衡阳市植烟土壤中重金属含量及其污染评价

为探明衡阳市主要植烟区域土壤重金属含量及其污染风险,针对衡阳5大植烟区域进行多点采样,共采集土壤样品879份,分别检测了其重金属铅、镉、汞、砷、铬、镍含量,并分区域横向比较了各种重金属土壤样品超标率。结果表明,5个主要植烟区域土壤中重金属镉污染率最高而铅污染率最低,而汞、砷、铬、镍等重金属污染各植烟区变化较大,这表明衡阳烟区重金属铅污染风险很小而镉污染风险很大,此外,常宁、耒阳两市烟区土壤汞污染风险也较高,而砷、镉、镍等重金属污染各烟区均污染风险相对较小,部分地区甚至未检测到砷（衡阳县、祁东县）、铬（衡阳县、祁东县）、镍（衡阳县）污染。     

GICA-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒的新方法

菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物.为解决普通RT-PCR不能直接检测大豆病种子中该病毒的问题,将简便快速的胶体金免疫层析技术(GICA)和高灵敏度的普通RT-PCR检测技术有机地结合起来,建立了GICA-RT-PCR检测新方法.即先用GICA捕获病毒,将捕获的病毒直接进行RT-PER扩增,简化了检测的步骤,提高了检测的灵敏度.结果表明:用该方法检测提纯病毒灵敏度达到0.01μg·mL-1、检测大豆病叶和病大豆种皮,灵敏度达到10-4,分别比GICA检测提高了20倍、10倍和100倍.GICA-RT-PCR可进一步确认GICA的结果.     

氯化钙对花生中黄曲霉毒素B1提取及其快速检测结果的影响

本文以氯化钙为蛋白沉淀剂、黄曲霉毒素B1为靶标,探究了70%甲醇水（V/V）提取液中不同含量氯化钙对花生中黄曲霉毒素提取及其免疫检测结果的影响;采用样品加标回收的方法,研究比较了五种不同含量氯化钙对胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测结果的影响。研究结果表明,样品经含1% CaCl2 （m/V）的甲醇水处理后,用胶体金免疫层析试纸条检测时,试纸条T线颜色梯度变化,不同浓度加标回收率等参数均得到明显改善,前处理效果显著;选取20份花生实际样品,经过这种前处理之后,进行胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测,同时将其检测结果与免疫亲和层析高效液相色谱法（IAC-HPLC）进行比对,胶体金免疫层析试纸条与IAC-HPLC检测结果符合率为90%,间接竞争ELISA与IAC-HPLC检测结果相关性系数达0.996,表明本研究所改进的样品前处理方法能提高免疫检测准确度,具有很好的应用性。     

辣椒环斑病毒分子检测方法的建立及应用

辣椒环斑病毒（Chilli ringspot virus, ChiRSV）是2007年在辣椒上发现的病毒新种,是马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的确定种。笔者于2009年首次在海南黄灯笼辣椒上检测发现ChiRSV。根据ChiRSV保守区域设计和筛选PCR特异引物,优化退火温度,对PCR产物进行序列测定,建立了ChiRSV的RT-PCR检测方法。通过灵敏度测定,结果表明该方法最低可检出12.5 pg病毒RNA,灵敏度高。通过对来自海南田间的疑似辣椒病样的RT-PCR检测,证实了该方法有良好的反应特异性,亦表明ChiRSV可能已在海南扩散。     

菜豆荚斑驳病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析检测方法的建立

菜豆荚斑驳病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为了能在现场快速检测出该病毒,将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金层析方法快速简便、直观的优点结合起来,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测方法.该方法是用生物素标记上一个引物,用荧光素(或地高辛)标记上另一个引物,通过PCR扩增产生双标记的扩增产物.将兔抗生物素多克隆抗体与20～30 nm大小的胶体金颗粒结合上并固定在释放垫上,同时在硝酸纤维素层析膜上点上抗荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,点上羊抗兔多克隆抗体作为C质控点.这种RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到,同时C点也要显色.用所建立方法在15 min内可检测出菜豆荚斑驳病毒的RT-PCR扩增产物,免去了溴化乙锭染色和电泳的过程.     

马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立

马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明,当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、d NTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终,建立了一套通用RT-PCR检测体系,只需要变换每种病毒的引物,就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。     

洛阳市植烟土壤pH值与养分特征分析

为全面了解洛阳烟区植烟土壤的pH值和养分特征,于2008年对洛阳市植烟土壤进行了取样和检测.结果表明,洛阳烟区土壤pH值偏碱性;有机质、速效氮、速效钾含量较为适宜,速效磷平均含量适宜,但分布不均,其中速效磷含量小于10 mg/kg的样本占总数的42.02％;有效钙、镁、硫、锰、铜、锌含量较为丰富,但有效铁、钼、硼含量低.     

