樟芝皿培菌丝提取物体外对SPCA-1肺癌细胞增殖的抑制作用

利用细胞克隆实验、划痕实验和alamarBlue^TM细胞活力测定实验评价樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相对SPCA-1非小细胞肺癌的体外抑制作用,并进一步利用流式细胞术Annexin V-FITC(fluorescein isothiocyanate)/PI(propidium iodide)双染测定细胞早期凋亡率、流式细胞术2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorofluorescindiacetate,H2DCFDA)单染测定ROS(reactive oxygen species)释放量、流式细胞术PI单染测定细胞周期变化和ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、p53和PARP的表达,探讨樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相抑制SPCA-1增殖的作用机理。研究结果表明:樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相均能抑制SPCA-1细胞克隆的形成、迁移和增殖,石油醚萃取相的活性明显好于氯仿萃取相;石油醚萃取相通过促进SPCA-1释放ROS来诱发线粒体依赖性早期凋亡的发生,并使促凋亡蛋白Caspase-3和p53表达上升,同时抑制蛋白PARP表达,从而发挥其抑制SPCA-1肺癌细胞增殖的作用;而氯仿萃取相主要通过将SPCA-1细胞阻滞在S期抑制其增殖。     

山茶靛牛肝菌子实体提取物的体外抗肿瘤活性

依次用95％乙醇和蒸馏水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95％乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性.结果表明:石油醚萃取物对白血病细胞K562抑制作用较弱,对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖有较强的抑制作用,IC50分别为95.7和195.4 μg/mL;正丁醇萃取物对K562、SW620和HepG-2的增殖都有较强的抑制作用,IC50分别为24.2、89.0和59.6 μg/mL;石油醚和正丁醇萃取物在实验浓度范围内对人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1的增殖无抑制作用;氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、SW620和HepG-2肿瘤细胞和WPMY-1正常细胞的增殖均有较强抑制作用,其中氯仿萃取物的抑制作用最强;水提物对以上3种肿瘤细胞抑制作用不明显,对正常细胞的增殖无抑制作用.     

猴头菌子实体提取物对人肺癌细胞SPCA-1的抑制作用

猴头菌(Hericium erinaceus)子实体的醇提物用不同极性有机溶剂分部提取,得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分部,其中仅石油醚分部能抑制SPCA-1细胞增殖和促进其释放ROS(reactive oxygen species),对石油醚分部的进一步研究发现石油醚分部可诱导SPCA-1细胞早期凋亡和降低G_0/G_1期细胞数量。     

樟芝子实体和菌丝体萃取物的抑菌及抗氧化活性

以樟芝(Taiwanofungus camphoratus)子实体、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体为研究对象,分别利用石油醚、氯仿和正丁醇有机溶剂进行萃取,获得相应的萃取物,测定其抑菌和抗氧化活性.结果表明:子实体氯仿和正丁醇萃取物以及固体发酵菌丝体氯仿萃取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有较好的抑制效果;子实体石油醚、氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)有较好的抑制效果,并且子实体氯仿萃取物对供试菌的抑菌效果均好于其它萃取物;子实体氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物具有超氧阴离子清除能力,清除超氧阴离子的IC50值分别为5.94、1.32和1.97 mg/mL;子实体石油醚、氯仿和正丁醇萃取物具有过氧化氢的清除能力,清除过氧化氢的IC5o值分别为0.13、0.11和0.18 mg/mL.     

新疆细虫草提取物对胃癌AGS细胞增殖的影响

用不同浓度的新疆细虫草(Ophiocordyceps gracilis)氯仿相和正丁醇相浸膏和发酵菌丝体的醇提物作用于人胃癌AGS细胞24 h和48 h后,用MTT法测定对细胞的抑制率,并在显微镜下观测细胞形态变化。结果表明:新疆细虫草及菌丝体提取物对人胃癌细胞的增殖有抑制作用,且具有浓度依赖性,当菌丝体醇提物、新疆细虫草正丁醇相和氯仿相浓度为400μg/mL,作用于胃癌细胞48 h时,IC_(50)值分别为(82.0±0.1)μg/mL、(134.4±0.1)μg/mL和(36.0±0.1)μg/mL。     

棘托竹荪发酵物的体外抗肿瘤活性

以肿瘤细胞HepG2、B16、K562和正常细胞WPMY-1为受试细胞,对棘托竹荪(Dictyophora echinovolvata)发酵菌丝体和发酵液不同浓度乙醇提取物和水提物的体外抗肿瘤活性进行测定.结果表明:菌丝体的不同乙醇浓度提取物仅对肿瘤细胞K562和B16的增殖有较好的抑制作用,而在实验浓度内对肿瘤细胞HepG2和正常细胞WPMY-1增殖的抑制能力较弱.与菌丝体相比,发酵液对肿瘤细胞的增殖抑制作用更强,其不同浓度乙醇提取物对肿瘤细胞HepG2、B16、K562和正常细胞WPMY-1的增殖都有较强的抑制能力.     

