穴位埋线对运动性疲劳模型大鼠肝肾功能的影响

采用递增跑台训练的方法构建运动性疲劳大鼠模型,将大鼠随机分为埋线Ⅰ组、埋线Ⅱ组、空白组、跑台组、埋线跑台Ⅰ组、埋线跑台Ⅱ组,并对各组大鼠肝脏、肾脏进行采集及相关生化指标的测定。结果显示:对于运动性疲劳大鼠,穴位埋线可抑制肾脏指数升高(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平(P<0.01),降低肌酐(CREA)、UREA水平及皮质醇(CORT)浓度(P<0.05)。结果表明:穴位埋线可在不同程度上保护疲劳大鼠肝肾功能免受损害,从而改善机体耐力,使失衡的功能关系趋向正常化和表达最大化。     

促性腺激素抑制激素对SD大鼠性腺生殖功能与糖代谢的影响

【目的】 探究促性腺激素抑制激素（GnIH）对SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢的影响,以及SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢之间的相关性。【方法】 将36只SD大鼠随机均分为对照组（0.9％生理盐水）、1 μg/100 μL GnIH组（Ⅰ组）、10 μg/100 μL GnIH （Ⅱ组）,每组12只（雌雄各半）。每天07：00和19：00注射生理盐水或GnIH （200 μL/次）,连续注射14 d后测量大鼠体重,计算肥胖程度,麻醉处死后采集卵巢和睾丸,称重并计算卵体比和睾体比;运用阴道涂片法观察雌性大鼠发情周期的变化;显微镜下观察并计算雄性大鼠精子活力;HE染色观察卵巢和睾丸组织变化;用实时荧光定量PCR法检测卵巢和睾丸中糖代谢基因胰岛素受体（IR）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）和炎症相关因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的表达水平,并用SPSS 22.0软件分析生殖功能和糖代谢之间的相关性。【结果】 与对照组相比,Ⅰ组雌性SD大鼠和Ⅱ组雄性SD大鼠肥胖程度均显著升高（P<0.05）;Ⅱ组卵巢大小/重量、卵体比显著升高,睾丸重量、睾体比显著下降（P<0.05）。HE染色结果显示,与对照组相比,Ⅱ组雌性大鼠卵泡呈囊性扩张,颗粒细胞层减少,卵泡腔变大;Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠的生精小管均出现空泡样改变,生精细胞排列紊乱、层次减少。与对照组相比,Ⅱ组大鼠发情前期的持续时间显著延长（P<0.05）、精子活力显著下降（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ组雌性大鼠GLUT4基因的表达量极显著下降（P<0.01）、Ⅱ组中IR基因的表达量显著降低（P<0.05）,Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠GLUT4基因的表达量均极显著降低（P<0.01）;Ⅰ组雌性大鼠TNF-α、IL-1β基因和雄性大鼠IL-1β基因的表达量均显著升高（P<0.05）,Ⅱ组雌、雄大鼠TNF-α基因的表达量均极显著升高（P<0.01）。相关性分析结果显示,腹腔注射GnIH后,雌性大鼠的卵体比与GLUT4基因表达水平呈极显著正相关（P<0.01）,与IR基因的表达水平呈显著正相关（P<0.05）;雌性大鼠的发情周期与GLUT4基因表达水平呈极显著负相关（P<0.01）;雄性大鼠睾体比与GLUT4基因表达水平均呈显著正相关（P<0.05）,而精子活力与GLUT4基因表达水平均呈极显著正相关（P<0.01）。【结论】 腹腔注射GnIH能够抑制大鼠的生殖功能和导致糖代谢功能紊乱,而且GnIH可能参与性腺能量代谢与生殖功能的交叉对话,是能量代谢与生殖功能的新型联络因子。     

