中国特有濒危植物八角莲胚状体的发生及其植株再生研究

以我国特有濒危药用植物八角莲(Dysosma versipellis (Hance) M.Cheng)为试材,采用DPS软件正交设计法和SPSS的Duncan's multiple range test,研究了不同植物激素对其愈伤组织形成、胚状体诱导及植株再生的影响,以期为离体培养条件下快速诱导八角莲愈伤组织、胚状体及其植株的再生,以及将来深入研究真菌诱导子诱导八角莲活性成分鬼臼毒素累积的作用机理、信号调控机制和人工种子制作等提供参考依据.结果 表明:八角莲叶和叶柄最适合作为诱导愈伤组织的材料;植物激素对愈伤组织形成的影响效果从大到小依次为2,4-D＞ TDZ＞KT＞NAA＞2-ip,愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 1 mg·L-1 +NAA 0.05 mg·L-1 +TDZ 0.5 mg·L-1 +2-ip 1 mg·L-1;诱导颗粒状愈伤组织胚状体形成的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1,诱导率为71.33％;胚状体生根和植株再生培养基为MS+IBA 0.5 mg·L-1 +GA30.5 mg·L-1.     

正交实验法优选橡胶树花药愈伤组织诱导的研究

以橡胶树品种RRII105花药为外植体,研究了不同浓度2,4-D、KT、NAA及TDZ组合对橡胶树花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:最适合诱导橡胶树花药愈伤组织的培养基配方为MS+0.8mg/L 2,4-D+0.8mg/L KT+1.2mg/L NAA+0.0mg/L TDZ+60g/L蔗糖+5g/L琼脂,诱导率达94.00%,出胚率为14.25%。     

不同激素配比对白及愈伤组织诱导、增殖和分化的影响

以白及为试材,以MS和1/2MS为基本培养基,研究了愈伤组织诱导、增殖和分化培养基中的最佳激素种类和浓度配比。结果表明:在MS中添加6-BA 1 mg·L~(-1)和2,4-D3mg·L~(-1)时白及愈伤的诱导率最高,达89.89%。2,4-D是诱导白及愈伤生成的关键激素,而在基本培养基中单添加6-BA时并不能诱导愈伤组织的生成,同时添加2,4-D和6-BA能有效促进愈伤的诱导,且愈伤诱导率随着2,4-D浓度的增加而逐渐增加,但优质愈伤率也随之降低。添加6-BA 0.1mg·L~(-1)和2,4-D 2mg·L~(-1)的增殖培养基中愈伤细胞的增殖率最高,30d的增殖倍数达7.457。在分化培养基中添加NAA和TDZ有利于白及愈伤组织分化,分化率随着二者浓度的增加而增加,且NAA的促分化效果优于TDZ。MS+2,4-D 2mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1)为最佳分化培养基,分化30d时其分化率为86.67%。     

芦笋组培快繁体系的建立

以芦笋高产品种"井岗701"的无菌茎尖为试材,采用正交实验设计方法,研究嘧啶醇、KT、2,4-D、脱落酸、6-BA和NAA等不同植物激素浓度组合对愈伤组织、胚状体以及幼苗诱导的影响。结果表明:MS+2,4-D 2.0mg/L+KT 1.0mg/L诱导愈伤组织效果最好,出愈率达到80%左右。MS+0.70mg/L嘧啶醇+0.10mg/L NAA+0.50mg/L KT诱导胚状体效果最好,诱导率高达95%。MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L诱导胚状体成苗率达到60%左右。室外移栽成活率高达90%,初步建立了芦笋由胚状体到幼苗的一步成苗体系。     

均匀设计法优化人参叶片愈伤组织诱导培养基

以人参叶片为试材,MS为基本培养基,采用均匀设计和DPS软件分析的方法,研究了2,4-D、KT、NAA、6-BA等4种不同激素组合对人参愈伤组织诱导的影响,以期筛选出诱导人参叶片愈伤组织的最佳激素组合。结果表明:人参叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2mg·L-1+NAA 0.66mg·L~(-1)+KT 1.0mg·L~(-1)。验证试验表明,在添加最佳激素组合的MS培养基中接种新的叶片外植体,30d后愈伤组织诱导率为93%,单个叶片外植体上愈伤组织小块平均数达1.82.     

