牛口蹄疫二价苗不同免疫次数抗体效价对比分析

<正>牦牛在O型-亚洲Ⅰ型二价苗一免、二免(一免后一月)、三免(二免后6月)后,每月采样,采用液相阻断ELISA试验方法测定牛血清样品中O型-亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体水平,并计算免疫抗体的群体合格率。在30d时,O型口蹄疫免疫抗体群体合格率分别为76.7%、90%、100%;亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率分别为76.7%、85%、90%。60d时O型免疫抗体群体合格率降到72.5%、     

猪O型口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫抗体群体合格率比较

应用口蹄疫病毒VPl结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒测定沈阳地区4家规模猪场O型合成肽疫苗免疫后猪只血清样品的免疫抗体水平,计算群体合格率,并与O型口蹄疫浓缩灭活疫苗免疫后的群体合格率进行比较。结果表明,灭活苗一免、二免后28d免疫抗体群体合格率分别为47．5％、92．5％;合成肽疫苗一免、二免后28d免疫抗体群体合格率分别为92．5％、100％。     

O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态规律

为优化牛口蹄疫免疫程序,在抚顺市抚顺县和新宾县共选择4个规模化牛场,对犊牛进行O型口蹄疫母源抗体、免疫后抗体的动态监测。结果:母源抗体监测组,80日龄时抗体合格率为73.7%,90日龄时抗体合格率为65.8%;首免试验组,80日龄首免,免疫21、28、35 d后抗体合格率分别为98.8%、76.2%和61.3%;二免试验组,二免14、21、120、150 d后抗体平均合格率分别为80.0%、95.0%、70.0%和48.8%。结果表明,不同牛场犊牛O型口蹄疫母源抗体合格率变化存在差异,但是其变化趋势是一致的,犊牛O型口蹄疫母源抗体在80日龄时合格率降到临界保护线,选择该日龄进行O型口蹄疫首免为宜;首免产生的抗体维持时间较短,应在首免后28 d加强免疫;二免后,成牛可获得较为理想的免疫效果,免疫保护期达4个月左右。     

牛羊口蹄疫病毒O型亚洲Ⅰ型灭活疫苗不同免疫程序免疫抗体效价对比试验

对黄牛多次免疫接种牛羊口蹄疫O型亚洲1型灭活苗的抗体效价进行检测。结果表明,首免、二免、三免多次免疫牛羊口蹄疫O型亚洲1型灭活苗获得免疫效果和抗体水平依次不同。其中首免、二免的免疫抗体水平较低,免疫合格率为63%左右,三免的免疫抗体水平较高,免疫合格率达93.3%以上,免疫的整体水平达到国家规定要求。     

猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估

为了进一步了解猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700+2800+MM13)免疫效果,在吉林省选取2个规模化猪场共40头仔猪,观察注苗反应(包括过敏反应、精神状态、采食量等),并采用两种试剂盒进行抗体水平检测分析评估,掌握首免及二免后产生抗体的整体水平及合格率。结果显示,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后表现出良好的安全性,无免疫副反应;首免后30d O型及A型抗体合格率分别为100%、95%,二免后15d、45d抗体合格率均可达到100%,二免后90d、120d抗体合格率仍在95%以上。结果表明,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后能快速诱导产生高水平抗体,并且抗体持续时间长;同时也说明两种试剂盒可用于评价O型免疫抗体,而A型抗体有1种试剂盒不能用于评价,这可能与试剂盒包被的抗原类型有关。     

口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫羊后O型抗体水平的检测

为了探讨口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活苗免疫接种羊后产生的O型抗体效价,在肃州区银达镇和果园乡规模场、散养户采集羊血清,采用正向间接血凝试验进行O型口蹄疫疫苗免疫抗体水平的检测。结果显示,规模场免疫抗体合格率平均为86.11%,散养户免疫抗体合格率平均为72%,个别散养户抗体只有40%。两个乡镇的规模场均较散养户免疫效果好,而且成年羊抗体明显高于羔羊,说明首免不能产生有效的保护抗体水平,只有二次加强免疫,抗体效价才能达到保护水平。     

