基于高效液相色谱法的金银花指纹图谱研究

【目的】旨在建立金银花高效液相色谱指纹图谱方法，并将其应用于不同批次的金银花样品检测。【方法】色谱条件：YMC-Pack ODS-A C₁₈(150 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱，流动相为0.6%乙酸(0～30 min, 92%～72%)和乙腈(0～30 min, 8%～28%),梯度洗脱，检测波长330 nm;流速1.0 mL/min;色谱柱温度25℃。方法学考察合格后，检测14批金银花样品，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立指纹图谱，进行相似度评价。用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。【结果】建立金银花的高效液相色谱指纹图谱，14批金银花样品的相似度在0.971～1.000之间，共标定出11个共有峰。通过对照品指认其中的8个，分别为异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁和木犀草苷。14批金银花共有峰峰面积占总峰面积的平均值为96.31%,RSD为0.47%。聚类分析将14批金银花样品分为4个，但主成分分析后缩减为3个，其中主成分1包括异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和2个未知成...     

金银花药材的HPLC指纹图谱及绿原酸、木犀草苷含量的同时测定

【目的】建立金银花药材的HPLC指纹图谱,并同时测定不同产地商品中绿原酸和木犀草苷的含量,全面评价金银花药材质量。【方法】采用Aglient TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱。采用梯度洗脱,流动相A为1%HAC,流动相B为乙腈,洗脱程序为:0~5min,A为95%→92%;5~7min,A为92%→87%;7~28min,A为87→85%;28~38min,A为85→84%;38~43min,A为84→82%;43~53min,A为82→72%;53~63min,A为72→50%;63~65min,A为50→5%;75min,A为5%。流速为0.8mL/min;检测波长250nm;柱温30℃。指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"进行处理分析。【结果】在指纹图谱研究中,标定了15个共有峰,建立了对照指纹图谱,10批药材与共有模式之间相似性良好,相似度均在0.9以上;在所建立的分析条件下,绿原酸、木犀草苷均达到了基线分离,且两者在线性范围内线性关系良好,两种成分的加样回收率分别为99.2%、99.4%。【结论】本法灵敏、准确、简便,可用于金银花药材的综合质量评价。     

泾渭茯茶化学成分HPLC指纹图谱的研究

【目的】采用高效液相色谱法(HPLC)建立泾渭茯茶化学成分的指纹图谱,以描述泾渭茯茶化学成分的整体特性。【方法】利用HPLC法分析26个泾渭茯茶样品的主要化学成分,通过化学对照品,结合HPLC-MS多级质谱裂解规律,指认泾渭茯茶指纹图谱的主要色谱峰。以乙腈-0.4%(体积分数)甲酸水溶液为梯度洗脱系统,在检测波长320nm、柱温30℃、流速1mL/min条件下,建立泾渭茯茶主要化学成分的指纹图谱。采用中药指纹图谱相似度软件,对泾渭茯茶HPLC指纹图谱进行相似度分析,获取各样品与对照指纹图谱的相似度。【结果】与对照指纹图谱相比,26个不同类型和批次的泾渭茯茶指纹图谱相似度为0.81~0.94,其中共有峰15个。经过HPLC-MS分析,主要的共有峰分别鉴定为没食子酸、可可碱、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、普洱茶素、表儿茶素没食子酸酯和槲皮素。【结论】26个批次的泾渭茯茶样品指纹图谱相似度较高。     

金银花药材等级质量标准的划分

为更好地控制金银花质量,采集河南封丘、山东平邑和河北巨鹿金银花道地产区样品34份,检测绿原酸、木犀草苷、总灰分、酸不溶性灰分、水分等指标,采用SPSS 19.0统计分析软件对上述指标进行相关性分析,并对主要药效成分绿原酸、木犀草苷含量进行系统聚类分析和K-聚类分析。结果表明:金银花药材质量可划分为4个等级,一等金银花色泽为绿色,绿原酸≥2.89%,木犀草苷≥0.078%,总灰分≤5.37%,酸不溶性灰分≤0.390%,水分≤4.72%;二等金银花色泽为黄绿色,绿原酸≥2.53%,木犀草苷≥0.072%,总灰分≤6.86%,酸不溶性灰分≤0.789%,水分≤6.34%;三等金银花色泽为黄色,绿原酸≥1.98%,木犀草苷≥0.068%,总灰分≤7.72%,酸不溶性灰分≤1.464%,水分≤7.90%;四等金银花色泽为浅黄少白,绿原酸≥1.51%,木犀草苷≥0.052%,总灰分≤9.29%,酸不溶性灰分≤3.000%,水分≤9.51%。     

