建立蓝耳病阴性种猪群技术探讨

摘要：研究旨在建立一个蓝耳病病毒抗体与抗原双阴性、伪狂犬病野毒抗体阴性的种猪群。主要通过对原蓝耳病阳性猪场进行清理净场,做好引种隔离检测工作,及时淘汰蓝耳病阳性猪以阻止蓝耳病病毒在猪群内循环传播,优化生物安全标准并严格执行,最后借助于ELISA（酶联免疫吸附试验）和PCR法来验证所采用的技术能够建成一个蓝耳病阴性种猪群。     

某规模猪场母猪流产病因调查分析

甘肃某规模猪场在常规免疫程序下,300头基础母猪场中,20多头不同胎次怀孕猪短期内出现流产。为确定病因,分别采集流产母猪、空怀母猪、怀孕30日龄母猪以及怀孕60日龄母猪的血清共20份,针对常见可引起猪流产的病毒进行抗体检测;同时采集流产胎儿肺脏、淋巴结和肾脏进行病原学检测。其中抗体检测分别送检3个不同实验室,检测结果无显著差异。抗体检测结果表明,猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型抗体阳性率均在95%以上,猪伪狂犬病病毒g E抗体阳性率为100%、口蹄疫病毒抗体阳性率为35%;流产胎儿脏器病原学检测结果表明,猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病毒检测均为阴性,猪蓝耳病病毒检测为阳性。调查结果表明,蓝耳病与伪狂犬病的混合感染是导致该规模场母猪流产的主要原因。     

NADC30-like流行毒株重组毒株越来越多,不能用其他传染病的防控理念防控蓝耳病

正全国几乎没有蓝耳阴性的商品猪场。据2017年对24个省(市)不同规模的472个猪场的39173份血清抗体的监测结果表明:样本总阳性率为81%,与往年的检测情况相当。阳性猪场占检测猪场的99.4%,阴性场只有3个。一、国内猪场蓝耳病流行情况我国目前猪场的蓝耳病总体上平稳,但是并不稳定。大规模的流行已经很久未见,蓝耳病的主要流行形式是散发和地方性流行。虽然蓝耳病造成大规模流产、死胎、木乃伊     

鄂西北地区规模化猪场猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫血清抗体水平监测

对鄂西北地区46家规模化猪场采集的1 480、1 535和1 599份血清分别进行猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫抗体检测。结果:猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫抗体达到强阳性的比率分别为87.0%、50.6%和77.5%;抗体弱阳性的比率分别为10.7%、17.8%和17.0%;抗体阴性的比率分别为2.0%、31.6%和5.5%。统计分析显示,猪瘟、蓝耳病和口蹄疫达到群体免疫合格的猪场数分别为38家(82.6%),16家(34.8%)和36家(78.2%)。调查结果表明,鄂西北地区规模化猪场猪瘟和猪口蹄疫免疫效果较好,但不同猪场免疫效果差异较大,猪蓝耳病免疫状况不容乐观,应规范3种疫苗免疫和抗体检测计划,尤其要加强蓝耳病的有效免疫程序制定,以实现本地区有效控制猪瘟、猪蓝耳病和猪口蹄疫等疫病。     

猪蓝耳病抗体监测及其规律的应用

总结发病猪场蓝耳病病毒抗体变化规律,是监测和防控蓝耳病的重要基础。本研究跟踪监测了新乡某规模化猪场蓝耳病发病前驱期、明显期及转归期的蓝耳病病毒抗体S/P值,对S/P值检测结果、发病前期的抗原水平检测结果和猪场的生产成绩进行了综合分析。结果显示,随着蓝耳病病毒抗体S/P值的升高,母猪的分娩率和保育猪的成活率开始下降,尤其是当S/P值高于2.5的母猪群体比例高于15%时,母猪分娩率和保育猪成活率明显下降;96.2%的母猪群蓝耳病病毒抗体S/P值介于0.4～2.0时,且离散度低于45%时,猪群蓝耳病处于阳性稳定状态。     

胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪蓝耳病抗体的比对试验

胶体金免疫层析试纸条检测猪蓝耳病抗体的结果中强阳性、中阳性、弱阳性、阴性分别为48.67%、18.58%、31.86%、0.88%,检测猪蓝耳病抗体合格率99.12%;ELISA检测猪蓝耳病抗体合格率95.58%,符合率为96.43%。胶体金免疫层析试纸条能够评价猪蓝耳病疫苗临床免疫状况,可进行猪蓝耳病抗体的定性检测。     

规模猪场主要疫病抗体水平监测及免疫效果分析

采用血凝试验和酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,检测了杭州市 2 4个规模猪场 91 1份血清中的猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖和呼吸综合征 (蓝耳病 )抗体效价。结果表明 :规模猪场猪瘟免疫效果较好 ,免疫合格率达 85 6 % ,其中母猪免疫合格率 (92 6 % )高于种猪 (78 2 % )和肥育猪(62 4% ) ;猪伪狂犬病抗体阳性场达 2 0个 ,猪抗体阳性率为 40 0 7% ,其中母猪为 50 2 4 % ;猪蓝耳病抗体阳性血清数为 362份 ,占 39 74% ,其中 ,种猪最高 ,为 50 6 % ,其余依次为肥育猪 (48 3 % )和母猪 (35 4% ) ,猪蓝耳病抗体阳性场数为 1 7个 ,占 70 83 %。     

某规模化猪场三种重大疫病血清抗体检测结果分析

河北省某规模化猪场为了解猪重大疫病疫苗免疫效果,实时监测其群体免疫状况,优化疫苗免疫程序,及时发现存在问题及潜在风险,应用韩国金诺(MEDIAN)公司猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病gE抗体检测试剂盒,对该猪场送检的71份血清进行抗体检测。结果显示,猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病gE抗体总体阳性率分别为49.30%、52.11%和4.22%。基于检测结果,对该猪场免疫状况进行了分析,并提出来免疫整改建议,为该场的猪病免疫程序制定提供了科学指导。     

规模猪场疫病实验室诊断分析实例

对某猪场送检的血清和病料进行了猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病野毒抗体以及猪瘟、蓝耳病原的检测。结果表明,该场母猪猪瘟抗体水平很差;蓝耳病毒抗体水平较高,但为野毒感染产生;伪狂犬病毒抗体方面,有3份样本存在野毒抗体;保育猪没有猪瘟病毒感染,但蓝耳病毒检测结果为阳性。最后,笔者对该猪场的免疫情况以及发生的疫情进行了全面的分析讨论,提出了猪场疫苗免疫接种工作的思路与方法。     

蓝耳病疫苗对猪瘟弱毒疫苗免疫效果的影响

为了探明猪蓝耳病阳性场猪蓝病TJM-F92株弱毒疫苗是否对猪瘟疫苗免疫效果存在影响,按照不同的免疫模式将试验动物分为7组,在注射疫苗前(第0周)、注射疫苗后(第2,4,6周)采集血样,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组试验猪猪瘟、蓝耳病抗体水平,用流式细胞术检测各组猪的淋巴细胞亚群水平,从体液免疫和细胞免疫两个方面分别验证猪蓝耳病阳性场猪蓝耳病TJM-F92株弱毒疫苗对猪瘟疫苗的免疫效果是否有干扰作用。结果表明:猪蓝耳病阳性猪场蓝耳病弱毒疫苗对猪瘟疫苗体液免疫和细胞免疫应答干扰作用不明显(P0.05),说明在蓝耳病阳性猪场猪蓝耳病TJM-F92株弱毒疫苗可以和猪瘟疫苗同时免疫。     

血清学结合病原RT-PCR检测对猪蓝耳病的诊断

湖南某猪场去年8月中份开始保育仔猪发病,临床症状表现猪群食欲下降、发热,呼吸急促、全身体表发红等．发病期间采用抗应激、抗感染措施,可缓解疫情,但下一批保育仔猪还会出现同样的疫情。同年10月初通过对母猪和仔猪血清学检测和病原检测,母猪的蓝耳病抗体阳性率仅为44．4％、阴性率56．6％、25日龄仔猪蓝耳病抗体阳性率12．5％、阴性率87．5％,60日龄仔猪蓝耳病抗体阳性率100％;病原RT-PCR检测结果发现在保育猪血液中存在蓝耳病毒感染。经了解该猪场去年5月中旬以前对种猪群进行蓝耳病疫苗接种。商品猪没有接种蓝耳病疫苗,而血清学检测,仔猪从哺保育初期到后期蓝耳病抗体阳性率显著上升,说明其间感染了蓝耳病毒。结合病原RT-PCR检测结果,确诊这次猪的疫情是蓝耳病感染引起的一次猪疫情。     