猪圆环病毒2型自然感染条件下的猪口蹄疫免疫效果调查

本研究对猪圆环病毒2型自然感染风险条件下的10窝98头仔猪随机分成口蹄疫常规和倍量2个免疫剂量组,另选5头成年母猪作为圆环感染阴性对照,仔猪于35日龄和65日龄进行猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫,并于首免前的28日龄、首免后21 d和二免后的29 d采血,5头成年母猪同期进行采血,分别进行PCV-2核酸、抗体和猪口蹄疫O型ELISA抗体检测。结果显示,成年母猪PCV-2核酸均为阴性,口蹄疫免疫抗体水平均达到≥1:128;2组仔猪首免后21 d和二免后29 d检测存在不同比率的PCV-2核酸阳性和抗体阳性,猪口蹄疫抗体合格率分别为69%、97.5%和13.8%、25%,提示断奶仔猪可能因感染PCV-2而影响了猪口蹄疫免疫效果。     

哈尔滨地区牛、羊O型和亚洲1型口蹄疫免疫效果监测报告

本文通过对哈尔滨市重点养殖地区牛、羊O型和亚洲1型的抗体监测,基本掌握了哈尔滨市牛、羊等牲畜口蹄疫疫苗的免疫抗体消长规律。哈尔滨地区牛、羊口蹄疫双价疫苗免疫后产生免疫保护的时间平均为25～30d,畜群免疫抗体合格率平均可达63.4%以上;免疫保护期平均为3～4个月。畜群有效免疫抗体合格率平均可达72.3%以上,其中以双城市奶牛群的有效免疫抗体合格率为最高,平均可达到81.6%。畜群免疫后5～6个月免疫抗体合格率平均仅为46.7%,失去疫苗保护作用。同时,哈尔滨地区牛、羊的亚洲1型口蹄疫有效免疫抗体平均合格率比O型口蹄疫高出7个百分点以上。     

陈旗巴镇地区牛两次免疫亚洲1型口蹄疫疫苗效果检测报告

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。以传播迅速、感染率高为特点,国际动物卫生组织将其列为18个A类传染病之首。为及时监测免疫效果,确保牲畜安全,在陈旗巴镇地区9800头牛免疫口蹄疫疫苗1个月后,3月末我站对镇区6个居委的牛抽样采血100份,进行亚洲1型口蹄疫疫苗免疫抗体监测。检测结果显示巴镇地区牛使用口蹄疫O型-亚洲1型二价灭活疫苗一个月后免疫抗体合格率仅为57%。鉴于巴镇地区牛口蹄疫免疫抗体较低,4月份对镇区牛进行口蹄疫亚1单价疫苗免疫注射。5月份再次对镇区6个居委会牛抽样采血120份,进行亚洲1型口蹄疫疫苗免…     

猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫合成肽疫苗与猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫30-40日龄商品猪,免疫采用正向间接血凝试验、液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14d、28d、35d、42d、56d及二次免疫后7d、14d、28d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%-100%。与注射高效灭活苗组比较表明:合成肽疫苗临床使用的安全性较高,免疫抗体合格率明显优于猪O型口蹄疫高效灭活苗。     

