三十烷醇对蛹虫草菌丝生长和多糖含量的影响

研究了三十烷醇(TA)在不同浓度下对蛹虫草液体培养的影响,通过测定菌丝球大小和密度、菌丝体生物量、直径和虫草多糖的含量,确定了TA的最佳使用浓度,并对各浓度下蛹虫草的生长情况进行了分析与讨论。结果表明,与对照组相比,当TA质量浓度为0.5 mg·L~(-1)时,菌丝体湿重提高了45.17%,菌丝体干重增加了44.49%,胞外多糖提高了173.1%,胞内多糖增加了305.7%。当TA质量浓度超过0.5 mg·L~(-1)时,促进作用均越来越小,当TA质量浓度超过1.0 mg·L-1时,上述各项指标均小于对照组。     

燕子掌叶片再生体系的建立

以燕子掌叶片为试材,采用植物组织培养方法,研究了消毒时间、不同浓度2,4-D、6-BA、NAA对燕子掌再生的影响。结果表明:叶片用70%~75%的酒精浸泡10~15s,再用0.1%HgCl2消毒12~15min,具有较低污染率和较高的存活率;用MS+1.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1)2,4-D进行不定芽诱导,平均可以产生13.7个不定芽;不定芽在MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1)+GA30.5mg·L~(-1)中增殖倍数为11.0;在1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)或MS+IBA0.5mg·L~(-1)培养基中平均能产生9~11条根。     

不同激素配比对白及愈伤组织诱导、增殖和分化的影响

以白及为试材,以MS和1/2MS为基本培养基,研究了愈伤组织诱导、增殖和分化培养基中的最佳激素种类和浓度配比。结果表明:在MS中添加6-BA 1 mg·L~(-1)和2,4-D3mg·L~(-1)时白及愈伤的诱导率最高,达89.89%。2,4-D是诱导白及愈伤生成的关键激素,而在基本培养基中单添加6-BA时并不能诱导愈伤组织的生成,同时添加2,4-D和6-BA能有效促进愈伤的诱导,且愈伤诱导率随着2,4-D浓度的增加而逐渐增加,但优质愈伤率也随之降低。添加6-BA 0.1mg·L~(-1)和2,4-D 2mg·L~(-1)的增殖培养基中愈伤细胞的增殖率最高,30d的增殖倍数达7.457。在分化培养基中添加NAA和TDZ有利于白及愈伤组织分化,分化率随着二者浓度的增加而增加,且NAA的促分化效果优于TDZ。MS+2,4-D 2mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1)为最佳分化培养基,分化30d时其分化率为86.67%。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),B组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),C组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),D组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L~(-1)中进行生根培养。     

四种生长素对拟南芥根生长发育的影响

利用奈乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)和2,4-D 等4种生长素的不同浓度(0、0.01、0.02、0.05、0.1,0.15和0.2 mg/L)的溶液,分别在MS培养基上对拟南芥萌发的幼苗进行处理,对其生根情况进行测定,结果表明:4种生长素都能抑制拟南芥主根生长,促进不定根生长,2,4-D的抑制作用最明显;IBA与IAA的促进作用差异不显著;N从在0.05 mg/L时;促进作用最强.     

三角枫扦插生根过程中营养物质的动态变化

以三角枫插穗为试材,采用不同种类、浓度的生长素进行处理,分别于春夏秋3个季节进行扦插繁殖试验,并以夏插生根插穗的韧皮部为材料,研究三角枫扦插生根过程中营养物质含量的动态变化。结果表明:与对照(清水浸泡)比,用100mg·L~(-1) NAA+100mg·L~(-1) IBA浸泡插穗3h生根率最高(77%),生根指数为34.28cm;在插穗生根过程中,该处理与对照插穗韧皮部营养物质含量的动态变化趋势相似,可溶性糖含量的变化趋势为"下降-上升-下降-上升-下降"、可溶性淀粉含量为"下降-上升-下降-上升",可溶性蛋白质含量为"上升-下降-上升";100mg·L~(-1)NAA+100mg·L~(-1) IBA浸泡插穗3h明显提高了可溶性糖和可溶性蛋白质含量、促进了可溶性淀粉含量的降解转化;在缩短不定根发生周期方面,生长素处理无明显作用。     