蛹虫草菌丝体循环富硒法的建立及其硒多糖抑癌作用初探

研究富硒蛹虫草菌丝体循环富硒作用及该法获取的硒多糖对人宫颈癌细胞Hela的抑制作用.采用循环富硒法获得蛹虫草富硒菌丝体并制备硒多糖,经硒定量和多糖含量测定后采用MTT.法检测硒多糖与正常蛹虫草多糖(12.5、25、50、100、200μg/mL)作用Hela细胞72 h后细胞存活率的变化.循环富硒法可有效促进蛹虫草菌丝体对硒的富集,硒含量为680.2μg/g,多糖含量为47.4%;硒多糖与正常蛹虫草多糖(100μg/mL)对Hela细胞的抑制率分别为91.87%和77.98%.其IC50分别为18.5μg/mL和48.5μg/mL.循环富硒法可有效制备富硒蛹虫草菌丝体和硒多糖,循环富硒法获取的硒多糖能有效的抑制Hela细胞的增殖.     

云芝子实体氯仿提取物体外抗肿瘤活性研究

研究了云芝子实体氯仿提取物（CVFC）对人肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用,并初步探讨了抑瘤机制。MTr结果显示,CVFC对HepG2细胞有明显的抑制作用,并呈明显的量效关系,半数抑制浓度为（75．83±3．96）μg·mL^-1。荧光显微镜和透射电镜形态观察发现CVFC处理可使细胞发生细胞皱缩、核碎裂等凋亡特征;Annexin V/PI双染结果证实有胞膜磷脂酰丝氨酸的翻转,经150μg·mL^-1 CVFC处理HepG2细胞24h后早期凋亡率为17．82％,晚期凋亡率为22．59％,均显著高于对照组5．35％和3．75％。这些结果表明CVFC具有体外抑制HepG2细胞的活性,其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

金耳菌丝体醇提物体外抗肿瘤抗病毒活性研究

采用体外肿瘤细胞株(小鼠白血病细胞株L1210、人乳腺癌细胞株MCF-7和人肠腺癌细胞株SW620)的增殖抑制试验模型和抗病毒(流感甲型病毒和疱疹病毒)的筛选模型,对3个金耳(Tremella aurantialba)菌株菌丝体醇提物活性进行比较研究.抗肿瘤试验结果表明,3种提取物材料在高浓度(200 μg/mL)时,对3个供试肿瘤细胞株的细胞增殖均有明显的抑制作用,其中以YK的抑制活性最高(对L1210、SW620和MCF-7的抑制率分别为89.4%,75.0%和64.1%);在中浓度(50 μg/mL)时,均表现出一定的抑制作用;而在低浓度(10 μg/mL)时,则均无明显的抑制作用.抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒试验结果表明,只有YK对流感甲型病毒表现有抗病毒活性,但此活性较弱.     

利用大孔树脂制备灵芝活性三萜的研究

用D101大孔树脂作为填料,不同浓度乙醇梯度洗脱灵芝(Ganoderma lucidum)子实体提取物,利用HPLC对得到的不同洗脱物进行了分析对比,并利用体外抗肿瘤模型对洗脱物进行了活性研究.结果表明,90％和95％乙醇洗脱获得了灵芝中极性较弱的三萜组分,得率共计为6.7％.该三萜组分具有较强的抗肿瘤活性,其中,以95％乙醇洗脱获得的三萜组分活性最强,对肿瘤细胞K562、LNCaP增殖抑制的IC50值分别达到14.67 μg/mL和0.87 μg/mL.     

