NDV HN蛋白的结构与功能

新城疫病毒 (ＮＤＶ)属副粘病毒科腮腺炎病毒属成员 ,为反义负链ＲＮＡ病毒。本病毒囊膜为双层类脂膜 ,膜表面的两个纤突糖蛋白负责介导病毒吸附侵入宿主细胞。病毒侵入宿主细胞需要经过两个步骤 :先由Ⅱ型糖蛋白粘附蛋白 (ＨＮ)特异识别细胞表面唾液酸受体、水解唾液酸。同时 ,激活Ⅰ型糖蛋白(Ｆ)促使细胞膜发生融合。ＨＮ蛋白在融合过程中起到促进Ｆ蛋白的融合作用。所有副粘病毒都具有Ⅱ型糖蛋白 ,具有血凝素和神经氨酸酶活性的称为ＨＮ ,在没有神经氨酸酶活性的病毒属中 ,如麻疹病毒属 ,则称为Ｈ。在肺病毒属中同源的附着蛋白无血凝素活…     

猪繁殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）M和N蛋白基因扩增与克隆

猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）Ｍ和Ｎ蛋白基因扩增与克隆蔡家利姜平简中友马志勇蔡宝祥（南京农业大学畜禽传染病研究室，南京２１００９５）ＡＭＰＬＩＦＩＣＡＴＩＯＮＡＮＤＣＬＯＮＩＮＧＯＦＭＡＮＤＮＰＲＯＴＥＩＮＧＥＮＥＯＦＰＯＲＣＩＮＥＲＥＰＲＯ...     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。     

新城疫病毒Ulster株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定

新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株经ＳＰＦ鸡胚增殖和超速离心纯化后，以酚－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，作为反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的模板。根据其已发表的Ｆ和ＨＮ基因核苷酸序列，合成一个长为３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于Ｆ基因内）和一对分别长为２８、３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于ＨＮ基因两侧）分别作为反转录引物和ＰＣＲ引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，出现一条长为１．９３ｋｂ的特异性条带，与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中，并经限制性核酸内切酶分析（ＲＥＡ）。ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＥＡ结果证实其为新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株的血凝素－神经氨酸酶基因。     

亲和层析法提纯鸡马立克病毒gB基因重组产物

应用针对鸡马立克病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）抗原单克隆抗体ＩＡＮ８６制备亲和层析柱，从感染重组杆状病毒（ｇＢ－ＡｃＮＰＶ）的昆虫细胞中提纯鸡ＭＤＶｇＢ基因重组产物，获得较好效果。提纯的蛋白质在ＳＤＳ－ｐＡＧＥ中出现的５条条带中有４条在免疫印迹试验中出现，其分子量为１００，６０，４９，４０ｋｄ占蛋白总量的５４．７％。试验证明用单克隆抗体亲和层析法提纯ＭＤＶｇＢ基因重组产物是一个行之有效的方法。     

应用酚－SDS法提纯新城疫病毒基因组RNA

应用酚－ＳＤＳ法提纯新城疫病毒基因组ＲＮＡ吴艳涛，刘秀梵，张如宽，刘伟忠（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）新城疫病毒（ＮＤＶ）属副粘病毒科，为有囊膜的单链、负极性ＲＮＡ病毒，基因组ＲＮＡ全长１５ｋｂ。开展ＮＤＶ分子生物学研究，首先需要提取完整...     

表达鸡新城疫病毒HN蛋白的生物学活性

以重组ＮＤＶ ＨＮ基因禽痘病毒为研究对象,观察重组病毒在鸡胚成纤维细胞上表达的动态变化,并对表达蛋白生物学活性进行了检测。结果表明：重组病毒感染鸡胚成纤维细胞１２ｈ即可检测到表达蛋白,７２ｈ左右表达量明显增多;利用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ可检测到６８ｋＤ和７４ｋＤ两种分子量的蛋白,与ＮＤＶ ＨＮ蛋白糖基化和非糖基化蛋白形式的分子量一致。     

不同组合复方BFA对雏鸡主要免疫器官发育,白细胞数及ND疫 …

选用１日龄尼克红蛋公雏８０５只（平均ＮＤ母原抗体水平为６．９１ｌｏｇ２）,随机分成７个组,在饲料中分别添加不同剂量的Ｚｎ,Ｓｅ,ＶＣ,ＶＥ,生化黄腐酸（ＢＦＡ）配合而成的复方生化黄腐酸（ＣｏＢＦＡ）,其中一组为对照。分别计数白细胞总数、嗜中性白细胞数和淋巴细胞总数,测定ＮＤ抗体效价;分离胸腺、脾脏和法氏囊,分别称重。分析比较各因素与雏鸡免疫器官（胸腺、脾脏和法氏囊）重量、血细胞数及ＮＤ疫苗免疫效果     

应用单抗ELISA试剂盒检测免疫鸡群新城疫强毒感染

新城疫（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅ,ＮＤ）是鸡的一种烈性病毒性传染病〔４〕。尽管国内外已知的新城疫病毒（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）毒株达数百种之多,毒力差异很大,但是其血清型只有一个。由于疫苗的广泛使用,从现场免疫鸡群...     

