运用酶免疫法测定脱脂乳中孕酮水平进行奶牛早期妊娠诊断

前言奶牛妊娠的早期诊断是提高繁殖率的一项重要技术措施,以保证母牛在产犊后90天内受孕,减少牛场经济损失。目前,采用配种后60天直肠检查诊断为多,但其时间间隔较长,一般要在配种后3个情期才能确诊,并且其准确率还受工作人员的技术水平的影响。为克服上述不足,不少学者通过测定乳中孕酮浓度来进行早期妊娠诊断。     

奶牛乳汁孕酮免疫检测的方法

孕酮(P4)是奶牛和黄牛在发情周期(一般为21天)中由卵巢黄体中产生的激素,可以进入血液、乳汁和唾液中。在母牛配种后21～24天期间采集奶测定孕酮浓度,可以判断牛是否受孕。发情期间奶中孕酮浓度可判断奶牛是否处于发情期。临床上,孕酮     

用ELISA进行奶牛发情检查和早孕诊断

奶牛繁殖率高是牧场获得最佳经济效益的决定因素之一,因为产奶高峰通常是在产后21—90天获得的。繁殖率低,就会降低母牛的产犊胎数,影响奶牛生产性能的发挥。如要获得高的繁殖率,就必需了解奶牛的繁殖状况,对奶牛进行发情检查,以便及时配种;配种后还要进行早孕诊断,以便尽早挑出空怀牛。以往人们进行发情检查多采用肉眼观察,妊娠诊断多采用直肠检查的方法。以上方法虽然简便易行,但由于主观性强,加之劳动量大,影响了观察结果,妊娠与否也只能在配种后40多天才能检出。鲜奶中孕酮水平在母牛的发情期极低,以后5—6天逐渐上升,到发情周期的第12天达到相当高水平。如果母牛在前一个发情期配种受孕,孕酮将保持在较高状态以维持妊娠;如果未妊,     

用ELISA测乳汁孕酮进行奶牛的发情检查和早孕诊断的研究

本试验用ELISA测定了101头奶牛配种期0～2天和配种后18～24天的乳汁孕酮含量,提供了牧场分两阶段测试乳样进行奶牛的发情检查和早孕诊断的可行方案。测定的结果经临床检验核实:发情检查的确诊率为100％;配种后20～22天,妊娠牛和空怀牛的确诊率分别为92.1％和96.9％,可疑率为4.0％,总确诊率为89.9％。     

牛妊娠相关糖蛋白ELISA对早期妊娠诊断效果的影响

选取273头荷斯坦奶牛,在人工输精后的28d和75d分别采用牛妊娠相关糖蛋白(PAG)ELISA和直肠检查的方法进行妊娠诊断,比较PAG ELISA和直肠检查法的结果,旨在评价PAG ELISA对配种28d的奶牛进行早期妊娠诊断的准确性。结果表明,PAG ELISA法妊娠诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为100%、75.5%、86.5%、100%和90.5%,与75d直肠检查结果相同,可用于母牛的早期妊娠诊断。妊娠诊断对于母牛保胎、分群管理及提高繁殖效率等具有非常重要的意义。     

根据牛奶及血浆中的孕酮浓度诊断牛的妊娠

近年来已可对牛奶中的孕酮进行精确的测定。牛奶孕酮与血浆孕酮密切相关,而后者因与黄体功能直接相关故被认为是奶牛生殖状态的一个有用指标。Laing(1971)、Heap(1976)等人曾用全奶孕酮浓度作为指标对配种后21—25天的奶牛进行妊娠诊断,都认为这种早期测定可作为未孕的一种指标而不能作为怀孕指标,因为测定后     

奶牛发情周期中毛 唾液和乳汁孕酮水平的变化

本实验采用放射免疫分析法(RIA)测定了11头奶牛一个发情周期里毛、唾液、乳汁中孕酮(P_4)含量。经产牛(n=8)的毛和唾液中P_4水平变化与乳汁中P_4水平变化一致。青年牛(n=3)的毛和睡液中的P_4水平变化一致,并分别与经产牛毛和唾液中P_4水平变化一致。7头配种后的经产牛和5头配种后的青年牛分别取20和23天的样品进行妊娠诊断,与配种后60天的直检结果相对照,依据经产牛毛、乳P_4水平进行妊娠诊断的阳性准确率分别是85.7％(6/7)和100％(7/7),依据青年牛毛P_4水平进行妊娠诊断的阳性准确率为100％(5/5)。     

