酶免疫法测定水牛奶孕酮作早期妊娠诊断的研究

本试验采用酶免疫分析法（ＥＩＡ）测定８７头杂种水牛，７１头摩拉水牛的脱脂乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态的孕酮变化规律。摩拉和杂种水牛发情配种时脱脂乳孕酮含量均在０．５毫微克／毫升以下，妊娠２１天和２７天时孕酮含量两次都在１．７毫微克／毫升以上，妊娠３０天以后直至产前干奶期间，脱脂乳孕酮保持在４～５毫微克／毫升的水平。母水牛流产和胚胎死亡时孕酮浓度下降。为对水牛繁殖状态的监控提供了可靠的方法和依据。结合生产实践，用上述方法和标准对６４头配种后２１天的母水牛进行早期妊娠诊断，判断妊娠牛和非妊娠牛的准确率分别为８８．９０％和９７．３％，总准确率为９３．８％。     

奶牛早期妊娠诊断—应用放射免疫测定乳汁孕酮含量的研究

应用放射免疫测定91头黑白花母牛,(配种后21—28天和42天)的混合全乳的孕酮含量,进行早期妊娠诊断研究。结果显示怀孕与未孕牛之间孕酮值差异非常显著(P<0.01)。据此确定全乳孕酮值的判定标准:>11毫微克/毫升为怀孕,<8毫微克/毫升为未孕,8.1～10.9毫微克/毫升为疑似。经直肠妊检核实,用这标准衡量配后21,23,24天妊娠牛的确诊率分别为85.7％,90.2％,91.4％,未孕牛确诊率是100％,因此,最佳采样时间以配后23—24天为宜。     

奶牛妊娠早期诊断技术介绍

母牛妊娠早期诊断能够及时发现空怀牛并进行第二次发情管理和配种,对缩短配种间隔、提高妊娠率有重要意义,因此需要研究和开发一种理想的早期孕检方法。本文主要介绍了当前牛场管理中常用的手工直肠检测和超声波检测、牛奶中孕酮检测和硫酸雌酮检测以及妊娠相关糖蛋白(PAGs)检测等几种孕检方法,并对其优缺点及应用进行了比较论述。     

酶免疫测定法检测粪便孕酮进行母猪早期妊娠诊断的研究

粪便中孕酮含量是判断母猪卵巢机能状态的重要指标,应用粪样孕酮酶免疫法可以对母猪进行早孕诊断。由实验结果可知,配种后母猪粪便中孕酮的含量超过150 ng/g粪样时,就可确认其妊娠;小于150 ng/g时,可确认其空怀。对164头配种后21～25 d的母猪进行了检测,早孕诊断的准确率为95.9%(138/146),空怀诊断的准确率为72%(13/18)。母猪粪便孕酮酶免疫法进行早期妊娠诊断有较高的临床适用性,对提高母猪繁殖率和猪场经济效益具有重要意义。     

奶牛早孕诊断试纸条的研制及临床试验

用抗孕酮单克隆抗体S3B2D4A6和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸纤维膜，并与胶体金标记的抗孕酮单克隆抗体S3B3E1G1及其它试剂，应用层析式双抗体夹心法原理研制奶牛早孕诊断试纸，在北京10家奶牛场进行临床检测试验，对1559头荷斯坦奶牛乳汁中孕酮含量进行临床符合验证。结果表明。该试纸条灵敏度高，最低检出量达5～8ng／mL。与无关抗原均无交叉，且批内、批间变异小；检测1559头奶牛。孕牛1316头，其中试纸检测结果阳性1274头。可疑32头。复测阳性22头，孕牛阳性临床符合率96．8％；复测后阳性总符合率达98．5％。阴性对照243头，其中试纸检测结果阴性236头。可疑6头。复测阴性2头。阴性临床符合率为97．1％。复测后阴性总符合率97．9％。结论：北京万华生物工程有限公司研制的奶牛早孕诊断试纸能够快速、准确地进行奶牛早期妊娠诊断。     