规模奶牛场O型口蹄疫疫苗抗体消长规律研究

[目的]通过免疫抗体监测,掌握其在奶牛体内消长规律;建立适合本区奶牛口蹄疫疫苗常规免疫程序,提高有效免疫保护;探索延平区内两个常用口蹄疫疫苗的抗体产生时间和免疫抗体持续时间,为有效科学免疫,预防口蹄疫疫情提供科学依据。[方法]血样采集使用一次性真空采血管,抗体检测采用液相阻断ELISA检测方法,抗体效价判定依据畜牧兽医主管部门动物疫病监测方案。[试验对象]选择福建省南平市延平区两个分别常年免疫政府采购疫苗（中牧实业）、自行采购疫苗（内蒙金宇）的A、B规模化牛场,各选取一定数量的初生犊牛（犊牛20 头及对应母牛20 头）。[结果]A场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达100%,第四周达到峰值后开始下降,至12周抗体合格率降至50%,确定首免时间为犊牛出生后12 周,首免后第6周抗体合格率降至55%,确定二免时间为首免后第6周;B场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达95%,第四周达到峰值后开始下降,至9周抗体合格率降至55%,确定首免时间为犊牛出生后9 周,首免后第3周抗体合格率降至28%,确定二免时间为首免后第3周。[结论]根据监测试验结果,A场的免疫程序设计为犊牛出生后12 周开始首免,首免后第6周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次;B场的免疫程序设计为犊牛出生后9 周开始首免,首免后第3 周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次。     

口蹄疫灭活疫苗的免疫效果及其对鉴别诊断的干扰

灭活疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,但是灭活疫苗的免疫效果及其对感染与免疫鉴别诊断的干扰一直是口蹄疫免疫无疫区建设评估需要明确的重要问题。本研究中选择了3个企业（代号A、B与C）的4组口蹄疫O型与A型二价灭活疫苗,分别免疫口蹄疫抗体阴性健康未成年牛,免疫3～4次,测定免疫前后结构蛋白和非结构蛋白抗体的应答水平。结果显示：（1）结构蛋白抗体合格率：a1组（A企业多批次疫苗）4次免疫后O型和A型均为100%;a2组（A企业同批次疫苗）一~三免O型为36.7%、98.3%与100%,A型为15%、86.7%与100%;b组（B企业疫苗）一~三免O型为18.3%、97%与100%,A型为1.7%、45%与53.3%;c组（C企业疫苗）一~三免O型为26.7%、96.7%与100%,A型为21.7%、71.7%与100%。（2）非结构蛋白3ABC抗体阳性率（两种方法复核结果）：a1组一~四免分别为0.7%、1.4%、9.5%与4.8%;a2组和c组三次免疫均未检测到阳性;b组仅三免后阳性率为0.6%。3组灭活疫苗首次免疫牛的抗体合格率远不及70%,但加强免疫后抗体合格率均显著提高;非结构蛋白抗体检测结果表明有3组疫苗的抗原纯净度符合OIE的要求,但a1组灭活疫苗免疫后,仍然对感染与免疫鉴别诊断存在干扰;采用两种非结构蛋白抗体检测方法进行复核检验,可以提高感染与免疫鉴别诊断的准确性。本研究为口蹄疫免疫无疫评价方案的制定提供了科学依据。     

Immune Effect of Inactivated Vaccines against Foot-and-Mouth Disease and Their Interference on Differential Diagnosis

Vaccination with inactivated vaccine is an important measure to prevent and control foot-and-mouth disease (FMD), however, the immune effect and antigenic purity of inactivated vaccines are two major concerns for the establishment and evaluation of FMD free zones with vaccination. In this study, four groups of FMD type O and type A bivalent inactivated vaccines from 3 FMD vaccine manufacturers (designated as A, B and C) were selected to inoculate healthy juvenile cattle of FMD free. All cattle were immunized 3 or 4 times at a 1-month interval. Serum samples were collected before and after 1 month of every vaccination to determine the level of antibody to structural protein and non-structural protein. Results：(1) The qualified rates of antibody to structural protein: in group a1 (vaccine from company A, different batches), the antibody qualified rate could reach 100% for type O and type A, respectively after each vaccination. In group a2 (vaccines from company A, same batch), the antibody qualified rates were 36.7%, 98.3% and 100% for type O, and 15%, 86.7% and 100% for type A after the first to the third vaccination, respectively. In group b (vaccine from company B, same batch), the antibody qualified rates were 18.3%, 97% and 100% for type O, and 1.7%, 45% and 53.3% for type A after the first to the third vaccination, respectively. In group c (vaccines from company C, same batch), the antibody qualified rates were 26.7%, 96.7% and 100% for type O, and 21.7%, 71.7% and 100% for type A after the first to the third vaccination, respectively. (2) Antibody positive rate to non-structural protein 3ABC (confirmed with second ELISA test): In group a1, the positive rates were 0.7%, 1.4%, 9.5% and 4.8% after the first to the fourth vaccination, respectively; In group a2 and c, no 3ABC antibody-positive animal was detected after 3 repeated vaccination; In Group b, only one animal with a positive rate of 0.6% was detected after the third vaccination. The antibody qualified rates to the structural protein of FMDV in 3 of the 4 groups were far less than 70% after the primary vaccination, however, those were increased significantly after boost and repeated vaccination. The antigen purity of vaccines in three groups (a2, b and c) can meet the requirement of OIE standard on the FMD vaccine, however, the seroconversion to 3ABC antibody was obvious in animals from group a1 after repeated vaccination, which would cause some extent of interference to differential diagnosis. Also, a combination of a primary screening test and a confirmatory ELISA test can further improve the accuracy of differential diagnosis. This study provides an important scientific basis to make a rational program for establishment and evaluation of FMD free zone with vaccination.     