甘蔗黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测体系研究

甘蔗黄叶综合症(yellow leaf syndrome,YLS后称甘蔗黄叶病)是由甘蔗黄叶病毒(sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)引起的一种重要的甘蔗病害,为更快、更准确地检测ScYLV,合成了一对特异性引物s-pf和s-pr,建立了运用SYBR Green I荧光染料法检测ScYLV的实时荧光RT-PCR体系,并对该体系的特异性、灵敏性和适用性进行了测试。结果表明:该检测体系能特异地检出ScYLV,对测试的高粱花叶病毒不能检出,灵敏度比常规PCR高100倍,适用性广。实时荧光RT-PCR检测整个过程完全闭管,无需PCR后处理且SYBR Green I荧光染料成本较低,适用于检测甘蔗体内含量较低的ScYLV病毒。     

TaqMan-MGB荧光定量IC/TC-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒

菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)是我国重要的检疫性有害生物,BPMV传入的风险随大豆进境数量增多而加大。本文针对菜豆荚斑驳病毒,以大豆种子提取液为材料,分别建立了TaqMan-MGB荧光定量IC-RTPCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR快速检测方法。根据GenBank公布的BPMV外壳蛋白基因序列,选择其保守区域,设计1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,测定了TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR方法的特异性和灵敏度,并将TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR、TaqMan-MGB荧光定量TC-RTPCR、IC-RT-PCR和TC-RT-PCR 4种检测方法的灵敏度进行比较。结果表明:所建立的两种检测方法特异性良好;TCRT-PCR的灵敏度为10-1倍病毒提取液原液;IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR灵敏度相当,为10-3倍病毒提取液原液;TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR灵敏度最高,为10-5倍病毒提取液原液,是IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR检测方法的102倍,是TC-RT-PCR检测方法的104倍;两种检测方法均能较好应用于实际大豆样品的检测。本文所建立的TaqMan-MGB荧光定量IC/TC-RT-PCR检测方法利用抗原特异性或试管非特异性捕捉病毒粒子,无需提取RNA,为进境大豆种子上BPMV的检测提供了稳定、快速、简便的技术依据,其较高的灵敏度和特异性具有较好的应用价值。     

马铃薯病毒的常用检测方法

目前常用马铃薯病毒检测的方法,主要包括寄主生物学检测法、抗血清检测法、电子显微镜检测法、酶联免疫检测法和分子生物学检测法。重点讨论了分子生物学方法中的各种RT-PCR方法。同时对各种方法的优缺点进行了比较,并总结出将传统生物学检测技术、免疫学检测技术和分子生物学检测技术相结合必将成为检测植物病毒最经济有效的手段。     

云南省罗平烟区植烟土壤pH分布特征及其与土壤养分的相关性

采用传统统计学和地统计学方法分析了罗平烟区植烟土壤pH分布状况及其与土壤养分的相关关系。结果表明:(1)罗平烟区植烟土壤pH总体上适宜,平均值为6.55,变幅为4.16~8.06,处于烤烟生长适宜范围内(5.0~7.0)的样本占65.36%;(2)罗平烟区植烟土壤pH最适宜区域主要集中分布在西部和北部以及南部少数地域,偏碱性土壤主要集中分布在中部、东部和南部少数地区;(3)不同土壤类型pH高低顺序表现为:新积土黄壤水稻土红壤紫色土;不同前茬作物植烟土壤按其pH平均值顺序依次为:生姜油菜小麦空闲大麦绿肥;罗平烟区植烟土壤pH值随海拔升高,呈降低趋势;(4)罗平烟区植烟土壤有机质和全氮含量偏高,全钾含量偏低,其它养分含量适宜;土壤pH值与全氮、有效磷、速效钾、有效钙、有效镁、有效锌的含量呈极显著正相关,与有效铁、有效锰以及有效硫的含量呈极显著负相关,与水溶性氯离子含量呈显著正相关;(5)土壤pH分组后,全磷、有效磷、速效钾、有效钙、有效铁、有效硫含量在不同pH值分组中达到显著性差异,其它土壤养分差异不明显。     

永州植烟土壤有效微量元素分布状况及其聚类分析

2011年对永州市53个种烟乡镇的629个植烟土壤的微量元素有效养分进行了取样调查和统计分析,结果表明:永州烟区植烟土壤有效铜、铁、氯含量丰富,极少缺乏;土壤有效锌、钼、锰部分缺乏,应适当补充;95%以上的土壤有效硼处于缺乏状态,应大范围补充。聚类分析将永州烟区植烟土壤微量元素含量划分为4大特征区域,应根据土壤养分分布特征,合理施用微量元素肥料。     

永州植烟土壤中量元素分布特征与聚类分析

为探明永州烟区土壤中量元素分布特征,2015年对永州市79个种烟乡镇689个植烟土壤的钙、镁、硫元素有效养分进行了取样调查和统计分析。结果表明,烟区土壤有效硫、交换性钙含量丰富,极少缺乏;土壤交换性镁缺乏比例占72.4%,应重视镁肥施用。利用聚类分析方法将永州烟区植烟土壤中量元素含量划分为4大特征区域,应根据养分分布特征,合理施用中量元素肥料。     