彩色蔬菜汁豆腐的研制

彩色蔬菜汁豆腐的研制安辛欣（南京农业大学农业与生命科学学院，南京２１００９５）ＡＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＣＯＬＯＵＲＦＵＬＶＥＧＥＴＡＢＬＥＪＵＩＣＥＢＥＡＮＣＵＲＤ￥ＡＮＸｉＮｘｉＮ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａ...     

沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位的定位

用淋巴细胞杂交瘤技术研制成４株沙门氏菌属特异单抗ＣＢ８，ｄｅ７，ｃｃ６，ＤＤ４，在免疫转印试验中，证实它们所识别的抗原表位位于鞭毛蛋白上，ＥＬＩＳＡ相加试验及竞争试验显示，ＣＢ８和ｃｃ６与ｄｅ７，ＤＤ４识别的抗原表位不同，表明鞭毛蛋白的属共同抗原具有多种表位的特性。用胰蛋白酶消化鞭毛蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果出现两条新带，分子量分别为４２０００（Ｆ４２），２７０００（Ｆ２７），长时间消化，最终只剩下Ｆ２７条带，它可抵制该酶的消化。对该酶切样品的免疫转印结果表明，沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位出现于Ｆ４２和Ｆ２７上，而相应的沙门氏菌分型Ｈ抗原单抗或因子血清识别的表位也在Ｆ４２和Ｆ２７上都得到了证实。这为沙门氏菌鞭毛蛋白抗原的多样性及结构和功能研究提供了证据。     

不同组合复方BFA对雏鸡主要免疫器官发育、白细胞数及ND疫苗免疫效果的影响

选用１日龄尼克红蛋公雏８０５只（平均Ｎ Ｄ母原抗体水平为６．９１ｌｏｇ２）,随机分成７个组,在饲料中分别添加不同剂量的Ｚｎ,Ｓｅ,ＶＣ,ＶＥ,生化黄腐酸（ＢＦＡ）配合而成的复方生化黄腐酸（ＣｏＢＦＡ）,其中一组为对照。分别计数白细胞总数、嗜中性白细胞数和淋巴细胞总数,测定ＮＤ抗体效价;分离胸腺、脾脏和法氏囊,分别称重。分析比较各因素与雏鸡免疫器官（胸腺、脾脏和法氏囊）重量、血细胞数及ＮＤ疫苗免疫效果的相关性,遴选最适组合。结果表明：雏鸡胸腺、脾脏、法氏囊重、血液白细胞总数、嗜中性白细胞数、淋巴细胞总数及ＮＤ抗体水平与Ｚｎ,Ｓｅ,ＶＣ,ＶＥ,ＢＦＡ均为正相关,其中胸腺与Ｚｎ,Ｓｅ极显著相关（Ｐ＜０．０１）,脾脏与Ｚｎ,Ｓｅ显著相关（Ｐ＜０．０５）,法氏囊与Ｓｅ显著相关（Ｐ＜０．０５）,淋巴细胞与ＶＣ极显著相关（Ｐ＜０．０１）,与ＶＥ,ＢＦＡ显著相关（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ抗体水平与Ｖｃ, ＶＥ, ＢＦＡ极显著相关（Ｐ＜ ０．０１）。综合分析各试验组合的效果,认为以添加量分别为Ｚｎ １２０ｍｇ· ｋｇ－１, Ｓｅ０．３０ｍｇ·ｋｇ－１,ＶＣ１８０ｍｇ· ｋｇ－１,ＶＥ ２００ｍｇ·ｋｇ－１,ＢＦＡ ４５０ｍｇ·ｋｇ－１的饲     

鸡新城疫高免蛋黄的研制

鸡新城疫高免蛋黄的研制戴鼎震，程太平，赵先铭（湖北农学院畜牧兽医系，江陵４３４１０３）鸡新城疫（ＮＤ），俗称鸡瘟，是一种由副粘病毒引起的鸡的急性、热性和败血性传染病。因该病首次发生在英国的新城，故名新城疫［１］。目前防制鸡新城疫主要依靠Ⅰ系苗、Ⅱ系苗...     