母牛的妊娠诊断方法

母牛配种后 ,做好早期妊娠诊断 ,有着重要意义 :因为早期确定怀孕 ,可加强饲养管理 ,做好保胎 ,避免流产 ;还可及时发现没有受孕的母牛 ,可再次进行配种减少空怀。随着兽医诊断技术的发展 ,人们已发现了多种牛的妊娠检查方法 :外部观察法、直肠检查法、阴道检查法、宫颈粘液检查法、超声波诊断法、孕酮含量测定法、免疫学诊断法、早孕因子测定法、血小板计数法、经穴皮温变化法等等。有的适于生产实践 ,有的适用于实验室诊断。理想的妊娠诊断方法 ,应该具备下列条件 :①快速 ,适用于早期妊娠诊断 ;②准确 ,妊娠诊断结果误差小 ;③安全 ,对母…     

早期妊娠诊断技术在夏南牛生产中的应用研究

摘 要：【目的】缩短母牛产犊间隔,提高母牛繁殖效率,探索母牛一年一胎的实现路径。【方法】随机挑选21头4-6岁,产后2--3个月未发情的空怀母牛,采取以下同期发情处理程序：第1d肌肉注射GnRH 100μg/头（戈那瑞林）,第8d肌肉注射PG 0.33mg/头（氯前列醇）,第10d肌肉注射GnRH 100μg/头,第11d配种,配种后30d左右采血样送检,检测孕情状况。【结果】经早孕检测,21头送检血样中大于或临近OD值弱阳性对照（0.315）的有14头,小于OD值弱阳性对照（0.315）有7头,检测怀孕率达到66.7%。随后经直肠检查和产犊验证,实际怀孕率66.7%、怀孕牛产犊率100%。【结论】(1)早期妊娠诊断技术已经成熟,该批次血样检测正确率达100%。（2）早期妊娠诊断技术在肉牛生产中的应用可有效解决母牛的隐性发情,缩短母牛产犊间隔,提高母牛繁殖效率。（3）为夏南牛一年一胎技术的实施探索了新途径。     

人用人绒毛膜促性腺激素检测试纸对奶山羊妊娠诊断效果观察

本文就人用人绒毛膜促性腺激素检测试纸(胶体金法)对奶山羊早期妊娠诊断效果进行了试验观察。结果表明:采用人用人绒毛膜促性腺激素检测试纸对羊进行妊娠诊断,在配种后第40d检测的阳性率为70%(7/10),仅比超声波诊断的怀孕率低10个百分点,对奶山羊早期妊娠诊断有参考意义;配种后第70d检测的阳性率为0(0/9),临床应用价值不大。     

酶免疫分析法诊断家畜妊娠研究进展(续上期)

1．2水牛黄右军等（1994）采用EIA法测定了87头杂种水牛，对头摩拉水牛的脱胎乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态孕酮变化规律。将配种后第21d和27d次取奶样测定孕酮浓度均达到或超过1．7×10~(-9)g／mL者判为妊娠牛，前高后低者（不达者）为空怀牛，对64头配种水牛进行测定，1个月后直检复查，空怀确诊率为97.390（36／37），妊娠确诊率为88．9％（24／27）。与国内外EIA法诊断奶牛妊娠结果基本一致。[11]1．3羊李学斌等（1993）应用ELISA法测定绵羊血清中干扰体液免疫反应的因子，发现在配种后48…     

“优孕凯斯”检测技术在奶牛早期妊娠诊断中的应用

简便、有效、快速的早期妊娠诊断技术是奶牛场提高管理效率和养殖经济效益的重要措施。本试验旨在研究新型实验室检测技术在奶牛早期妊娠诊断上的应用效果。试验选择2012年2月~2013年2月底,对上海光明荷斯坦牧业有限公司旗下的8个奶牛场,配种后28~33d的牛只采集的尾根静脉血液,共计6 200头份。通过"优孕凯斯"检测技术确定牛只是否妊娠,并将其结果与牧场55~60d的孕检结果进行比较。结果表明,"优孕凯斯"检测技术对空怀牛的检测准确率达到99.36%,对怀孕牛检测准确率达到93.16%。"优孕凯斯"检测技术作为奶牛早期妊娠诊断的一项新技术,有巨大的应用前景。     