Glut4突变调控脂肪重分布及肌纤维重塑的机制研究

旨在探讨Glut4基因突变后骨骼肌能量代谢及肌纤维转化的分子机制。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建Glut4^Q177L突变鼠。选取22周龄健康的野生雄鼠和Glut4^Q177L突变雄鼠,即试验分为两组,每组3只,3个重复,进行表型评价和糖耐量、胰岛素耐量试验;荧光定量检测两组小鼠腓肠肌葡萄糖转运蛋白、脂代谢、肌纤维类型相关调控基因的表达差异;Western blot测定腓肠肌AMPK及其磷酸化蛋白含量。结果表明,突变鼠皮下脂肪和附睾脂重量显著低于对照组（P<0.05）;突变鼠糖耐量曲线下面积极显著增加（P<0.01）,表明其糖耐量受损;突变鼠血清中甘油三酯的含量显著下降（P<0.05）。相较于野生型小鼠,Glut4^Q177L突变鼠腓肠肌中Glut4、Glut1和Glut12等多个葡萄糖转运蛋白表达量显著升高（P<0.05）;葡萄糖摄取受限导致调控能量代谢关键基因AMPK在mRNA、蛋白和磷酸化修饰水平均显著升高（P<0.05）,同时促进与脂肪酸摄取与合成代谢相关的CD36和ATGL等基因表达上调（P<0.05）;慢速氧化型肌纤维（I型）和快速氧化型肌纤维（IIa型）相关基因表达极显著升高（P<0.01）,而快速酵解型纤维（IIb型）相关基因表达显著降低（P<0.05）。本研究结果显示,Glut4葡萄糖结合关键位点突变降低了骨骼肌和脂肪葡萄糖摄取能力,通过上调其它转运蛋白增加葡萄糖摄取;激活AMPK信号通路及分泌肌细胞因子调控脂肪分解以满足能量需求;促进线粒体丰富的氧化型肌纤维生成以提高能量利用效率。Glut4突变不仅可以为骨骼肌胰岛素抵抗提供有效的动物模型,还可以为家畜生物育种提供基因编辑参考位点。     

白肉灵芝水提物对脑缺血大鼠海马神经元的保护作用

试验旨在探讨白肉灵芝水提物（Ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE）对脑缺血后海马神经元的保护作用及机制。将50只健康大鼠分为对照组、模型组、GLAE低（0.05 mg/（g·BW））、中（0.1 mg/（g·BW））、高（0.2 mg/（g·BW））剂量组。利用双侧颈总动脉夹闭法建立大鼠脑缺血模型,GLAE组灌胃不同剂量的GLAE干预,对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水,连续2周。用跳台试验方法检测记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍大鼠的学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马组织的病理形态的变化,比色法检测海马组织一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性和一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,Western blotting和实时荧光定量PCR法分别检测海马组织生长相关蛋白-43（growth associated protein-43,GAP-43）和脑源性神经生长因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）的水平。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠跳台试验的逃避潜伏期显著缩短、电击次数显著增加（P<0.05）;海马神经元细胞出现明显核固缩、排列松散紊乱等退行性改变,细胞数量显著减少（P<0.05）;海马组织NOS活性和NO含量均显著降低（P<0.05）;大鼠海马组织GAP-43蛋白表达量显著升高（P<0.05）;海马组织BDNF mRNA表达量显著下调（P<0.05）。与模型组相比,GLAE干预后,大鼠逃避潜伏期均显著延长、电击次数均显著减少（P<0.05）;GLAE高剂量组大鼠CA1区和齿状回锥体神经元细胞形态明显改善,神经元数量显著增加（P<0.05）;GLAE低剂量组对NOS活性影响不明显（P>0.05）,显著增加NO含量（P<0.05）,GLAE中、高剂量组NOS活性和NO含量均显著升高（P<0.05）;GLAE低、中、高剂量组海马组织GAP-43蛋白表达量均显著增加（P<0.05）;GLAE低、中、高剂量组海马组织BDNF mRNA表达量均显著增加（P<0.05）。以上结果表明,GLAE可通过提高NOS活性和NO水平、促进海马神经发生和功能恢复对脑缺血后海马神经元损伤有一定的保护作用,从而改善大鼠认知功能,0.2 mg/g GLAE效果最好。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪免疫反应和小肠能量状态的影响

