豚鼠对不同剂量猪细小病毒灭活苗的抗体反应

我研究所研制的猪细小病毒(PPV)AEI灭活苗对预防因PPV引起的母猪繁殖障碍病有良好的效果。该疫苗的效力检验以豚鼠为最易感。本文采用PPV灭活苗的不同剂量,分别为1ml二次、0.5ml二次、0.5ml一次和1ml一次,免疫PPV HI阴性豚鼠,观察豚鼠抗体反应的情况。现报告如下。一、材料和方法 1、材料:7批PPV AEI灭活苗,按本所“猪细小病毒AEI灭活疫苗的制造和检验试行规程”制做,经检验质量合格。     

猪细小病毒油佐剂灭活苗对阳性后备母猪免疫效果观察

猪细小病毒病是一种由猪细小病毒(PPV)引起的母猪繁殖机能障碍症,主要造成初产母猪隐性流产和产死胎。1988年起,我们抽检六个生猪基地母猪群,均为阳性,并应用上海市畜牧兽医研究所研制的猪细小病毒油佐剂灭活苗对后备母猪进行预防注射,有一定效果。1991年我县某供港猪场对后备母猪的预防效果进行了系统观察。 一、材料 1、猪细小病毒油佐剂灭活苗:由上海市农科院畜     

猪细小病毒灭活疫苗研究(简报)

1983年我们在上海地区分离到猪细小病毒(PPV),并进行了鉴定,结果见以前的报告。 1984年起,我们和嘉定县种畜场协作又进行了猪细小病毒灭活疫苗的研究,研制成一种灭活疫苗,现将研究结果简述如下。一、灭活苗的制备用上海分离的PPV S-1毒株的猪睾丸(ST)传代细胞株适应毒作为制苗用种毒,用转瓶培养技术增殖ST细胞,当瓶壁的2/3～3/4长满单层时接种病毒,37℃培养,待50％细胞出现病变时收获培养液作血球凝集试验     

猪细小病毒病毒样颗粒研究进展

猪细小病毒(PPV)是引起母猪繁殖障碍和仔猪死亡的主要病原,疫苗免疫预防是控制该病的主要手段。由于对生物安全的担心,目前国内使用的疫苗仍以灭活苗为主。病毒样颗粒(VLPs)疫苗以其安全性高、免疫原性好成为各类病毒疫苗研究的热门方向。猪细小病毒病毒样颗粒(PPV-VLPs)是不含PPV DNA的空衣壳结构,由PPV VP2结构蛋白体外自行组装形成,形态上与天然病毒粒子相似,具有很强的免疫原性和生物学活性。论文就VLPs疫苗的免疫机制及PPV-VLPs的组装及其在国内外的研究进行综述,为PPV-VLPs研究提供参考。     

猪伪狂犬病、猪细小病毒病及猪流行性乙型脑炎多重PCR诊断方法的建立

根据Genbank上已发表的猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)基因序列，用Array Designer2．0软件设计并合成了PRV gB、PPV VP2、JEV C基因片段的3对引物，以PRV Fa株、PPV B2株、JEV SA14-14-2株细胞培养物提取棱酸人为混合后作为模板，筛选PCR反应条件，扩增出长度分别为324bp、471bp和238bp的3条特异性片段，建立了检测3种病毒的多重PCR方法。应用该方法对PRVFa、PRV渝A、8F20、BUK株、德国Bartha-K61株、PRV Ea株、PRV疫苗毒，PPV132株、PPV SR标准株SR-1、SR-2、SR-3，JEV SA14-14-2株的病毒核酸进行扩增，均获得了特异性的目的片段，而扩增PRRSV、CFSV、PCV-2及相应的培养细胞核酸结果均为阴性。对PRV Fa、PPV B2和JEV SA14-14-2的最低检出量分别为17．5pg、13．7pg和20pg的DNA或cDNA。该试验方法适合对PRV、PPV和JEV的联合检测和鉴别诊断。     