用血清酸滴定法对牛进行早期妊娠诊断的研究

采用血清酸滴定法对配种后16 d～45 d的1 008头不同品种的母牛进行了早期妊娠诊断研究,检出妊娠牛764头,未妊娠牛244头;与直肠检查结果对比,妊娠符合率为90.31%(690/764),未孕符合率为93.03%(227/244),总符合率为90.97%(917/1008).对3种不同品种牛试验结果经3组间及两组间卡方检验统计分析,无显著差异(P＞0.05).表明血清酸滴定法用于牛的早孕诊断具有诊断时间早、方法简便、结果准确等优点,宜于在基层推广.     

PAG ELISA早孕检测试剂盒对奶牛繁殖效率的影响

为了及时发现空怀牛并及时实施第2次配种,试验对配种后30~45 d未返情的奶牛采集血样,应用早孕因子(PAG)ELISA早孕检测试剂盒进行早期妊娠诊断。结果表明:应用PAG ELISA早孕检测试剂盒后,奶牛的平均空怀天数下降22.67 d,产犊间隔下降36.82 d。说明使用PAG ELISA早孕检测试剂盒进行奶牛早期妊娠诊断能够及时发现空怀牛并实施第2次配种,能够极显著降低奶牛空怀天数和产犊间隔(P0.01),提高奶牛繁殖效率。     

奶牛发情期前后脱脂乳中孕酮水平与受胎率之间的关系

本试验用酶联免疫法(EIA)对34头具有发情表现的上海黑白花奶牛进行了脱脂乳孕酮含量的测定.结果表明,配种后妊娠的母牛和未妊娠的母牛在原人工授精当天的脱脂乳孕酮水平分别为0.23±0.17ng/ml 和0.65±0.72ng/ml,两者差异显著(P<0.05).母牛在开始发情后16～18小时,脱脂乳孕酮水平低于0.23ng/ml 时配种,其受胎率为100%.     

牛妊娠相关糖蛋白ELISA对早期妊娠诊断效果的影响

选取273头荷斯坦奶牛,在人工输精后的28d和75d分别采用牛妊娠相关糖蛋白(PAG)ELISA和直肠检查的方法进行妊娠诊断,比较PAG ELISA和直肠检查法的结果,旨在评价PAG ELISA对配种28d的奶牛进行早期妊娠诊断的准确性。结果表明,PAG ELISA法妊娠诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为100%、75.5%、86.5%、100%和90.5%,与75d直肠检查结果相同,可用于母牛的早期妊娠诊断。妊娠诊断对于母牛保胎、分群管理及提高繁殖效率等具有非常重要的意义。     

使用SCD-2型多普勒仪早期诊断黄牛妊娠

笔者于1990年开始使用SCD-2型多普勒仪早期诊断黄牛妊娠。在10余年里,共检测配种后母牛886头,呈阳性者868头,准确率达到98%。其中,配种后22～25 d检测457头,阳性者443头,准确率为97%;配种后26～30d检测429头,阳性者425头,准确率为99%。     

注射乙菧酚诊断母牛早期妊娠

为了在配种后较短时间内检出受配母牛中的未孕母牛,我们于1986年对来站配种的19头母牛,肌注人工合成雌激素乙菧酚,进行了牛的早期妊娠诊断试验,发情配种后18—19天的母牛,颈部肌肉注射乙菧酚1毫升(5毫克),3—5天内(配后21—25天)观察牛只表现,不发情者为妊娠,发情者为未妊娠。配后两个月按常规直检确定是否怀孕,并与药物试验结果相对照。     