斑点免疫金渗滤法检测鸭肝炎病毒的研究

用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检测量为４．１２ｎｇ／点，其敏感性为抗原斑点试验（ＡＳＴ）的２倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明ＤＩＧＦＡ检测ＤＨＶ具有较高的特异性。对ＤＨＶ鸡胚尿囊液ＤＩＧＦＡ法检出率为１００％。ＤＩＧＦＡ和ＡＳＴ法对３６份临床样本检测阳性率分别为８３．３％和７５％，其阳性符合率为８６．７％。随机抽样的６份ＤＩＧＦＡ阳性肝脏样本经人工发病试验后电镜检查，均发现大量直径３０～４０ｎｍ的病毒粒子。实验结果表明，ＤＩＧＦＡ法是一种微量、敏感、特异、快速、简便的检测ＤＨＶ方法。     

表达MDV gB的重组FPV疫苗的免疫保护试验

表达ＭＤＶｇＢ的重组ＦＰＶ疫苗的免疫保护试验刘秀梵，王志亮，彭大新，张如宽（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）通过多步基因操作将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ｇＢ基因克隆进本室构建的中国鸡痘病毒（ＦＤＶ）疫苗株插入载体，其转染后筛选到高效表达ｇＢ的重...     

彩色投影片放大制作工艺

彩色投影片放大制作工艺ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＮＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＡＮＤＥＮＬＡＲＧＥＭＥＮＴＯＦＣＯＬＯＲＰＲＯＪＥＣＴＩＯＮ郭文星吴东醒（仲恺农业技术学院电教中心,广州５１０２２５）ＧｕｏＷｅｎｘｉｎｇＷｕＤｏｎｇｘｉｎｇ（ＺｈｏｎｇｋａｉＡｇｒ...     

彩色投影片放大制作工艺

彩色投影片放大制作工艺ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＮＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＡＮＤＥＮＬＡＲＧＥＭＥＮＴＯＦＣＯＬＯＲＰＲＯＪＥＣＴＩＯＮ郭文星吴东醒（仲恺农业技术学院电教中心,广州５１０２２５）ＧｕｏＷｅｎｘｉｎｇＷｕＤｏｎｇｘｉｎｇ（ＺｈｏｎｇｋａｉＡｇｒ...     

表达禽流感病毒凝素基因的重组禽痘病毒的构建

为构建表达禽流感病毒（ＡＩＶ）血凝素（ＨＡ）基因的重组禽痘病毒,将禽痘病毒启动子ＬＰ２ＥＰ２驱动的Ｈ７亚型ＡＩＶ ＨＡ基因ｃＤＮＡ和大肠杆菌ＬａｃＺ基因插入禽痘病毒疫苗株Ｆ－０１７的复制非必需区。经蓝班筛选后,对重组病毒又进行了３次蚀斑克隆。以不同代次重组禽痘病毒核酸为模板,利用Ｈ７亚型ＡＩＶ ＨＡ基因特异的引物进行聚合酶链式反应,均扩增出１条特异的１．７ｋｂ ＤＮＡ条带。收集不同代次的重组禽痘病毒细胞培养物进行免疫斑点试验,均检测到ＨＡ蛋白,表明Ｈ７ ＨＩＶ ＨＡ在重组禽痘病毒中获得了成功表达。该重组禽痘病毒的构建为ＡＩＶ病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。     

蓝靛果中黄酮类成分初探及总含量测定

蓝靛果中黄酮类成分初探及总含量测定李淑芹，李延冰，都昌杰（东北农业大学哈尔滨１５００３０）ＱＵＡＬＩＴＡＴＩＶＥＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＴＨＥＦＬＡＶＯＮＯＩＤＣＯＭＰＯＮＥＮＴＳＡＮＤＭＥＡＳＵＲＥＭＥＮＴＯＦＴＨＥＦＬＡＶＯＮＯＩＤＣＯＮＴＥＮＴＯＦ...     

美国饲料安全管理考察报告

２０００年４月２６日－５月 １２日，农业部畜牧兽医局饲料安全考察团对美国的饲料安全管理进行了较为系统的考察。考察团拜访了美国农业部动植物检疫局、食品药物管理局（ＦＤＡ）和ＣＯＣＨＲＡＮ基金会，访问了美国艾荷华州立大学、饲料工业协会（ＡＦＩＡ）、动物蛋白和油脂提炼者协会（ＮＲＡ），参观了美国国家兽医实验室、国家动物疾病研究中心（ＮＡＤＣ）、ＤＩＶＥＲＳＩＦＩＥＤ检测实验室、达尔令及贝克油脂提炼厂、普瑞纳饲料加工厂及罗氏制药公司。美国是世界第一饲料生产大国，１９９９年配合饲料总产量１．５亿吨，全美养…