闽北地区猪伪狂犬病抗体检测分析

为了解猪伪狂犬病在闽北地区的流行情况,整理并分析2015年度血清抗体检测数据。采用ELISA检测方法对闽北地区45个规模化猪场进行检测分析,通过检测样品血清中伪狂犬病gE抗体和gB抗体的水平进行结果判定。结果显示：送检的45个规模化猪场,伪狂犬病gE抗体阳性场达25个,猪场阳性率达55.6%;共检测1304份血清,其中伪狂犬病gE抗体阳性213份、可疑24份、阴性1067份,抗体阳性率达20.6%。从伪狂犬病gE抗体阴性猪场抽检猪伪狂犬gB抗体380份,gB抗体阳性258份,猪群伪狂犬病抗体保护率仅有67.9%。     

采用不同血清学检测方法对猪蓝耳病免疫效果调查

本文采用猪蓝耳病通用型抗体ELISA检测法和猪蓝耳病通用型抗体快速检测卡检测法(胶体金法),对180份已免高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征苗的猪血样进行免疫抗体检测。结果显示,采用ELISA检测法检测的猪蓝耳病免疫抗体阳性率为82.2%;用胶体金法检测的猪蓝耳病免疫抗体阳性率为60.6%。二者相比,阳性符合率高(100%)即胶体金法抗体滴度大于1∶40以上者在ELISA法检测中为阳性;阴性符合率低即胶体金法抗体滴度大于1∶20小于1∶40之间者在ELISA法检测中也为阳性,只有小于1∶20者2种方法检测结果都为阴性。胶体金法简单,快速,易操作,可用于乡镇畜牧兽医站或养殖场的自行检测。     

山东省莱州市部分猪场猪瘟和蓝耳病血清抗体检测

猪瘟和蓝耳病是影响我国养猪业的重大疫病,对其进行定期检测极为重要。为了解规模猪场的猪瘟和蓝耳病的免疫合格情况,2017年4—8月,采用两阶段随机抽样结合便利抽样方法,采集莱州市6个规模猪场的629份血清样品,通过ELISA方法进行猪瘟和蓝耳病免疫抗体水平检测。结果显示:6个猪场的猪瘟和蓝耳病抗体平均阳性率分别为82.19%和92.85%,均高于国家规定的70%的基本要求,但有1家猪场的猪瘟抗体合格率未达到国家规定的最低标准,保育猪群的猪瘟和蓝耳病抗体合格率整体偏低。检测结果表明:莱州市猪场猪瘟和蓝耳病的免疫效果较好,猪群基本能够得到有效保护,但对于抗体合格率偏低的猪场以及保育猪群应注意加强猪瘟和猪蓝耳病的免疫和抗体监测。     

山东省某规模化猪场主要疫病抗体检测结果与分析

为了解某规模化猪场主要疫病的免疫效果或感染情况,实时监测猪群免疫状态,及时发现目前存在问题及潜在风险,从猪群中采集血样93份,分离血清,应用MEDIAN公司生产的猪瘟、猪蓝耳病、猪O型口蹄疫抗体检测试剂盒,以及IDEXX公司生产的猪伪狂犬病病毒g B与g E抗体检测试剂盒,对该场主要疫病血清抗体进行检测。结果显示,猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病g B、猪O型口蹄疫抗体总体阳性率分别为79.57%、79.57%、98.92%、79.57%;种公猪、后备母猪、经产母猪及哺乳仔猪4种疫病抗体阳性率较高,保育猪除蓝耳病及伪狂犬病g B抗体阳性率较高外,猪瘟及O型口蹄疫抗体阳性率较低,分别为62.5%及66.67%;该场猪伪狂犬病g E抗体阳性率高达83.87%,且各类猪群中阳性猪所占比例均较高。在综合分析检测结果和猪场免疫程序的基础上,对该猪场主要疫病的免疫提出了一些调整意见,以化解疫病发生的风险。     