试验旨在研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脂多糖（LPS）刺激的仔猪免疫反应和小肠能量状态的影响。按照随机性原则将24头32日龄健康仔猪（11.58 kg±0.26 kg）分为3组（空白组、LPS组和NAC＋LPS组），每组设置8个重复。经过3 d适应期后，各组仔猪饲喂玉米-豆粕型基础饲粮（NAC＋LPS组在此基础上添加500 mg/kg NAC）。试验第21天，仔猪空腹称重后腹腔注射LPS （LPS组和NAC＋LPS组，注射剂量为100 μg/kg BW）或等量的生理盐水（空白组），3 h后前腔静脉采血，然后屠宰取肠黏膜、肝脏和淋巴结等样品，进行血细胞计数分析、小肠黏膜腺苷酸水平测定以及肝脏和淋巴结相关基因检测。结果表明，与空白组相比，LPS组仔猪血液中白细胞和中性粒细胞的数目显著提高（P<0.05），淋巴细胞数目显著降低（P<0.05）；小肠黏膜一磷酸腺苷（AMP）水平和一磷酸腺苷/三磷酸腺苷（AMP/ATP）值显著提高（P<0.05），ATP水平显著降低（P<0.05）；肝脏和淋巴结双链RNA依赖的蛋白质激酶（PKR）、干扰素诱导的四肽重复蛋白1（IFIT1）和黏病毒抗性蛋白1（MX1）基因的相对表达量均显著上调（P<0.05）。与LPS组相比，NAC＋LPS组仔猪血液中白细胞数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞百分比均显著降低（P<0.05）；回肠黏膜AMP水平和AMP/ATP值均显著降低（P<0.05）；肝脏IFIT1、PKR和MX1基因的相对表达量均显著上调（P<0.05），淋巴结IFIT1基因的相对表达量显著下调（P<0.05）。综上所述，饲粮中添加500 mg/kg NAC可缓解LPS刺激引起的仔猪免疫反应，并且能有效改善肠黏膜能量状态。     

植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能及炎症反应的影响

本试验通过研究饲粮中添加不同水平植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能、血清细胞因子含量和关键免疫蛋白基因表达的影响,旨在探索植物精油和柠檬酸复合物在肉鸡生产上的适宜添加剂量。选用1日龄健康科宝肉鸡1 344只,随机分为4组（每组12个重复,每个重复28只鸡）,对照组饲喂基础饲粮,3个试验组（T1、T2、T3）分别饲喂添加0.8、1.0和1.5 kg/t的包被植物精油和柠檬酸复合物试验饲粮,试验期为42 d。试验结束当天,每个重复选取6只接近平均体重的肉鸡翅静脉采血,然后屠宰并取空肠、脾脏、肠系膜淋巴结（MLNs）。分别测定血清中D-乳酸（D-LA）、细胞因子的含量及二胺氧化酶（DAO）活性;并对空肠黏膜紧密连接蛋白以及脾脏和MLNs中Toll样受体（TLRs）的mRNA表达量进行测定。结果表明：与对照组相比,T2组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均极显著降低（P<0.01）;T3组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）。T2和T3组肉鸡空肠封闭蛋白1（Claudin-1）的mRNA相对表达量均显著升高（P<0.05）,T2组闭合小环蛋白1（ZO-1）的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。T1组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）,MLNs中TLR4 mRNA表达量显著降低（P<0.05）;T2组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,IL-2含量显著提高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著或显著降低（P<0.01;P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）,IL-2含量显著升高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著降低（P<0.01）。与T1组相比,T2组血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）。综上所述,饲粮中添加植物精油和柠檬酸复合物能够提高肉鸡肠道紧密连接蛋白的表达,降低肠道通透性,下调促炎细胞因子的表达,进而增强肠道屏障功能,缓解机体炎症。根据本试验结果,推荐科宝肉鸡饲粮植物精油和柠檬酸复合物适宜添加量为1.0 kg/t。     