10批金银花有效成分的高效液相色谱测定

【目的】用高效液相色谱建立金银花中有效成分含量的检测方法。【方法】采用梯度洗脱方法,对金银花75%甲醇提取液中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁和木犀草苷8种成分的含量进行研究。【结果】8种成分在各自范围内线性关系均良好(R²>0.999 0);平均回收率为98.98%～102.84%(n=6);相对标准偏差为0.90%～4.11%。10批金银花样品均表现为绿原酸含量最高,含量为26.93～31.90 mg/g,且8种成分含量的RSD均符合标准。【结论】该方法简单稳定,适合金银花中有效成分的定量测定。     

浙江产金银花的调查与评估

对原产乐清、永嘉以及文成引种的"金银花"进行原植物鉴定,并利用HPLC法对样品绿原酸和木犀草苷含量进行检测。结果表明,原产乐清的"金银花"为灰毡毛忍冬(Lonicera macreanthoides Hand.-Mazz.),产于永嘉的为红腺忍冬(L.hypoglauca Miq.),文成引种的为忍冬(L.japonica Thunb.)。忍冬样品花与花蕾绿原酸和木犀草苷含量均符合2005版《中国药典》金银花项下规定,其中文成引种栽培金银花花中绿原酸和木犀草苷含量分别达到3.42%和0.21%。产于乐清、永嘉的灰毡毛忍冬、红腺忍冬样品中绿原酸含量也符合2005版《中国药典》山银花项下规定。资源调查结果表明:原产乐清、永嘉的"金银花"实属山银花,文成引种的为正品金银花。     

广西产罗汉松叶指纹图谱研究

【目的】以广西产罗汉松［Podocarpus macrophyllus（Thunb.）D.Don］的叶为研究对象,建立高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,为罗汉松叶的质量评价提供参考依据。【方法】利用HPLC对广西产罗汉松叶进行指纹图谱研究,建立共有模式,并进行方法学考察,使用相似度评价系统对10批不同产地罗汉松叶的共有峰进行确认,对其相似度进行评价;使用SPSS 21.0,以共有峰原始峰面积数据进行聚类分析。【结果】方法学考察结果中,精密度试验主要共有峰的相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差（RSD）均小于3%;稳定性试验相对峰面积的RSD均小于3%,表明样品提取液在24 h内较稳定;重复性试验所有色谱峰的相对保留时间的RSD均小于2%;建立罗汉松叶的指纹图谱,10批不同产地罗汉松叶初步建立其共有模式,标定了22个共有峰,样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度都在0.900以上,相似性良好。在10批罗汉松叶药材的指纹图谱中,共有峰的相对保留时间无明显差异。10批罗汉松叶样品可分为3类:S4为第1类;S3、S2和S1为第2类;S5、S6、S7、S8、S9和S10为第3类。【结论】建立的罗汉松叶指纹图谱特征性强,准确可靠,可为罗汉松叶的质量评价提供参考依据。     

“华金6号”金银花新品种药材适宜采收期研究

【目的】探讨确定"华金6号"金银花新品种药材适宜采收期。【方法】采集三青期、二白期及大白期后不同时间内的花蕾,用游标卡尺和电子天平测定花蕾的长度、最粗处直径、干重等指标;HPLC法测定绿原酸及木犀草苷含量。【结果】在三青期至大白期,花蕾外观性状变化明显且呈上升趋势,花蕾长度、直径及干重分别由0.17cm、2.05cm、0.19g上升至0.24cm、2.80cm、0.25g,大白期后第2天至第11天,三者均趋于稳定;在三青期至大白期,绿原酸含量由33.59mg/g下降至24.32mg/g,木犀草苷含量由0.55mg/g上升至0.95mg/g,大白期后第2天至第11天,绿原酸含量呈缓慢下降趋势,最低至17.73mg/g,但木犀草苷含量持续上升,最高至1.93mg/g。【结论】"华金6号"金银花在整个大白期内,花蕾干重,绿原酸、木犀草苷含量均相对稳定,考虑到花蕾发育的一致性及药材外观性状,本研究认为"华金6号"金银花在整个大白期内均可采摘。     