美国红枫的组织培养与快繁技术

以美国红枫腋芽茎段为外植体,采用组织培养方法,研究了不同激素配比对美国红枫无菌体系的建立、启动、增殖、壮苗培养、试管苗生根移栽的影响。结果表明:带腋芽茎段最佳消毒方式为以70%酒精浸泡30s,1%升汞消毒6min,成活率和抽芽率最高,分别达到75.22%和95.13%;NAA对启动培养的影响大于6-BA,接种于培养基MS+NAA 0.05mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)中的外植体诱导率最高,为62.80%,培养基及激素的最佳配比为NN69+2,4-D0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),诱导率达到80.21%;增殖培养阶段的最佳培养基为NN69+NAA 0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),增殖系数为4.2;MS+2,4-D 0.1mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)能有效促进小苗的生长;生根培养最适培养基MS+NAA 0.1mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1),生根率达99.8%,生根条数达7.9,根长达6.5cm;练苗后移栽到蛭石+珍珠岩(1∶1)基质中,移栽成活率为75.2%。     

蛹虫草深层发酵产虫草素培养基的优化

以蛹虫草(Cordyceps militaris(L.)Link)NS-810为菌种,通过对接种量的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体一级种制作效果的影响;通过单次单因子试验和正交实验,优化深层发酵产虫草素的最佳培养基,筛选制备蛹虫草液体一级种和液体发酵生产虫草素的最佳工艺。结果表明:孢子浓度3.0×10~8 cfu·mL~(-1)时制作的母种最适合作为蛹虫草菌种扩大培养中的一级种子液;深层发酵的最佳培养基配方为葡萄糖25g·L~(-1)、土豆100g·L~(-1)、鱼蛋白胨18g·L~(-1)、(NH_4)_2SO_40.8g·L~(-1)、KH_2PO_41.0g·L~(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.5g·L~(-1)、蚕蛹粉5.0g·L~(-1)、维生素B118mg·L~(-1)、水1L。优化后虫草素的总产量为1 144.31mg·L~(-1),较基础培养基提高了1.46倍。分别以价格低廉葡萄糖和鱼蛋白胨作为发酵培养基的碳源和有机氮源,利于蛹虫草产业化发酵生产虫草素。     

不同花期喷施植物生长调节剂对石榴坐果及果实品质的影响

【目的】结合石榴头花、二花开花特性,探索高效提高石榴坐果率及果实品质的方法,为生产中提高石榴坐果率及果实品质提供依据。【方法】2017—2018年连续2 a(年),以‘突尼斯软籽’石榴为试验对象,采用完全随机区组试验设计,不同时期喷施不同浓度GA_3、NAA、CPPU、2,4-D,花柄涂抹不同浓度GA_3+2,4-D。调查坐果率,并测定其对果实品质的影响。【结果】2017年结果表明:头花始花期至盛花期(5月5日)单次喷施GA_330.0 mg·L~(-1)较对照坐果率提高48.3%,显著提高了石榴坐果率(p 0.01);GA_310.0 mg·L~(-1)和20.0 mg·L~(-1)在二花盛花期(5月18日)单次喷施较对照分别提高坐果率20.8%、31.5%,显著性提高石榴坐果率(p 0.05),但会导致大量功能性雄花不脱落;不同时期叶面喷施不同浓度NAA、CPPU均不能显著性提高石榴坐果率;叶面喷施2,4-D导致果实畸形,果皮极厚。2018年试验结果表明头花始花期至盛花期(5月5日)单次喷施GA_330.0 mg·L~(-1)显著性提高石榴坐果率(p 0.05),与2017年试验结果一致,且不影响石榴果实品质;涂抹GA_3(10.0 mg·L~(-1)、20.0 mg·L~(-1)、30.0 mg·L~(-1))+2,4-D(10.0 mg·L~(-1))于石榴花柄可显著性提高石榴坐果率,但可导致石榴籽粒硬度较对照增加。【结论】头花始花期至盛花期(5月5日)叶面喷施GA_3(30.0mg·L~(-1))可有效提高石榴坐果率,且不影响石榴品质;二花盛花期不适合通过叶面喷施激素类物质提高坐果率;花柄涂抹GA_3(10.0 mg·L~(-1)、20.0 mg·L~(-1)、30.0 mg·L~(-1))+2,4-D(10.0 mg·L~(-1))能显著性提高石榴坐果率,但会导致石榴籽粒硬度增加。     

