高寒草甸魏斯氏乳酸菌的分离鉴定及理化特性研究简

 本试验对青藏高原藏北嵩草附着乳酸菌进行了分离培养，并利用传统培养法和１６ＳｒＲＮＡ序列分析对分离乳酸菌进行了鉴定，以期探讨高寒地区乳酸菌的发酵生物学特性并分离筛选优良发酵乳酸菌。试验共分离得到１７株乳酸菌，其中有６株菌为食窦魏斯氏乳酸菌（Weissella confusa），其余均为融合魏斯氏乳酸菌（Weissella cibaria）。分离出的融合魏斯氏乳酸菌菌株均能在４℃条件下生长，其中有５个菌株能在ｐＨ值为３的培养基中生长，且分离的食窦魏斯氏乳酸菌均能利用半乳糖，１０株融合魏斯氏菌均能够发酵利用阿拉伯糖。体现出高寒地区分离出的融合魏斯氏乳酸菌菌株具有耐低温，耐酸性强和发酵利用碳源广泛的特征。     

巴拉圭地区传统发酵乳制品中乳酸菌的分离鉴定

为获得更加丰富的乳酸菌资源，系统研究巴拉圭地区传统乳制品中乳酸菌的生物多样性，采用传统纯培养方法结合16S rRNA基因序列分析技术和系统发育进化关系分析技术对巴拉圭地区传统乳制品中乳酸菌进行分离纯化和种属鉴定。结果表明，来自巴拉圭地区的8 份传统乳制品中共分离得到79 株乳酸菌，分属于4 个属、7 个种，其中乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）为巴拉圭地区传统发酵乳中的优势菌种，占总分离菌株的68.35%。     

分泌抗金黄色葡萄球菌细菌素乳酸菌的分离鉴定

为分离和筛选产抗金黄色葡萄球菌乳酸菌素的优势乳酸菌,利用乳酸菌分离培养基MRS从收集的各种腌制菜汁中分离培养乳酸菌,通过细菌培养特性、革兰氏染色特点、生理生化特性初步鉴定,同时根据Genbank中乳酸菌的16SrDNA序列设计特异性引物,采用PCR方法进一步鉴定,并以金黄色葡萄球菌为指示菌对乳酸菌的发酵上清液进行抑菌特性研究。结果表明,从腌渍菜汁中分离获得90株产酸菌,通过形态学、生理生化特性和PCR鉴定,结果73株产酸菌为乳酸杆菌;分泌产物抑菌试验表明,有10株菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性,经酸排除和过氧化氢排除试验,仍然有5株乳酸菌的分泌产物具有抑制金黄色葡萄球菌活性。可见,从腌渍菜汁分离到的乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,主要是通过分泌乳酸菌素来发挥作用。     

西藏青贮用乳酸菌筛选分离及应用研究进展

西藏自治区地处青藏高原,虽然饲料原料资源丰富,但整体利用率不高。青贮处理可以有效贮存饲料,既可以节约饲料资源,也可以保存饲料中的营养成分。目前,西藏地区关于青贮用乳酸菌的研究已经由从传统乳制品中分离乳酸菌过渡到从多种天然青贮饲料中分离乳酸菌。对西藏地区青贮用乳酸菌的筛选分离及应用研究进展进行了综述,以期为加快以青贮分离乳酸菌菌株为来源的高原青贮用乳酸菌制剂的研发提供参考。     

乳酸菌的分离与保存方法

本实验从阿拉善左旗、伊金霍洛旗、杭锦旗、奈曼旗、科左中旗的牧民家采集各种乳样220份，并对各种样品进行了乳酸菌的分离和初步鉴定，分离到乳酸菌208株，对分离到的乳酸菌分别用定期移植保藏法、冻结法、冷冻真空干燥法进行保存，并将3种保存方法进行比较。     

全株水稻表面优势乳酸菌的筛选与鉴定

本试验旨在对全株水稻表面的优势乳酸菌进行分离、筛选与鉴定，以期挖掘出青贮优良菌种资源。利用平板涂布法对全株水稻上的乳酸菌进行分离，以生长速度和产酸能力进行初筛，以抗氧化能力（H2O2耐受能力、DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率）进行复筛，对筛选出的优势乳酸菌进行生理生化特性分析和分子生物学鉴定。结果表明，从水稻植株表面共分离得到154株乳酸菌，培养48 h后，有16株OD600nm值>2且pH值<4的乳酸菌，其中有9株乳酸菌具有抗氧化能力，综合表现最好的菌株是YMA3，对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率分别为72.23%、72.46%、86.33%。YMA3表现出较强的高温或酸性环境适应性，鉴定为粪肠球菌。     

乌鸡肠道中一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验采用添加碳酸钙的MRS培养基作为筛选培养基，从乌鸡肠道中筛选乳酸菌，并对分离到的菌种进行16S rDNA基因序列鉴定以及益生性能研究，测定其生长速率、产酸能力、耐酸和耐胆盐性能、抑菌能力及抗生素敏感性。试验结果表明：分离到的溶钙圈较好的菌株N为乳酸菌，分离菌株N产酸能力强，达到对数期的时间短，在低pH、高胆盐浓度时，仍具有较好生长活性。 [关键词] 乳酸菌|乌鸡|益生性能     

杂交构树青贮饲料中优良乳酸菌的分离与鉴定

本试验对杂交构树(Broussonetia papyrifera)青贮饲料中附着的优良乳酸菌进行了分离培养,利用传统微生物培养和16S rDNA序列分析对分离的乳酸菌进行鉴定,以期为提高杂交构树青贮品质提供乳酸菌资源.试验最终分离得到8株优良乳酸菌,其中菌株G4,G7,G9被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus...     