牛用口蹄疫AsiaI—O型双价灭活苗与猪用口蹄疫O型灭活苗对猪的免疫效果比较试验

使用牛用口蹄疫AsiaI-O型双价灭活苗与猪用口蹄疫O型灭活苗分别接种50d商品猪和怀孕90d种猪,免疫前和免疫后的3w及7w进行抗体水平检测。O型口蹄疫采用正向间接血凝试验、AsiaI型口蹄疫采用液相阻断ELISA检测。同时对接种猪进行免疫应激观察。结果显示：猪使用牛用口蹄疫AsiaI—O型双价灭活苗3w后口蹄疫AsiaI的抗体水平十分低,最高只有5％,口蹄疫O型抗体合格率在35％以上;而注射猪用口蹄疫O型灭活苗的O型抗体水平合格率只有35％。而牛用口蹄疫AsiaI-O型双价灭活苗两次接种后,AsiaI和O型抗体水平均达到大于70％的要求。     

磷酸钙作为O型口蹄疫多肽疫苗佐剂的研究

为了探索磷酸钙(calcium phosphate,CaP)作为多肽疫苗佐剂的可行性,本研究以O型口蹄疫多肽疫苗为抗原,采用共沉淀法制备CaP-多肽复合物,测定包封率。将制备好的疫苗,分别在0、14、28 d腹腔注射免疫Wistar大鼠,尾静脉采血检测口蹄疫抗体水平。结果显示,CaP可包裹一定量的O型口蹄疫多肽,包封率达到50%,免疫大鼠后油佐剂组抗体效价在14 d达到26,42 d增至210并可维持35~42 d;CaP组在21 d后陆续产生抗体,抗体水平较油佐剂低,为27~28。结果表明,CaP作为佐剂相对游离多肽可以提高O型口蹄疫多肽疫苗免疫效果,但抗体水平相对油佐剂低。     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对1日龄中等母源抗体水平雏鸡免疫效果的研究

将鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和BX株活疫苗分别免疫1日龄中等母源抗体水平京红雏鸡,同时免疫1日龄SPF雏鸡作对照,免疫后第9天观察法氏囊病变,免疫后第28天采血测定IBDV中和抗体,并用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果显示,免疫后第9天,免疫复合物疫苗组SPF雏鸡和京红雏鸡法氏囊均正常,BX株活疫苗组SPF雏鸡法氏囊出现了萎缩病变;免疫后第28天,对照SPF雏鸡和京红雏鸡的免疫复合物疫苗组、BX活疫苗组IBDV中和抗体效价分别为9.2log2、8.5log2和 7.2log2、4.4log2,攻毒保护率均为100%。试验结果表明免疫复合物疫苗免疫1日龄中等水平母源抗体雏鸡效果很好,能产生较高的中和抗体,攻毒保护率能达到100%。     

Study on the Immunity Effect of Infectious Bursal Disease Immune Complex Vaccine on One-day Old Moderate Maternal Antibody Chick