两种植物生长调节剂对杜仲幼苗生长的影响

以杜仲种子为试材,研究了不同浓度萘乙酸(NAA),2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)处理后对杜仲幼苗生长的影响.结果表明:不同浓度的NAA、2,4-D对杜仲苗生长有不同的影响.在0.0001～1 mg/L的浓度范围内,NAA、2,4-D对杜仲苗茎的伸长及重量都表现出促进作用,但2,4-D的促进效果更显著;对根的影响,2,4-D在浓度升至0.1 mg/L处已显现出显著性抑制作用,而萘乙酸至1mg/L处才表现出抑制,且抑制效果不如2,4-D显著,表现杜仲根的生长对2,4-D更敏感.2种生长调节剂当浓度高至抑制根的生长时(NAA为1mg/L,2,4-D为0.1 mg/L)萌发的侧根数最多.     

蛹虫草菌丝体多糖体外抗氧化活性研究

通过摇瓶液体发酵获得蛹虫草菌丝体,采用脱脂、水提醇沉、去蛋白、脱色素、透析和冷冻干燥等一系列手段提取蛹虫草菌丝体多糖。利用羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和1,1—二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除实验,评价蛹虫草菌丝体多糖体外抗氧化活性。结果显示,蛹虫草菌丝体多糖对3种自由基均表现出较强的清除效果,其中对DPPH的清除力相对最强。随着浓度上升,其抑制自由基的效果均增强,呈现剂量正相关。该多糖对3种不同自由基抑制作用的IC50值分别为7.01 mg·m L-1、19.90 mg·m L-1和3.51 mg·m L-1。蛹虫草菌丝体多糖表现出良好的体外抗氧化活性。     

植物生长调节剂和蔗糖浓度对狼爪瓦松愈伤组织生物量及有效物质积累的影响

以狼爪瓦松愈伤组织为试材,采用正交实验的方法,研究了MS基本培养基浓度及6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)2种植物生长调节剂对狼爪瓦松愈伤组织生物量和有效物质含量的影响;同时,对适宜的蔗糖浓度进行了筛选。结果表明:MS+3.5mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA组合,最有利于愈伤组织生长和多糖、总酚及黄酮的积累;MS+3.5mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA培养基中加入30g·L~(-1)的蔗糖时,愈伤组织生长最佳,有效物质含量最高,在此蔗糖浓度下狼爪瓦松愈伤组织可生产711.2mg·L~(-1)多糖、165.1mg·L~(-1)总酚和154.5mg·L~(-1)黄酮。     

氮源和无机盐对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响

以小麦为主要栽培基质,通过添加不同的氮源和无机盐,选用优质蛹虫草菌株CM-16进行人工培养,探索这2个因素对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明:栽培过程中选用6g·L~(-1)的蛋白胨作为最佳氮源,子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量均较高,分别为43.1g·盒~(-1)、3.95mg·g-1和2.35mg·g~(-1)。无机盐则选择1.0mg·L~(-1)的硫酸亚铁最为合适,此时子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量分别为48.8g·盒~(-1)、4.98mg·g~(-1)和2.10mg·g~(-1)。     

以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

新疆加工型辣椒花药培养技术研究

以6个新疆加工型辣椒品种207、208、64、66、67、HT113为试材,以MSB培养基为基本培养基,附加不同植物激素浓度的NAA、2,4-D、TDZ、KT进行花药培养,研究不同植物激素处理对加工型辣椒花药愈伤组织和胚状体诱导的影响,以建立适应于新疆加工型辣椒的花药培养技术。结果表明:不同基因型辣椒的愈伤组织诱导率和出胚率均不同,愈伤组织诱导率为4.98%~29.65%,胚状体诱导率为0~6.88%。0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.1mg·L~(-1) TDZ和0.5mg·L~(-1) NAA+0.1mg·L~(-1) KT分别是愈伤组织诱导和胚状体诱导最适宜的激素组合;在新疆特有的气候条件和种植模式下,7月中旬前的花药接种培养最为适宜;胚状体继续发育成熟后,通过练苗移栽获得了56株单倍体植株。     