湘西黄牛发情周期与妊娠早期孕酮变化规律研究

采集湘西黄牛母牛的血液样品,通过酶联免疫吸附技术检测和比较其在发情周期和早期妊娠期的孕酮(P4)水平。结果表明,湘西黄牛的发情周期中,P4浓度变化非常明显,大致呈先上升再下降的趋势。发情前期、中期、后期和间情期P4浓度分别为8.85、0.72、1.40和9.13ng/mL,发情中期与后期P4浓度显著低于发情前期和间情期(P0.05);妊娠早期的母牛,从发情配种后,血液中P4浓度缓慢升高,其中妊娠后0~10d、11~20d、21~30d和31~36dP4浓度分别为3.36、8.91、12.69和16.12ng/mL,各阶段P4浓度差异显著(P0.05);发情后第21d、24d、27d和30d,妊娠母牛血液中的P4浓度显著高于未妊娠的母牛(P0.05)。试验表明,发情配种后20d,妊娠母牛与未妊娠母牛的血液中孕酮含量差异明显,可作为判断是否受孕的标记因子。     

牦牛发情周期和妊娠早期乳脂孕酮水平的变化

采用放射免疫分析法对牦牛发情周期和妊娠早期的乳脂孕酮水平进行了测定,并对应用乳脂孕酮测定进行耗牛早期妊娠诊断的方法作了探讨。4头牦牛发情周期乳脂孕酮水平的变化类型与奶牛基本相似。发情期的乳脂孕酮含量低,为0.10±0.01(S.E.)ng/10μl;发情终止后4～5天,孕酮含量开始显著升高(P<0.01),并分别于周期第16,17,21和22天(周期长度分别为20、24、25、27天)达到峰值,平均为1.69±0.10(S.E)ng/10μl,下次发情前2天孕酮含量急剧下降到较低水平,于下次发情时重返到基础水平。15头牦牛妊娠12—30天的乳脂孕酮含量维持较高水平,平均为2.18±0.05(S.E)ng/10μl,妊娠18、20、22、24、26、28和30天的孕酮含量极显著高于8头未孕牛授精后相应各天的孕酮含量(P<0.01)。根据配后16和24天两份乳样的乳脂孕酮含量诊断怀孕与未孕的准确率分别为78.9%(15/19)和100%(11/11)。     

奶牛的早期妊娠诊断

家畜早期的妊娠诊断是改善饲养管理和提高繁殖效率的重要技术措施,本文兹将效果较好,易在生产实践中推广和应用的早期诊断方法综述如下: 一、ELISA测定乳汁孕酮对奶牛进行早期妊娠诊断近年来,奶牛妊娠诊断多采用放射免疫分析法(RLA)测定乳汁孕酮的方法。因RLA存在放射性污染、测试仪器昂贵、标记化合物排架时间短、操作费时等弊病,故目前多采用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定研究母牛配种后20天左右的乳汁孕酮的含量,以确定母牛是否妊娠。据101头配种后18—24天连续采样测得的结果,确定乳汁孕酮     

孕牛血清早孕因子的生物活性检测及妊娠率分析

采用玫瑰花环抑制试验(RIT)对17头人工授精孕牛血清中早孕因子生物活性进行检测,并进行了妊娠结果回访。结果显示,孕牛在排卵后2 d～7 d内,13头孕牛血清经RIT检测出早孕因子活性,4头孕牛血清中经RIT未检测出早孕因子活性。回访发现8头孕牛娩出胎儿,2头孕牛流产,4头未妊娠,人工受精率为76.47%,妊娠率为58.82%,妊娠至分娩的成功率为47.06%,妊娠早期流产率为11.76%,测出早孕因子活性随访未妊娠的植入期胚泡丢失率为23.08%。用RIT对孕牛血清中早孕因子生物活性的研究,对建立早期妊娠诊断方法和检测早期胚胎发育情况及确定早期胚胎死亡的方法具有重要参考价值。