云南禄丰部分规模化猪场猪蓝耳病血清学调查

为了了解禄丰地区部分猪群中蓝耳病病毒感染情况及疫苗免疫情况,为蓝耳病的防控提供参考,试验用ELISA方法对云南禄丰部分规模猪场进行了猪蓝耳病血清抗体的检测,共检测8个规模化猪场的150份血清。结果显示:8个规模化猪场猪蓝耳病抗体阳性率分别为100%,93.30%,90.00%,82.76%,83.33%,14.70%,9.10%和3.70%;蓝耳病抗体平均值分别是0.117,1.395,1.115,0.036,0.075,0.603,1.286和0.758,离散度分别是0.164,0.566,0.527,0.071,0.061,0.691,0.548,0.577。结果表明不同猪场的猪蓝耳病阳性率及抗体水平存在一定差异,同时调查表明:云南禄丰地区大部分规模猪场的猪群蓝耳病免疫效果合格,同时也存在小部分猪群蓝耳病免疫效果欠佳的情况。     

规模化猪场猪圆环病毒2型感染的实验室诊断

为了确诊贵州省某规模化猪场保育仔猪异常死亡原因,从怀孕母猪、产房母猪、后备母猪、种公猪、哺乳仔猪、保育仔猪6个猪群采集90份血清样本采用ELISA方法分别进行血清抗体检测,并对采集的90份血清样本和1份病死猪淋巴结组织采用荧光PCR方法进行病原学检测。结果:6个猪群综合的猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒g B蛋白、伪狂犬病病毒g E蛋白血清抗体阳性率分别为87.78%、70.00%、88.89%、4.44%;猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒病原核酸检测显示阴性,猪圆环病毒2型病原核酸检测淋巴结组织样本显示阳性。试验结果表明,引起该猪场保育仔猪死亡的原因为猪圆环病毒2型感染。同时,怀孕母猪群出现了伪狂犬病病毒g E蛋白抗体阳性,提示怀孕母猪群可能存在猪伪狂犬病野毒感染。     

几种常见猪病抗体水平检测分析

检测猪蓝耳病抗体血清1552份、猪瘟抗体血清2180份、猪圆环病毒抗体血清454份、H1N1猪流感抗体血清462份、猪肺炎支原体抗体血清488份、猪放线杆菌胸膜肺炎抗体血清116份.结果表明,规模猪场猪蓝耳病抗体阳性率较高,母猪达92%,肉猪达82%,小规模自繁自育场为30%,发病隐患较大;猪瘟抗体检测,规模猪场母猪抗体阳性率达95%,其余均在60%以下(国家规定抗体合格率≥70%),发病隐患较大;圆环病毒抗体检测,无论规模场或自繁自育场,阳性率均在60%以上.另外,猪流感、肺炎等症小规模猪场感染较为严重;胸膜肺炎则规模猪场感染较为严重.     

猪繁殖与呼吸综合征的监测及其防控

为评价ELISA抗体检测对蓝耳病疫情预警以及相应防控方案的可行性,对疑似存在蓝耳病疫情风险的某规模化猪场进行抗体检测。结果显示:该场猪蓝耳病抗体离散度大,S/P值≥2.6的比例占检测数的30.4%,表明该场存在蓝耳病感染风险,并通过RT-PCR检测病原得到证实。对该场母猪群及其仔猪采取活苗紧急免疫防控后,该场疫情得到有效缓解,仔猪存活率由原来的48%提高到88%。结论:蓝耳病抗体ELISA检测具有监测预警作用,采用活疫苗免疫防控蓝耳病方案是可行的。     

一起暴发猪蓝耳病继发猪瘟和猪圆环病毒病的诊治报告

猪蓝耳病(繁殖与呼吸综合征)、猪瘟及圆环病毒病一直是对猪场造成严重损失的疾病,近期在山东某猪场爆发三者混合感染的情况,对猪场造成了巨大的损失,无菌采取病料3份,进行PCR检测诊断,结果显示:猪瘟、猪蓝耳病的3份病料的PCR结果均为阳性,猪伪狂犬病均为阴性,猪圆环病毒病的检测只有1份显示阳性,其他2份为阴性。