笼养成年蛋鸡盲肠中乳酸菌的分离与鉴定

试验从笼养蛋鸡盲肠内容物中分离乳酸菌,采用MRS平板分离乳酸菌,经过革兰氏染色、菌落形态观察及糖发酵生化管鉴定为乳酸菌种属。结果显示,分离出15株革兰氏阳性菌,经抑菌试验选出7株乳酸菌,发酵生化鉴定为绿色乳杆菌、瑞士乳杆菌、果糖乳杆菌、德氏乳杆菌、肠膜明串珠菌葡聚糖亚种、假肠膜明串球菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种。     

西藏地区藏北嵩草附着乳酸茵的理化特性

本研究以藏北嵩草（Kobresia littledalei）上附着的乳酸菌为研究对象，分离得到肠膜明串珠菌肠膜亚种两株，融合魏斯氏菌11株，食物魏斯氏菌6株，然后对这3种试验菌进行不同温度及pH条件下的生长试验、耐盐试验及糖发酵试验等生理生化特性的研究。结果表明，与常规条件下分离得到的相同菌株相比较，青藏高原极端环境中分离的魏斯氏乳酸菌和明串珠菌株都能在4~40 ℃的条件下生长，部分融合魏斯氏菌还可在50 ℃下微弱生长；耐酸碱试验表明，魏斯氏乳酸菌株都能在pH值为3.0和9.5的条件下生长；在耐盐性方面，部分魏斯氏菌可以在18%的NaCl下生长；在碳源利用方面，本研究提取的食物魏斯氏菌可利用半乳糖；融合魏斯氏菌可利用阿拉伯糖、蜜二糖、甘露醇。因此，藏北嵩草中所分离的乳酸菌比常规环境中的乳酸菌有较强的耐温性和耐酸碱性，而且能更广地利用碳源，从而为其在饲料青贮、酸奶发酵等方面的应用奠定基础。     

青稞秸秆青贮饲料中优良乳酸菌的筛选及鉴定

为筛选出适合于青藏高原青稞秸秆青贮用的优良乳酸菌菌株,研发新型青贮添加剂。分离了青藏高原青稞(Hordeum vulgare)秸秆青贮饲料中的乳酸菌,利用传统微生物培养法和16S rRNA序列分析法对乳酸菌进行鉴定,探讨其生物学特性,并筛选出优良的乳酸菌菌株。共分离获得4株同型发酵乳酸菌菌株,其中HG24,LH2为植物乳杆菌(Lactobacillusp lantarum),LH9为乳酸片球菌(Pediococcusacidi lactici),LH7为戊糖片球菌(Pediococcusp entosaceus)。分离出的乳酸菌菌株均能在5～30℃,pH 3.5～7.0及3.0%和6.5% NaCl培养基中生长良好,其中HG24,LH2在pH值为3的培养基中仍能生长,体现出分离的乳酸菌菌株具有耐低温、耐酸性和耐盐性强的特征。4株乳酸菌菌株中HG24和LH2产酸能力强、生长速率快,最适宜于用作青贮乳酸菌菌种。     

熊猫粪便中乳酸菌的分离鉴定与降胆固醇作用研究

为筛选出高效降胆固醇乳酸菌,试验利用MRS培养基从熊猫粪便中分离得到7株乳酸菌,采用硫磷铁比色法对7株乳酸菌的体外降胆固醇能力进行测定,并利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行系统的细菌学鉴定.结果表明:得到1株编号为X1的乳酸菌,该菌能够耐受pH值为3.0的酸性环境和0.3%的胆盐,在对数生长期降胆固醇能力最强,胆固...     

健康奶牛阴道乳酸菌分离筛选及益生特性

对产后健康奶牛阴道的乳酸菌进行分离筛选并对乳酸菌功能特性进行研究。采用传统方法对健康奶牛阴道内乳酸菌进行分离,通过抑菌试验对乳酸菌分离株进行筛选,并研究其产酸性能、抗生素敏感性,通过16SrDNA序列分析方法对分离株进行鉴定。最后获得4株乳酸菌分离株,经鉴定分别为唾液乳杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌和巴黎链球菌。4株菌株均可作为防治奶牛子宫内膜炎潜在的益生菌使用。     

羊瘤胃乳酸菌的分离鉴定及抗逆性筛选

为开发羊源乳酸菌菌种资源,从健康成年散养山羊瘤胃内容物中分离乳酸菌,经生化试验、基因测序以及同源性分析、构建遗传进化树等方法对分离出的乳酸菌进行鉴定,并通过耐酸和耐胆盐试验筛选抗逆性良好的乳酸菌.结果表明:从散养山羊瘤胃内容物中分离出11株乳酸菌,将其编号为R1～R9、R11和R12;其中R1、R2为杜氏肠球菌,R3、...     