测定奶中孕酮含量作奶牛早期妊娠诊断的研究

用RIA方法对703头配种后21～24天的母牛,测定其奶中孕酮含量,作了早期妊娠诊断的研究。通过研究,确定乳脂孕酮的判别值大于1.0ng/10μl为妊娠,小于0.8m/10μl为未妊娠,0.8～1.0ng/10μl为可疑;全奶孕酮是根据Eastman的研究结果,以5.0ng/ml作为判别值,大于此值为妊娠,小于此值为未妊娠。通过直肠检查和产犊资料验证,利用乳脂孕酮值判别为妊娠的准确率为86.60％(336/388),未妊娠的准确率为97.40％(187/192),可疑的为5.84％(36/616);全奶孕酮值判别为妊娠和未妊娠的准确率分别为87.76％(43/49)和94.74％(36/38)。以配种后第21～24天和第42天乳脂孕酮值两次判别结果,妊娠的准确率提高到93.2％。本结果已在乌鲁木齐地区有关奶牛场推广应用,对提高奶牛繁殖率起到积极作用。     

硫酸铜法奶牛早期妊娠诊断的试验

奶牛早期妊娠诊断是改善饲养管理,提高繁殖率和增加经济效益的一项重要技术措施。目前国内奶牛的妊娠检查仍多采用直肠触诊法。1973年Heap等应用牛乳孕酮的放射免疫测定法(RIA)诊断奶牛早期妊娠。此后,1981年Arastadt建立了牛乳孕酮的液相酶免疫测定法(EIA);1982年和1984年又成功地发展了微滴平板酶免疫测定技术。我国也相继开展这方面的应用研究。虽然EIA和RIA法具有准确性高等多种优点,但由于诊断仪器昂贵,操作手续繁杂,在现阶段国内生产单位还难以推广。特别是对于配种后早期胚胎死亡和经产母牛子宫下坠(胚胎附植之前)     

母牛早期妊娠诊断——应用放射免疫测定乳汁孕酮在母牛性周期内变化规律的试验报告

应用放射免疫法对10头黑白花母牛性周期内乳汁孕酮含量进行了测定。结果显示母牛配种当天(0天)乳汁不含孕酮,配种后第3天含量仍是低值(范围0—4ng/ml,平均0.71±1.338)。以后逐渐上升,配种后第13天,70%个体出现峰值(范围14.8～36.5ng/ml,平均24.9±6.73);其余个体于配种后第16天出现峰值(范围15—31ng/ml,平均24.83±8.6)。此后显示分化现象,其波动曲线与同类报道相似。     

应用国产兽用LH-RH类似物对乳牛早期妊娠诊断的初报

<正> 妊娠诊断是提高乳牛繁殖率的重要环节。可采取临床诊断、测定乳和血浆中孕酮含量或其他方法进行之。以乳中孕酮的测定作为早期妊娠诊断的依据,但由于判定标准不同,又受仪器设备技术条件的限制,还未达到实用阶段。随着现代技术的发展,诊断方法有了较大的发展和提高,但这些方法还不能完全达到乳牛早期妊娠诊断的目的,使在配种后极短的时间内检出未孕母牛,避免空怀。为此,探索乳牛早期妊娠诊断的新方法,是奶牛生产中需要解决的课题。     

奶牛的极早期(16±1天)妊娠诊断方法

影响奶牛繁殖力的因素很多,诸如遗传选育、精液品质、营养、环境、管理、疾病等,但有一点值得注意,即母牛的早期妊娠诊断。在生产实践中,如早期妊娠诊断跟不上,则极易造成发情母牛的失配和已妊娠母牛的误配,从而延长产犊时间。只要失配13.5个发情周期(283天)就相当于少产一头牛,以至损失一个泌乳期的泌乳量。因此,有必要继续探索更快捷、简单、经济有效的早期妊娠诊断方法。这对于及时做好妊娠母牛的饲养管理以及未孕母牛的下一繁殖期的配种工作,将繁殖损失降到最低,提高经济效益具有重要意义。奶牛的妊娠诊断最初是依据配种后是否返情来判…     

奶牛发情期前后脱脂乳中孕酮水平与受胎率之间的关系

本试验用酶联免疫法(EIA)对34头具有发情表现的上海黑白花奶牛进行了脱脂乳孕酮含量的测定.结果表明,配种后妊娠的母牛和未妊娠的母牛在原人工授精当天的脱脂乳孕酮水平分别为0.23±0.17ng/ml 和0.65±0.72ng/ml,两者差异显著(P<0.05).母牛在开始发情后16～18小时,脱脂乳孕酮水平低于0.23ng/ml 时配种,其受胎率为100%.     