猪乙型脑炎病毒EⅢ与猪细小病毒VP2基因的串联表达及免疫原性

通过重叠PCR的方法将猪细小病毒(PPV)VP2基因和猪乙型脑炎病毒(JEV)EⅢ基因通过Linker连接,并克隆至真核表达载体pCI-neo,得到重组质粒pCI-VP2-EⅢ。将重组质粒pCI-VP2-EⅢ转染Vero细胞,其表达产物通过RT-PCR和间接免疫荧光试验的方法检测出目的基因的转录与表达。质粒pCI-VP2-EⅢ在无免疫佐剂参与的情况下,免疫6～8周龄的BALB/c小鼠,同时设空质粒接种组,猪细小病毒灭活苗和猪乙脑弱毒苗免疫组及磷酸盐缓冲液接种组作为参比对照。结果表明,pCI-VP2-EⅢ免疫组,在二免后1周产生JEV和PPV的特异性抗体,三免后达到高峰;对ConA有显著的反应性,且与对照组差异明显;通过流式细胞仪检测,CD3+T、CD4+T显著高于猪细小病毒灭活苗免疫组和对照组(P<0.05),略低于乙脑减毒苗免疫组,但CD8+T显著高于其他试验组(P<0.05),这表明pCI-VP2-EⅢ接种后可能主要是以CD8+T淋巴细胞介导的细胞免疫。     

猪蓝耳病灭活苗应用对相关疫病免疫控制的影响

在有猪高热病病史的猪场开展以高致病性猪蓝耳病(PRRS)灭活苗为主的免疫防控试验。结果表明PRRS阳性场免疫高致病性猪蓝耳病(NVDC-JXA1株)灭活苗与猪蓝耳(SD1株)灭活苗均产生了效果,且两者基本一致。灭活苗免疫均未出现明显副反应,但NVDC-JXA1株疫苗免疫组(HP)猪免疫发热持续时间相对长于免疫对照组SD1株苗,且其PRRSV感染率要极显著地高于免疫对照组(SD)和空白对照组(B)(P<0.01)。PRRS灭活苗对PRRS阳性场猪瘟体液免疫效果有显著提高(P<0.05),并且不影响伪狂犬(PR)弱毒苗、口蹄疫(FMD)灭活苗的体液免疫应答效果及猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体阳性率。高水平PCV2母源抗体能极显著保护仔猪免受PCV2感染或延迟其感染时间(P<0.01)。     

豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒N株弱毒苗接种豚鼠，观察豚鼠对PPV N株弱毒苗的抗体反应。结果4种不同剂量和3个不同批次的PPV N株弱毒苗接种豚鼠后第14天均产生抗体反应，其PPV HI效价在1：16－1：64之间，0.1ml和1ml 剂量接种豚鼠产生的PPV HI抗体水平相近，抗体持续长达12个月以上。在4℃保存0天、12个月和－20℃保存2年、3年的PPV N株弱毒苗接种豚鼠，其PPV HI价在1：16－1：32之间，说明该苗在4℃至能保存12个月，－20℃能保存3年以上。比较了不同批次疫苗接种猪和豚鼠所产生的抗体反应，结果两者相似。用3批引起豚鼠产生抗体反应的PPV N株弱毒苗接种768头后备母猪，共产仔7136头，其中健活仔6575头，平均每窝产健活仔8．56头，产死仔仅0．73头。证明豚鼠是监测PPV弱毒苗抗体的首选实验动物。     

猪细小病毒病防控

<正>猪细小病毒病是由猪细小病毒（PPV）引起的，以怀孕母猪发生流产、死产、产木乃伊胎等为特征的繁殖障碍类疾病。该病毒基因组为单股线状DNA，无囊膜，抵抗力很强，90℃下5 min内不能使其灭活。根据基因型差异，PPV至少可分为6个亚型，包括PPV1、PPV2、PPV3、PPV4、PPV5以及猪博卡病毒（PBo Vs）。1流行特点     

猪细小病毒血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清的制备与鉴定

猪细小病毒（Porcine Parvovirus,PPV）血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制备的抗原乳化后免疫豚鼠制备阳性血清,同时用未免疫的阴性豚鼠制备阴性血清。对抗原、阳性血清和阴性血清进行鉴定,结果表明,制备的PPV血凝抑制试验抗原HA效价达1:512;阳性血清HI效价达1:1024;阴性血清HI效价＜1:8,且特异性均良好。利用制备的血凝抑制试验抗原、阳性血清与不同PPV疫苗株的灭活抗原、阳性血清进行交叉反应试验,结果表明,制备的抗原与阳性血清具备良好的血清学交叉反应性,可用于PPV制品的统一评价。