人工栽培铁皮石斛及其市售干品品质比较与HPLC指纹图谱分析

比较不同产地铁皮石斛品质差异,建立HPLC指纹图谱,对其质量控制提供参考。以29份来自云南、浙江、湖南、广西和广东不同栽培产地的铁皮石斛(25份鲜条、4份市售干条和枫斗)为试材,比较了其多糖和醇溶性浸出物含量,并利用HPLC法建立了铁皮石斛指纹图谱。结果表明,样品间多糖含量和醇溶性浸出物含量差异显著,有1份样品的多糖含量和4份样品的醇溶性浸出物含量未达到中国药典的标准。HPLC指纹图谱分析发现29份样品共有13个共有峰,除1份云南样品与对照图谱的相似度为0.676外,其余样品与对照图谱相似度均在0.751~0.934。依据共有峰峰面积聚类分析发现仅少数来源地相近的铁皮石斛样品能优先聚类,而多糖含量、醇溶性浸出物含量与相似度间并没有明显的相关性。不同产地的人工栽培铁皮石斛及其市售干品品质差异较大,铁皮石斛HPLC指纹图谱含13个共有峰,利用该图谱可以对铁皮石斛进行质量评价。     

不同品系金银花质量评价

[目的]评价不同品系金银花药材质量。[方法]采用HPLC和紫外分光光度法测定相同产地5个不同品系金银花药材成分绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草素和总黄酮的含量,采用方差分析、相关性及主成分分析方法对5个品系金银花成分间的差异及相关性进行评价。[结果]相关性分析中,绿原酸与木犀草苷,异绿原酸A与异绿原酸C,异绿原酸A和异绿原酸C与总黄酮均呈现显著正相关,相关系数分别为0.648、0.833、0.690和0.636;异绿原酸A和异绿原酸C与木犀草素,芦丁和木犀草素与总黄酮均呈显著负相关,其相关系数分别为-0.081、-0.688、-0.476和-0.595。主成分分析综合评价中豫金2号(YJE)金银花评分较高,其次为豫封3号(YFS)金银花,评分中排序最低的为由山东引种的北花1号(BHYH)金银花。[结论]通过对5个品系金银花药材内在成分进行评价,为金银花药材质量的评价、指导金银花规范化种植及新品系的选育提供理论依据。     

龙岩市金银花产业化开发探讨

金银花是具有保健、药用、观赏及生态等多种功能的药食同源的经济植物,为我国重要的名贵中药材之一。近年来,金银花的新产品不断开发上市,开发前景看好。本文介绍了金银花的特征特性,阐述了金银花的开发利用前景和产业发展的关键技术,分析了龙岩市金银花产业化开发的有利条件和发展优势,提出了金银花产业化开发思路及发展重点。     

湛江金银花内生真菌多样性研究

为了解湛江金银花内生真菌的多样性,比较分析不同地区金银花真菌种类差异.采用真菌形态鉴定同时结合真菌ITS序列方法对金银花内生真菌的多样性进行研究.结果从湛江金银花分离鉴定了内生真菌17株,分别属于9个属17个种,其中拟盘多毛孢属Pestalotiopsis为优势属,占分离总株数的29.41％,叶部分离的主要是木霉属Trichoderma和拟茎点霉属Phomopsis,茎部分离的是镰刀菌属Fusarium,花部分离得到的主要是拟盘多毛孢属Pestalotiopsis.不同组织部位的湛江金银花内生真菌在数量和种群组成中存在差异,表现出较丰富的多样性.     

银杏叶金银花保健饮料加工工艺

对银杏叶金银花饮料的生产工艺流程、技术操作要点进行了研究,对该饮料的苦涩味抑制问题以及分层等问题进行了讨论,提出了较为适合的银杏叶金银花饮料加工工艺.     

电感耦合等离子发射光谱法测定金银花中微量元素

采用电感耦合等离子发射光谱法(ICP-AES法)测定了金银花不同器官中的微量元素,结果表明:当消解液为HNO3,HCIO4=5:1(V:V)时金银花中各种微量元素有均较高的检测灵敏度,其花中的Ca、Cd、Co、Cu、Fe、Mn、Ni、Sr、Zn含量分别为1.5154、0.0147、0.0056、0.0753、0.7471、0.0341、0.036、0.0293和0.2045 mg/g,枝中的含量分别为8.6776、0.0227、0.0011、0.0569、0.5881、0.0698、0.0344、0.1166和0.1145 mg/g,叶中的含量分别为3.7197、0.0202、0.0048、0.0767、1.7614、0.0546、0.0637、0.0512和0.102 mg/g;样品中9种元素的线性范围在0～8 mg/L,相对标准偏差均小于5.0%,回收率在97.40%～102.50%之间.说明ICP-AES法测定微量元素.具有快速、准确、线性范围宽等优点.     