椒样薄荷叶片愈伤组织诱导与抗褐变

以椒样薄荷为试材,采用单因素试验法开展了基本培养基的筛选试验,并在基本培养基B5中添加不同植物生长调节剂组合和抗褐变剂,分析其对椒样薄荷愈伤组织形成的影响。结果表明:叶片愈伤组织诱导的基本培养基以B5为宜;植物生长调节剂以KT1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.5mg·L~(-1)为宜;以B5+KT 1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.5mg·L~(-1)为培养基时抗褐变剂以活性炭0.2g·L~(-1)为宜,椒样薄荷愈伤组织诱导率达到100%,褐变率为0.0%,愈伤组织生物量达到42.1g·L~(-1),建立了较理想的愈伤组织体系。     

杜鹃兰原球茎增殖培养条件

以杜鹃兰种子萌发的原球茎为试材,研究不同培养基、不同植物生长调节物质(6-BA、NAA和IBA)、活性炭、温度及光照强度对杜鹃兰原球茎增殖的影响。结果表明:1/2MS培养基为适于原球茎增殖的基本培养基;添加一定浓度的6-BA、NAA和IBA均有利于原球茎的增殖,IBA的浓度为1.0mg·L~(-1)时,原球茎增殖率较高,40d可达170.07%;适量添加活性炭对原球茎增殖有促进作用;温度及光照强度的控制对原球茎增殖是必需的。杜鹃兰原球茎增殖的适宜培养条件为1/2MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) IBA+0.5g·L~(-1)活性炭,温度为15℃,光照强度为2 000lx。     

红掌实生苗根段病原菌的抑制及再生体系的建立

以红掌实生苗根段为外植体,通过在培养基中添加抗生素来抑制病原菌的快速繁殖,并建立了完整的再生体系。结果表明:硫酸链霉素抑制病原菌的效果最好,其次是卡那霉素,庆大霉素抑菌效果最差;30mg·L~(-1)的硫酸链霉素因抑菌效果好,保持更高的根段活率而更适合在组织培养中应用;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1)+硫酸链霉素30mg·L~(-1),愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.8mg·L~(-1),丛生芽诱导最佳培养基为1/2MS+6-BA0.5mg·L~(-1),丛生芽生根最佳培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L~(-1),生根后的幼苗,移栽成活率高达100%。     

“嘎拉”苹果叶片愈伤组织的诱导

以"嘎拉"苹果单芽系组培苗叶片为外植体诱导愈伤组织,研究了愈伤组织诱导过程中植物生长调节剂种类及浓度配比、光照和黑暗条件以及继代天数对其形成及生长的影响。结果表明:各组合均能比较高效地诱导愈伤组织的形成,以MS+蔗糖30g·L~(-1)+2,4-D 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+BA 2.0mg·L~(-1)诱导效率最佳;愈伤组织的形成需要14~21d的暗培养,继代周期以15~30d为宜。     

促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累研究

以铁皮石斛原球茎为试材,为优化原球茎培养和提高有效物质的积累,研究了培养液中不同pH对原球茎生物量及有效物质含量的影响。同时,在培养初期向培养液中分别添加不同浓度的诱导子(壳聚糖、普鲁兰多糖)以及2种诱导子的混合液,以未加入诱导子的培养基作为对照,对原球茎生物量及有效物质含量进行了测定。结果表明:当培养液pH为5.8时,原球茎生长最好,且多糖(4.93g·L~(-1))和生物碱(3.15mg·L~(-1))生产量达到最高。30mg·L~(-1)壳聚糖和200mg·L~(-1)普鲁兰多糖单独处理,有利于原球茎中多糖和生物碱的积累。但当壳聚糖浓度为15mg·L~(-1),普鲁兰多糖浓度为100mg·L~(-1)混合处理后,发现原球茎中多糖和生物碱的积累量明显提高,多糖含量达到322.8mg·g-1 DW,生产量达到6.75g·L~(-1),而生物碱含量达到242.7μg·g-1 DW,生产量达到5.07mg·L~(-1)。因此,通过调节培养条件可有效地促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累,为铁皮石斛产品生产提供了一种新的材料。