奶牛乳汁孕酮EIA快速诊断试剂盒的研制与应用

应用乳汁孕酮酶免疫快速测定法对奶牛进行发情鉴定和妊娠诊断的研究,周外已有很多报道,而且至少现已有11种诊断盒供应市场。国内在近几年尽管已建立了孕酮酶免疫测定方法,并用于奶牛早期妊娠诊断,但尚未研制出快速测定试剂金供应市场。目前,同外生产的孕酮EIA快速诊断盒进行奶牛早期妊娠诊断平均每测一个样本约需成本1英磅(合人民币9元)左右。在外汇紧张、资金短缺的条件下,依靠进口来满足国内市场需要显然是不可能的。为此,我们在以前的工作基础上,利用孕酮EIA定量测定试剂研制奶牛乳汁孕酮EIA定性快速妊娠诊断试剂盒,现已取得初步成功。应用该试剂     

根据乳汁孕酮水平进行奶山羊早期妊娠诊断的研究

为探求西农莎能奶山羊早期妊娠诊断的方法,应用放射免疫法,分别测定6只奶山羊发情同期和153只奶山羊妊娠早期下午末乳的孕酮水平。6只母羊发情0～1天(发情为0天)的孕酮水平最低,均值为0.83±0.28毫微克/毫升,发情第五天后逐渐上升,于第十一至十七天达峰值分别为32.2、23.4、15.9、12.6和34.2毫微克/毫升,此后又陡然下降,恢复到下一发情周期前的基础水平。配种后第十五至二十九天的孕酮值波动在0.30～42.2毫微克/毫升的范围。根据配种后返情及产羔情况观察,产羔羊配种后第二十二至二十五天的孕酮均维持较高水平,均值≥8.3毫微克/毫升,而返情和未产羔羊这四天的孕酮水平则较低(P<0.01),均值<8.3毫微克/毫升。故以8.3毫微克/毫升的孕酮值为判定界限,即:≥8.3毫微克/毫升为妊娠,<8.3毫微克/毫升为未妊娠,准确率是96.5%(109/113),未妊羊是90%(9/10)。据此,作者认为:根据乳汁孕酮水平能够进行西农莎能奶山羊的早期妊娠诊断。采样时间在配种后第二十二至二十五天,采样次数为隔日2次。此外,对判定界限及诊断的准确率等问题、也进行了讨论。     

母牛的妊娠诊断方法

母牛配种后 ,做好早期妊娠诊断 ,有着重要意义 :因为早期确定怀孕 ,可加强饲养管理 ,做好保胎 ,避免流产 ;还可及时发现没有受孕的母牛 ,可再次进行配种减少空怀。随着兽医诊断技术的发展 ,人们已发现了多种牛的妊娠检查方法 :外部观察法、直肠检查法、阴道检查法、宫颈粘液检查法、超声波诊断法、孕酮含量测定法、免疫学诊断法、早孕因子测定法、血小板计数法、经穴皮温变化法等等。有的适于生产实践 ,有的适用于实验室诊断。理想的妊娠诊断方法 ,应该具备下列条件 :①快速 ,适用于早期妊娠诊断 ;②准确 ,妊娠诊断结果误差小 ;③安全 ,对母…     

测定奶中孕酮含量进行奶牛早期妊娠诊断的研究

<正> 为了提高奶牛的繁殖率,一般要求母牛能每年产犊1次,亦即除去妊娠期约280天外,母牛必需在产犊后90天内受孕,否则将造成牛场的经济损失。因此有必要尽早确定母牛妊娠,因而早期妊娠诊断方法的研究和应用就显得十分重要。早在1971年,英国laing及Heap首先倡用测定奶牛孕酮含量作为妊娠诊断的实验室方法。此后在英国奶牛群中应用不断扩大。据Booth报道(1980),1975/19761年中即有近6万头母牛,在以后3年(1976/77至1978/79)每年有十万头母牛,亦即4     

免疫乳胶测定法对奶牛妊娠诊断试验

奶牛的妊娠诊断是早期发现空怀,尽早采取措施复配,不致延误配种季节而担误生产。早期妊娠诊断技术跟不上,势必丧失配种期,就会直接影响犊牛繁殖计划和产奶量计划,大大影响了经济效益。目前对奶牛早期妊娠有直肠触诊法,它准确率高,但存在费体力和寒冷天气操作不便等缺点;最近几年采用免疫学的妊娠诊断法,如HCG放射免疫测定法,红血球凝集抑制法,血浆或乳汁的孕酮放疫免疫测定法等,它们虽然准确率高但     

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现：配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9～8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。     

奶牛早期妊娠诊断研究进展

奶牛配种（或受精）后不久,进行早期妊娠诊断,以便加强怀孕母牛饲养管理,保证顺利分娩或对未孕母牛及时配种,缩短产仔间隔,提高繁殖效率。生产实践中广泛应用的直肠检查等方法,尽管简单易行,不需特殊设备,但费时长,且判断结果不够准确,影响奶牛生产,因此奶牛早期妊娠诊断方法研究引起了普遍重视。近30年来奶牛早期妊娠诊断方法研究发展很快,新的诊断方法不断问世,其总的趋势是向着快速、简便、经济方向发展。