健康奶牛肠道中乳酸菌的分离与鉴定

在奶牛饲料中添加优良的乳酸菌微生物制剂对于生产实践有着重要的意义。由于奶牛肠道中的乳酸菌本身已适应奶牛肠道中的环境,并且与奶牛肠道中的致病菌长期拮抗竞争,因而是奶牛饲料中添加益生菌株的最佳来源。本试验利用改良MRS培养基从20头健康的荷斯坦泌乳牛粪便中进行菌群的分离鉴定,采用16S rRNA基因序列对分离的乳酸菌进行鉴定。最终获得瘤胃乳杆菌、乳酸乳球菌等18株乳酸菌。该试验中分离得到的乳酸菌为多角度开发我国乳酸菌资源和微生态制剂在畜牧生产中的应用奠定基础。     

1株关岭黄牛瘤胃源发酵乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析

为了分离具有优良益生特性的牛源乳酸菌，探究其用于畜牧微生态制剂研发的潜力，试验采集健康关岭黄牛瘤胃液，接种于MRS肉汤培养基富集后分离乳酸菌，使用含0.3%胆盐的无菌PBS初步筛选耐胆盐乳酸菌，通过革兰氏染色镜检和16S rRNA测序进行鉴定，并对分离菌的生长特性、产酸能力、耐受特性、药物敏感性、抑菌特性及细胞黏附性进行分析。结果表明：经筛选分离得到1株菌，命名为NCO,经革兰氏染色、镜检和16S rRNA测序鉴定为发酵乳杆菌；该菌具有良好的生长和产酸能力，培养4 h后进入对数生长期，16 h后达到稳定期，培养28 h的菌液pH值为4.43;对低pH值、胆盐、胃液和肠液环境具有耐受能力；该分离菌对万古霉素、庆大霉素、卡那霉素、链霉素耐药；其培养上清液对金黄色葡萄球菌和鸡白痢沙门氏菌具有极强的抑制作用；该分离菌对Caco-2细胞的黏附数量为43.5 cfu/个，具有一定黏附性。说明分离菌NCO具有优良的生物学特性，有潜力作为优良微生态制剂的候选菌株。     

肉牛阴道益生乳酸菌功能性评价

本文旨在从肉牛阴道中分离筛选益生乳酸菌,并对其功能进行评价,为开发微生态制剂治疗生殖道感染疾病奠定基础。采用传统培养方法从肉牛阴道中分离乳酸菌,并对其抑菌能力、抑菌物质、产酸能力和抗生素敏感性进行检测,通过16S r DNA序列分析方法对乳酸菌分离株进行鉴定。结果表明,通过体外试验获得4株乳酸菌,坚强肠球菌Y1抑菌能力最强,乳酸杆菌Y5的产酸能力强于其他菌株,4株乳酸菌均对氨苄西林和万古霉素敏感。研究结果表明,4株乳酸菌可作为潜在的益生菌株治疗母牛生殖道感染疾病。     

乳酸菌胞外多糖的研究

介绍了乳酸菌胞外多糖研究，主要包括乳酸菌胞外多糖的种类和合成、遗传调控、生理功能、分离纯化和结构分析、构效关系及应用。     

鸡消化道乳杆菌的分离及鉴定

用ＭＲＳ培养对４０日龄ＳＰＦ鸡及健康鸡的嗉囊，十二指肠，空肠，盲肠中的乳酸菌进行分离和计数。经过分离和纯化获得６种乳酸菌，一株为球菌，五株为杆菌，分别命名为ＣＸ００１，ＣＸ００２，ＣＸ００３，ＣＸ００４，ＣＸ００５和ＣＸ００６。根据生长速度，耐酸耐胆汁对肠膜粘附试验，我们筛选出两种乳杆蓖ＣＸ００４和ＣＸ００６，作为益生素候选菌种。     

组学技术在乳酸菌分离鉴定及功能研究中的应用

乳酸菌具有黏附宿主细胞或黏膜、抑制病原菌生长、维持机体微生态平衡、增强宿主免疫力等促进宿主健康的作用，同时在食品工业、抗菌剂生产和体内发酵中也发挥重要作用，但目前对乳酸菌发挥益生作用的具体分子机制的描述不多。为探明乳酸菌自身及其在宿主中的新功能和调控机制，可采用组学技术进行研究。根据中心法则衍生出的组学方法包括基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学。单组学技术在乳酸菌研究中的应用可深入探索乳酸菌发挥的功能及其作用机制。多组学技术的应用可突破单一组学技术的局限性，从不同维度综合分析乳酸菌的潜在功能，进一步预测乳酸菌自身及其在宿主中发挥的作用。作者综述了几种常用于乳酸菌分离鉴定及功能研究领域的组学技术，阐述了多组学技术在乳酸菌功能及其机制研究中的应用概况，为进一步探明乳酸菌的潜在功能提供可行的技术方法和方向。