不同生长调节剂对白刺花叶片愈伤组织诱导质量分析

以白刺花无菌苗叶片为试材,利用双因素正交实验设计,研究了不同生长调节剂对愈伤组织诱导效果的影响,以期筛选最佳的诱导培养基,为白刺花组培研究提供参考基础。结果表明:在MS培养基上,2,4-D与6-BA组合可诱导出较疏松型的愈伤组织,愈伤组织表面有瘤状突起且部分愈伤上有绿色芽点;2,4-D与KT组合也可诱导形成愈伤组织,但愈伤组织的生长及疏松度不及2,4-D与6-BA组合效果明显;NAA与6-BA,NAA与KT组合早期培养时在叶片边缘看到部分愈伤的生长,培养45d后愈伤开始褐化;在基本培养基研究筛选上,MB和B_5均能诱导愈伤组织,愈伤组织颜色稍显淡绿。2,4-D有利于白刺花愈伤组织的诱导,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖4%+琼脂0.7%,出愈率75.58%,愈伤组织出愈早,疏松,生长旺盛。     

木榄愈伤组织诱导影响因子研究

以木榄幼叶为外植体,进行其愈伤组织诱导的影响因子研究,通过灭菌条件、培养基成分、添加剂种类、外源植物激素浓度试验,比较外植体褐化率与愈伤组织诱导率。结果表明:75%乙醇灭菌30s后在2%(体积分数v/v)NaClO溶液灭菌20min是木榄幼叶表面消毒适宜条件;氨基酸培养基是基础培养基;45℃热激与添加1.0mmol·L~(-1)抗坏血酸均可降低褐化率;AA培养基+0.50mg·L~(-1) 2,4-D+0.50mg·L~(-1) TDZ+1.00mmol·L~(~(-1))维生素C或AA培养基+0.50mg·L~(-1) 2,4-D+0.50mg·L~(-1) CPPU+1.00mmol·L~(-1)维生素C均可得大于50%的愈伤诱导率。因此,克服外植体褐化与应用CPPU或TDZ作为细胞分裂素是木榄愈伤组织诱导成功的关键。     

南丰蜜桔胚性愈伤组织的诱导

以南丰蜜桔"杨小—26"花药为外植体,培养诱导胚性愈伤组织。结果表明:在不同取材时期和培养基条件下,胚性愈伤组织发生率是不同的。南丰蜜桔花药培养的取材最佳时期是单核靠边期;培养基LP+TDZ3.0mg/L+A1.03.0mg/L+NAA1.0mg/L+10mg/LAgNO3较适于胚性愈伤组织再生,再生率高达20.3%;培养基配方中AgNO3对胚性愈伤组织再生无显著影响。本研究首次报道了南丰蜜桔花药离体培养,诱导出胚性愈伤组织。     

小型西瓜花药愈伤组织诱导及防褐化研究

以8份不同基因型的小型西瓜为试材,研究了基因型、植物生长调节剂对花药愈伤组织诱导的影响及暗培养和抗坏血酸对花药褐化的影响,以期为西瓜单倍体育种提供参考依据。结果表明:8份西瓜材料中7个能够形成愈伤组织,愈伤组织诱导率为3.9%~35.6%;不同基因型对激素的响应不同,‘P15’在D5号培养基中(MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1))愈伤组织诱导率最高,‘M30’和‘M34’在D6号培养基中(MS+KT1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1))出愈率最高;黑暗培养48h对降低西瓜花药褐化作用最好;在诱导培养基中添加1.0g·L~(-1)抗坏血酸可降低花药褐化率。     

黄瓜(Cucumis sativusL.)花药培养

以卡罗尔、HH1-8-57与津绿农家乐3个不同基因型黄瓜品种为试材,在Kumar等、Song等和詹艳等试验研究基础上,设计试验分别探讨低温预处理时间、培养基成分(胚性愈伤组织诱导培养基、胚状体诱导培养基)和基因型等因素对黄瓜花药培养的影响。结果表明:在4℃低温预处理2d时,胚性愈伤组织诱导率显著高于其他处理;在MS+1.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+3%蔗糖+0.8%琼脂培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,达到81.3%;在MS+0.1mg·L-1NAA+3.0mg·L-16-BA+3%蔗糖+0.8%琼脂培养基上胚状体诱导率最高,为40.0%;基因型间胚性愈伤组织诱导率及胚状体诱导率差异显著,津绿农家乐品种胚性愈伤组织诱导率最高,达到81.1%,HH1-8-57胚状体诱导率最高,为40.0%。本研究从2份试材中成功地诱导出胚状体并获得了黄瓜单倍体再生植株。