林芝松口蘑抗肿瘤组分的筛选

为筛选林芝松口蘑(Tricholoma matsutake)子实体中具抗肿瘤作用的组分,采用MTT法测定林芝松口蘑乙醇提取物的不同有机溶剂萃取分部对乳腺癌细胞(MCF-7)、胃癌细胞(SGC-7901)和肺癌细胞(A549)的体外抑制率。结果表明:林芝松口蘑乙醇提取物的抑癌活性物质主要集中在氯仿分部,100μg/mL作用48h,对MCF-7和SGC-7901的抑制率分别达到了64%和55%;乙醇提取物的各萃取分部对A549抑制效果较差,在实验浓度范围内抑制率均未超过25%。     

固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析樟芝发酵液、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体中香气成分

采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵液、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体中挥发性成分,其中共鉴定出30种香气成分.发酵液中有14种香气成分,相对含量为43.76％,以醇类为主;液体发酵菌丝体有19种香气成分,相对含量为34.97％,以醇类和醛类为主;固体培养菌丝体中有15种香气成分,相对含量为12.21％,以醛类为主.     

Extraction of Triterpenoids with Antioxidant and Anti-tumor Activity from Agrocybe aegerita Mycelium and Spent Culture Medium

Different organic solvents (petroleum ether, ethyl acetate and ethanol) were used to extract A. aegerita mycelium and spent culture medium following growth of the fungus in submerged culture. All the extracts exhibited antioxidant and anti-tumor activity that may be linked to triterpenoids present in the extracts.     

茶薪菇培养物中粗三萜含量测定及抗氧化抗肿瘤活性研究

采用石油醚、乙酸乙酯和乙醇分别对液体培养的茶薪菇菌丝体和培养液进行抽提或萃取。分析表明,石油醚、乙酸乙酯和乙醇提取物中均含有三萜类物质,并具有较高的抗氧化活性和抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖的作用。     

姬松茸发酵液对小鼠抗运动疲劳及肝组织抗氧化能力的影响

研究姬松茸(Agaricus blazei)发酵液灌胃小鼠,对小鼠抗运动疲劳及肝组织抗氧化能力的影响.试验结果表明,与对照组(10 mg/kg·d ddH2O)相比,姬松茸发酵液中剂量组(20mg/kg·d)、高剂量组(30 mg/kg·d)小鼠的负重游泳、爬杆、耐缺氧时间均显著延长,血清尿素氮和血乳酸含量显著降低,肝糖原储存量显著升高,肝组织中SOD、GSH-Px活性显著提高,MDA值显著下降.说明灌胃姬松茸发酵液,能提高小鼠抗运动疲劳功能和加强肝组织抗氧化能力.     

高效液相色谱法测定食用菌中福美双残留量

建立食用菌中福美双残留量的高效液相色谱(HPLC)检测方法.新鲜食用菌子实体样品粉碎后经二氯甲烷超声(53 Hz)提取20 min,离心(3320 g、5 min),二氯甲烷经氮气吹干,甲醇定容后用HPLC测定.以等体积甲醇和0.1％甲酸水溶液为流动相,1 mL/min等度洗脱,在0.05～10 μg/mL范围内,福美双的峰面积与其浓度呈线性相关,R≥0.999,方法检出限为0.02 mg/kg,添加回收率为79.4％～90.2％,变异系数为1.15％～7.51％％.     

液相色谱串联质谱法检测双孢蘑菇培养料中四环素类药物残留

采用液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS)建立双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料中四环素、二甲胺四环素、土霉素、甲烯土霉素、脱氧土霉素、金霉素、去甲基金霉素7种四环素类药物残留的定量分析方法。双孢蘑菇培养料以等体积Na2EDTA McIlvaine缓冲溶液(pH 4.0)和甲醇的混合液涡动,超声提取(35KHz,5min)。以HLB固相萃取柱进行净化富集,LC-MS/MS检测,结果表明:在5.0~200.0μg/L的线性范围内,7种四环素类药物的峰面积与其浓度呈良好线性关系,方法最低检出限为5.0μg/kg;在5.0、20.0、100.0μg/kg三个添加水平下,培养料基质中7种四环素类药物的回收率为80.3%~92.5%,相对标准偏差为1.6%~8.0%。该方法可以同时满足双孢蘑菇培养料中7种四环素类药物残留检测的需要。     

硒对松口蘑深层发酵的作用研究

以松口蘑为材料,在发酵培养基中添加不同浓度的硒,测定分析了松口蘑菌丝体的生物量、多糖含量、硒的积累量。结果表明:0～40μg/mL的硒浓度对松口蘑菌丝体的生物量和多糖含量的增加都有促进作用,且随着浓度的增高促进作用加强,40μg/mL以上的硒浓度有抑制作用,随着浓度的增高抑制作用增强;硒浓度在0～50μg/mL时,硒在菌丝体中的积累量随着硒浓度的增加而增加,当硒浓度超过50μg/mL时,硒在菌丝体中的积累量开始下降。