| TaqMan-MGB荧光定量IC/TC-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒 |
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| 引用本文： | 蔡伟,金晶,沈建国,高芳銮,廖富荣,吴祖建.TaqMan-MGB荧光定量IC/TC-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒[J].大豆科学,2016(3):489-493. |
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| 作者姓名： | 蔡伟 金晶 沈建国 高芳銮 廖富荣 吴祖建 |
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| 作者单位： | 1. 福清出入境检验检疫局/福建省检验检疫技术研究重点实验室,福建福州350300;福建农林大学植物病毒研究所,福建福州350002;2. 福清出入境检验检疫局/福建省检验检疫技术研究重点实验室,福建福州,350300;3. 福建农林大学植物病毒研究所,福建福州,350002;4. 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心,福建厦门,361012 |
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| 基金项目： | 福州市科技计划项目(2013-N-54)，福建出入境检验检疫局科技项目(FK2011-07)，福建省杰出青年科学基金资助项目(2014J06008)，质检公益性行业科研专项项目(201410076). |
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| 摘 要： | 菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)是我国重要的检疫性有害生物,BPMV传入的风险随大豆进境数量增多而加大。本文针对菜豆荚斑驳病毒,以大豆种子提取液为材料,分别建立了TaqMan-MGB荧光定量IC-RTPCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR快速检测方法。根据GenBank公布的BPMV外壳蛋白基因序列,选择其保守区域,设计1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,测定了TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR方法的特异性和灵敏度,并将TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR、TaqMan-MGB荧光定量TC-RTPCR、IC-RT-PCR和TC-RT-PCR 4种检测方法的灵敏度进行比较。结果表明:所建立的两种检测方法特异性良好;TCRT-PCR的灵敏度为10-1倍病毒提取液原液;IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR灵敏度相当,为10-3倍病毒提取液原液;TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR灵敏度最高,为10-5倍病毒提取液原液,是IC-RT-PCR和TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR检测方法的102倍,是TC-RT-PCR检测方法的104倍;两种检测方法均能较好应用于实际大豆样品的检测。本文所建立的TaqMan-MGB荧光定量IC/TC-RT-PCR检测方法利用抗原特异性或试管非特异性捕捉病毒粒子,无需提取RNA,为进境大豆种子上BPMV的检测提供了稳定、快速、简便的技术依据,其较高的灵敏度和特异性具有较好的应用价值。
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| 关 键 词： | TaqMan-MGB荧光定量IC-RT-PCR TaqMan-MGB荧光定量TC-RT-PCR 菜豆荚斑驳病毒 检测 |
Detection of Bean Pod Mottle Virus by TaqMan-MGB Real-time IC/TC-RT-PCR |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TaqMan-MGB real-time IC-RT-PCR TaqMan-MGB real-time TC-RT-PCR Bean pod mottle virus (BPMV) Detection |
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