板蓝根微粉水提物抗大肠杆菌活性及其机制的探究

为了探究板蓝根微粉水提物的抗菌活性及其抗菌机制，试验通过扫描电镜、透射电镜检测板蓝根微粉水提物对大肠杆菌形态和结构影响；酶标仪测定板蓝根微粉对大肠杆菌电导率、胞内物质总漏出率影响；测定大肠杆菌培养液中碱性磷酸酶含量以及大肠杆菌菌体内、外蛋白质含量；通过DAPI染色DNA、RNA，检测板蓝根微粉水提物对大肠杆菌核酸的影响；检测板蓝根微粉水提物对大肠杆菌菌体内、外谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙酮酸以及三磷酸腺苷（ATP）等菌体内代谢的影响。结果显示，板蓝根微粉水提物作用大肠杆菌10 h后，扫描电镜检测可见菌体出现溢缩，菌体长度明显变短，断裂形成许多残体，有的中间凹陷，发生变形；透射电镜下可观察大肠杆菌的胞壁界限模糊不清，壁膜呈现锯齿状，弯弯曲曲，变形，有的菌体破碎。总漏出率、电导率以及碱性磷酸酶含量测定结果显示，板蓝根微粉水提物各组D_{600 nm}均高于空白对照组，且呈剂量依赖性。菌体外蛋白质含量从8 h开始与空白对照组差异极显著（P<0.01）；菌体内蛋白质含量从4 h开始与空白对照组差异极显著（P<0.01）。DNA含量在12 h前与空白对照组无显著差异（P>0.05），从16 h开始与空白对照组差异极显著（P<0.01）；RNA含量在8 h开始降低，在12 h时与空白对照组差异显著（P<0.05），从16 h开始差异极显著（P<0.01）。ALT和AST浓度测定无显著性差异（P>0.05）。培养液和菌体内的丙酮酸含量均高于空白对照组，且从4 h开始与空白对照组差异极显著（P<0.01）。培养液中的ATP含量与空白对照组差异极显著（P<0.01）；菌体内ATP含量从4 h开始与空白对照组差异极显著（P<0.01）。综上，板蓝根微粉水提物可以通过破坏细胞壁、细胞膜的完整性，抑制细菌遗传物质合成和代谢，影响丙酮酸和ATP含量从而实现抗大肠杆菌作用。     

不同月龄阉割对延边黄牛高档部位肌肉脂肪酸含量的影响

试验旨在研究不同月龄阉割对延边黄牛眼肌、西冷和上脑3个高档部位肌肉中脂肪酸含量的影响。试验选用50头健康且体重相近(150 kg±7.5 kg)的6月龄延边黄牛,随机分成5组,每组10头,试验组分别在6、8、10和12月龄阉割(记为YG6、YG8、YG10和YG12组),对照组不阉割(记为WYG),试验期为24个月,统一饲养,自由采食。30月龄屠宰,取眼肌、西冷、上脑3个部位肌肉样,测定其脂肪酸含量。结果显示:①与WYG组相比,眼肌脂肪酸中YG8和YG12组豆蔻油酸含量均极显著增加(P<0.01),YG6和YG10组均显著增加(P<0.05);YG6组油酸含量显著增加(P<0.05);YG6和YG10组棕榈酸含量均显著降低(P<0.05);试验组总饱和脂肪酸含量均下降(P>0.05),YG6、YG10组总不饱和脂肪酸含量和总单不饱和脂肪酸含量均显著增加(P<0.05);YG10组总多不饱和脂肪酸含量极显著增加(P<0.01),YG6、YG8和YG12组均显著增加(P<0.05)。②与WYG组相比,西冷脂肪酸中试验组豆蔻油酸、棕榈油酸和硬脂酸含量均显著增加(P<0.05),棕榈酸含量显著降低(P<0.05);YG6组油酸含量显著增加(P<0.05),总饱和脂肪酸含量显著降低(P<0.05);YG6和YG10组总不饱和脂肪酸含量和总单不饱和脂肪酸含量均显著增加(P<0.05)。③与WYG组相比,上脑脂肪酸中YG8组豆蔻酸含量显著增加(P<0.05);YG6和YG10组棕榈酸含量均极显著降低(P<0.01),总不饱和脂肪酸含量和总单不饱和脂肪酸含量均显著增加(P<0.05);YG6组总饱和脂肪酸含量显著降低(P<0.05)。综上,阉割可增加延边黄牛高档部位不饱和脂肪酸含量,降低饱和脂肪酸含量,其中6月龄阉割组不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸最高。     