安徽省金银花害虫种类调查及防治技术

于2008—2010年对安徽省金银花害虫种类及危害情况进行调查,发现危害金银花的害虫共有9目35科58种,主要是金银花尺蠖、点玄灰蝶、黄足黑守瓜、胡萝卜微管蚜、中华忍冬圆尾蚜、金银花叶蜂等。对防治金银花害虫提出加强栽培管理、选择抗虫品种、加强引种检疫、建立无虫苗圃、做好预测预报、保护和利用天敌、筛选低毒无公害农药等措施。     

赤霉素对金银花成花过程的调控

为了给金银花(Lonicera japonicaThunb.)栽培管理提供科学依据,试验分别研究了质量浓度为0(对照),100,300,500和1000 mg/kg赤霉素对金银花花期、单株产量及品质的影响。结果表明,与对照相比,在金银花叶片完全展开且花芽分化前喷施100~1 000 mg/kg赤霉素,可以使金银花的始花期提前4~6 d,盛花期提前8~10 d,从而使金银花的采收期提前;喷施不同质量浓度的赤霉素使金银花单株产量提高了3.6~9.0 g,千蕾重提高1.73~5.45 g,花蕾长度增加0.49~1.39 cm,金银花中绿原酸含量提高6.4~13.0 g/kg。其中300~1 000 mg/kg赤霉素处理明显提高了金银花的品质和产量。故在金银花成花调控过程中,赤霉素的最佳质量浓度为300~1 000 mg/kg。     

广东省金银花主要病虫害调查初报

对广东省广宁县金银花主要病虫害进行初步调查。结果表明,金银花病害有白粉病、褐斑病、根腐病、炭疽病、白绢病、黑霉病、疫病、烟煤病等8种,虫害有红蜘蛛和同翅目等7个目的昆虫。同时发现,由于广东气候原因,总体上金银花病虫害发生较为严重,种植中化学农药使用存在不科学现象,急需就其GAP种植中的病虫害控制技术进行攻关研究。     

微波辅助泡沫干燥蓝靛果果粉工艺的研究

选取微波功率、载样量、厚度三个主要影响因素进行单因素试验设计,对影响微波泡沫干燥特性和蓝靛果果粉品质的因素进行分析,把干燥后蓝靛果粉的含水率、花青素和维生素C的含量作为目标因素,对微波泡沫干燥蓝靛果果粉的工艺参数进行正交试验优化.结果表明,载样量是蓝靛果粉品质主要的影响因素,其次是功率和厚度.微波辅助泡沫法干燥蓝靛果的最佳工艺参数为:微波功率7 kW、载样量200 g、料层厚度8 mm     

不同品种金银花精油组分对比研究

研究同一产地3个不同品种金银花精油的成分,并探索其化合物组成的异同。本实验以3种典型的忍冬科金银花(菰腺忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬)为实验材料,采用提取率较高的精油提取装置提取其中的精油,并用气质联用仪(GC-MS)对其进行组分分析。3个不同品种的金银花共检出125种挥发性化合物;通过NIST11标准质谱库检索及人工图谱解析,确定了118种化合物结构。灰毡毛忍冬精油组成以烃类、酯类、醇类为主,其中所占比重最大为醇类,高达71.17%(C₁₀的醇类相对含量为68.93%);化合物种类最多的为C₅~C₁₀(27种),占78.28%。菰腺忍冬精油以烃类、醇类为主,其中所占的比重最高为醇类,高达86.3%(C₁₀的醇类相对含量为78.66%);化合物种类最多的为C₅~C₁₀(22种),相对百分含量为84.84%;并且没有羧酸类化合物。黄褐毛忍冬精油以酮类、酯类、醇类、醛类为主,其中所占的比例最大的为酯类,高达57.92%(C₁₆~C₂₀的酯类的相对含量为55.61%);种类最多为C₅~C₁₀(41种),相对百分含量为34.28%;但是C₁₆~C₂₀的含量最大,为59.33%(种类为15种)。研究表明:金银花种类不同,其精油组成成分在化合物种类、个数及相对含量方面差异很大,通过此次分析为金银花类别的鉴定及其精油的药用价值和香味来源的分析提供数据基础。      

QuEChERS法测定金银花中12种禁用农药残留

为有效检测金银花中禁用农药的残留情况，参照QuEChERS法，运用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）分析了金银花中甲胺磷、久效磷、磷胺、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷、甲磺隆、甲拌磷、克百威、涕灭威、灭线磷和氟虫腈12种禁用农药的多残留检测方法和基质效应。结果表明，所用检测条件干扰小，线性关系、决定系数和回收率均能满足农药残留检测的要求，其中决定系数在0.99以上，回收率为85%～102%。12种农药中甲胺磷、特丁硫磷、克百威、涕灭威和氟虫腈5种农药表现为中等强度基质效应。在QuEChERS法基础上建立的UPLC-MS/MS分析方法能够对金银花中12种禁用农药残留进行快速、准确测定。