湘西植烟土壤有效铁含量及变化规律研究

为探明湘西州植烟土壤有效铁含量的分布状况,检测了湘西州主要烟区488个土壤样本的有效铁含量,并采用传统统计学和地统计学方法分析了湘西州植烟土壤有效铁含量适宜样本分布、县域差异、土壤类型差异、海拔高度差异及空间分布。结果表明：①湘西州植烟土壤有效铁含量总体水平高,平均值83.20 mg/kg,变幅10.04～328.89 mg/kg,变异系数82.31%。②不同县之间的植烟土壤有效铁含量差异不显著,从大到小依次为：泸溪县、凤凰县、花垣县、古丈县、永顺县、龙山县、保靖县。③不同土壤类型土壤有效铁含量差异极显著,从高到低依次为：红灰土、石灰土、红壤、黄壤、水稻土、黄棕壤。④不同海拔高度的植烟土壤有效铁含量差异不显著,5个海拔高度组的植烟土壤有效铁含量平均为62.00～192.00 mg/kg。⑤植烟土壤有效铁含量Kriging插值图显示,湘西州植烟土壤有效铁含量总体上呈斑块状分布态势,以有效铁含量89.9～184.0 mg/kg为主要分布面积,主要分布在湘西州的南部和北部地区。     

马铃薯病毒分子检测技术研究进展

对种子、苗木和无性繁殖材料以及在发病早期对植株进行快速准确地检测尤为重要。目前国内外马铃薯病毒分子检测技术的研究,主要涉及以蛋白质和核酸为基础的检测方法。以蛋白质为基础的检测方法主要根据免疫学原理,包括酶联免疫吸附反应测定法、直接组织斑免疫测定法和胶体金免疫层析法。以核酸为基础衍生的检测方法较多,主要有RT-PCR检测技术、免疫捕捉-RT-PCR检测技术、核酸杂交检测技术、指示分子NAS-BA技术、实时荧光定量PCR技术和基因芯片技术。     

云南腾冲火山区域主要植烟区土壤养分状况分析

对云南腾冲火山区域主要植烟区的175个植烟土壤样品的主要养分状况进行了分析,结果表明:土壤养分总体水平较高,符合火山灰土基本特性;土壤样品pH值达植烟适宜标准的占总数的82.29％,有机质含量丰富,其中达一级标准的占总样品数的73.71％;土壤有效氮、有效钾含量丰富,有效磷相对缺乏,土壤有效镁分布不均匀,微量元素有效锌及有效硼缺乏,低于临界值.     

建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

建兰花叶病毒（Cymbidium mosaic virus,CyMV）是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。根据CyMV的外壳蛋白基因序列设计4对特异性引物,经过优化反应条件,建立该病毒的RT-LAMP 检测方法,并进行LAMP检测的特异性、敏感性检测。该方法能特异扩增CyMV,与其他4种病毒（齿兰环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒）不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致,检出率为60%。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CyMV,可省去电泳分析的时间。针对CyMV建立的RT-LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适用于在进境检疫及种苗繁育过程中的检测鉴定。     

湖南稻作烟区植烟土壤全氮分布特征及其主要影响因素

为明确湖南稻作烟区植烟土壤全氮含量和空间分布及主要影响因素,采用地统计学和分组回归方法研究了土壤全氮含量区域和空间分布及特征,并分析了土壤耕层厚度、海拔高度、土壤pH值和有机质含量对土壤全氮含量的影响。结果表明：湖南稻作烟区植烟土壤全氮含量丰富,其平均值为2.37 g/kg,变幅为0.62～5.26 g/kg,适宜样本(全氮含量为1.00～2.00 g/kg)占32.02%,有21个县区土壤全氮含量>2.00 g/kg,土壤全氮含量有从东南向西北递减的分布趋势。耕层厚度越深,土壤全氮含量越低;土壤全氮含量随海拔升高,达到峰值(高度为150～250 m)后下降;植烟土壤的全氮含量与土壤pH、有机质呈正相关。     

烟草重金属污染控制研究进展

阐述了烟草重金属污染元素,分析了土壤、大气、外源物等烟草重金属主要来源,以及影响烟草重金属吸收的土壤理化性状、品种类型、复合污染等因素,总结了选择植烟区域、改良植烟土壤、实施品种改良、规范农艺措施等综合控制技术措施,并对未来研究方向提出了建议。     

云南文山植烟土壤肥力Fuzzy综合评价

以云南省文山烟区7个县的167个植烟土壤样本的养分含量为分析数据,采用 Fuzzy 综合评判法对烟区土壤综合肥力水平进行评价。结果表明,文山烟区主要以红壤和黄壤两种类型为主,植烟土壤中二级肥力占总样本数比例为50.30％,土壤肥力较好。描述性统计分析和Fuzzy综合评判法均表明,棕壤土和水稻土的肥力最高,其IFI值分别为0.797和0.774,红壤和黄壤的土壤肥力中等,其IFI值分别为0.637和0.638,石质土的IFI值为0.584,属于三级肥力土壤,肥力相对较低。