩短外植体再生时间;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率的提高。通过结果比较,筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为 MB5+5 mg/L、6-BA+0.5 mg/L、IAA+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;芽伸长培养基为 MB5+3 mg/L、6-BA+1 mg/L、IAA+2 mg/L、GA3+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;生根培养基为 1/2 MS+0.2 mg/L、IAA+0.1 mg/L NAA。     

矮牵牛突变自交系离体培养及变异植株稳定性观察

以一个突变矮牵牛自交系离体根、叶与花瓣为外植体,实现了它们的离体再生.结果表明:在基本培养基Ms+0.1 mg/L NAA的基础上,根在添加浓度为3～4 mg/L的BA时,芽分化率可达84%以上;花瓣在添加2 mg/L的BA时分化率为92.5%;叶片在添加2～3 mg/L的BA时,分化率高达97%.并且在芽诱导中,伴随着一定数量的茎线形联合异常苗的产生,其特征在植株的生命周期里一直得以维持.     

影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究

以耐热大白菜42 号自交不亲和系的子叶为外植体,研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转CpTI基因的条件。含0.1 m g/LNAA, 1.0～2.0 m g/LCPPU, 5.0～10.0 m g/LAgNO3 的MS培养基较适合于大白菜42 号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体培养7 d 后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源IAA、ABA 含量分别比培养在不含激素的培养基上下降42.6% 、10.5% , 比培养在生根培养基上下降52.4% 、19.0% ; iPAs 含量、GA1 3 含量分别比培养在不含激素的培养基上上升510.9% 、143.9% ,比培养在生根培养基上上升860.5% 、558.3% 。头孢霉素抑制子叶再生不定芽,而羧苄青霉素则有促进作用。筛选转化体的适宜卡那霉素浓度为5～10 m g/L。     

长寿花叶盘离体培养及植株高效再生研究

以长寿花叶盘做为外植体进行再生体系的建立,通过一定的激素组合诱导,结果表明MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L组合愈伤组织诱导率可达86.6%,再生率达83.3%,外植体叶盘的摆放方式也对再生有显著影响,叶盘叶面向上放置,有利于其再生,反之不利于再生。加入AgNO3(4.0mg/L)溶液,对芽苗的分化有影响,再生苗开瓶练苗一周后容易生根,移苗入土后生长正常。     

二、四倍体不结球白菜子叶再生能力及其与内源激素的关系

以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜（Brassica campestris ssp．chinensis Makino）的子叶为外植体，正交设计筛选不定芽诱导优化培养基，测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA（吲哚-3-乙酸）和细胞分裂素ZR3（玉米素核苷类）的含量及ZRs／IAA比值大小，探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明：四倍体不定芽再生率变化范围是33．4％-83．3％，2个二倍体材料的最高再生率分别是33．3％和80．3％。四倍体白菜内源激素ZRs和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性，结果表明再生能力与ZRs／IAA比值显著相关，相关系数分别为0．9428和0．8857。     

辣椒离体再生体系研究

以5个辣椒(Capsicum annuum L．)品种(系)为材料,针对不同基因型、苗龄、外植体种类、激 素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了较为系统的研究,从“农城椒2号”、“农城椒3号”、 “0127”、“0159”、“0171”等5个辣椒品种(系)中筛选出“农城椒2号”、“0127”、“0171”3个再生能力 较强的基因型。确定了辣椒离体再生最适外植体为子叶,最适苗龄为12-14d。筛选出高效不定芽分 化培养基(MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 5．0mg/L BA 0．5-1．0mg/L IAA),其不定芽诱导率可达98％。诱导 出的不定芽转入MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 3．0mg/L BA 1．0mg/L IAA 2．0mg/L GA3 10．0mg/L AgNO3 芽伸长培养基,不定芽伸长率最高可达47．1％。不定芽伸长后在MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 0．2mg/L I- AA 0．1mg/L NAA生根培养基上诱导不定根。待其长成发达根系后移栽大田成苗,建立了辣椒高效 植株再生体系。