One-day-old moderate maternal antibody Jinghong chickens and SPF chickens were vaccinated with infectious bursal disease (IBD) immune complex (IC) vaccine and BX strain live vaccine,respectively,pathological changes of bursa of fabricius in chickens were observed at the 9th day after immunization.On the 28th day after immunization,blood samples were taken and the IBDV neutralizing antibody were tested,meanwhile experimental chickens were challenged with high virulent IBDV,the protective rates of experimental groups were calculated.The results showed that at the 9th day after immunization,the bursa of fabricius in SPF and Jinghong chickens were normal in IC vaccine group,however atrophic changes of bursa of fabricius in BX strain live vaccine group were shown.At the 28th day after immunization,the IBDV neutralizing antibody of IC vaccine group and BX strain live vaccine group in SPF and Jinghong chickens were 9.2log2,8.5log2,7.2log2 and 4.4log2,respectively,while 100% protection rates were provided.The results provided that IC vaccine had better immunity effect on one-day-old moderate maternal antibody chicken,high levels of neutralizing antibodies against IBDV were produced and protection rates were 100%.     

小反刍兽疫活疫苗二次免疫效果评价

为研究已免疫小反刍兽疫(PPR)活疫苗的羊群经二次免疫后PPR抗体水平的变化趋势,对初免21 d羊群进行了第二次免疫,同时监测初免21 d及二免后3 d、7 d、14 d、21 d的血清中和抗体。结果显示,一次免疫羊21 d PPR中和抗体滴度平均可达5.18±2.87,阳性率为84%;二次免疫后3 d、7 d、14 d、21 d,PPR抗体呈上升趋势,平均滴度分别为5.65±2.56、6.95±1.82、7.28±1.18、8.12±1.31,阳性率分别为90%、100%、100%、100%。一免试验组21 d~323 d PPR抗体阳性率为83%,二免试验组在二次免疫7 d PPR抗体阳性率达到100%,并且维持到21 d。试验表明,活疫苗二次免疫增强了免疫效果,对已经有PPR抗体的羊进行二次免疫,可明显提升免疫抗体阳性率。     

间接血凝试验在家畜口蹄疫免疫抗体检测中的应用

为了节省IHA（间接血凝试验）血凝抗原,扩大家畜O型口蹄疫免疫抗体检测数量,在不影响检测效果（合格率）的基础上,探索和改进原正向间接血凝试验检测方法。试验分别用口蹄疫O型-Asia 1型二价灭活苗和猪O型口蹄疫苗对天水地区几个养殖场的家畜进行了免疫注射,免疫后（牛免疫21 d、猪免疫28 d）随机抽样采血,常规分离血清,采用简化后的正向间接血凝试验进行牛和猪口蹄疫O型免疫抗体检测试验。结果表明：免疫合格率分别达到97.5%和92.5%;改进后的IHA既加快了操作速度、节省诊断抗原,又降低了检测成本。在家畜O型口蹄疫检测工作中具有推广应用价值。     

江门市规模化奶牛场2018—2019年O型、A型和亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体监测结果分析

[目的]为了解江门市规模奶牛场口蹄疫免疫情况,有针对性开展防控。[方法]在2个规模奶牛场中随机监督采集奶牛血清进行检测,根据国标用ELISA法检测O型口蹄疫抗体,用液相阻断ELISA法检测A型和亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体。[结果]240份样品中O型、A型和亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体合格率依次为99.6%(239/240),92.9%(223/240),81.7%(196/240),差异显著(P<0.01);但A场2019年亚洲Ⅰ型合格率仅65.0%(39/60),未达农业农村部规定的70%标准,以及B场2018年亚洲Ⅰ型合格率仅71.7%(43/60);其他项目合格率均在80%以上。[结论]江门市规模奶牛场口蹄疫总体免疫效果较好,奶牛群能得到有效保护,但亚洲Ⅰ型合格率相对偏低,相应场应加强免疫和检测。