多因素法构建肉鸡腹水综合征实验模型及其对肺组织血管内皮舒缩活性因子的影响

试验旨在研究多因素法构建肉鸡腹水综合征（AS）实验模型及其对肺组织血管内皮舒缩活性因子的影响。将158羽健康罗斯肉鸡随机分为空白组、低温模型组和多因素模型组，于25、35、45日龄随机取样，观察临床症状、剖检变化及肺组织病理变化，测定体重、发病率、腹水心脏指数（AHI），检测肺组织一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、一氧化氮合酶（NOS）变化，并以实时荧光定量PCR法检测肺组织内皮素A型受体（ETAR）及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达量。结果显示，各日龄低温模型组和多因素模型组肉鸡AHI均极显著高于空白组（P<0.01），各日龄多因素模型组肉鸡AHI均显著高于低温模型组（P<0.05）；35、45日龄低温模型组和各日龄多因素模型组肉鸡体重显著或极显著低于空白组（P<0.05，P<0.01）；35、45日龄低温模型组和各日龄多因素模型组AS发病率均极显著高于空白组（P<0.01），25日龄多因素模型组AS发病率极显著高于低温模型组（P<0.01）；35日龄AS肉鸡肺组织结构损伤，内皮细胞脱落、平滑肌排列紊乱；与空白组相比，35、45日龄低温模型组和多因素模型组肺组织NO与ET-1含量、iNOS活性、ETAR及VEGF mRNA表达量均显著或极显著升高（P<0.05，P<0.01），肺组织NO/ET-1、cNOS与TNOS活性均显著或极显著降低（P<0.05，P<0.01）。表明低温、高钠、高能饲料多因素法能够成功构建AS实验模型，多因素造模法较低温造模法更能反映疾病因素的多样性；肺组织血管内皮舒缩活性因子表达紊乱参与了AS的发生发展。     

饲养方式对滩羊羔羊肌肉及脂肪组织中脂肪酸组成的影响

为探究饲养方式对滩羊羔羊肌肉和脂肪组织中脂肪酸组成的影响,试验选择24只健康且体重相近（14.16 kg±0.58 kg）的2月龄滩羊羔羊随机分成舍饲组和放牧组,每组12只,于4月龄屠宰取其背最长肌、股二头肌、膈肌、皮下脂肪、肾周脂肪、尾部脂肪,用气相色谱仪测定脂肪酸含量。结果表明：①在肌肉组织饱和脂肪酸中,与放牧组相比,舍饲组滩羊羔羊股二头肌丁酸、棕榈酸含量显著提高（P<0.05）,膈肌辛酸、月桂酸、肉豆蔻酸含量显著降低（P<0.05）。在肌肉组织不饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲组滩羊羔羊背最长肌棕榈油酸、花生四烯酸含量显著降低（P<0.05）,γ-亚麻酸、α-亚麻酸含量显著提高（P<0.05）,二十碳五烯酸（EPA）、n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFA）极显著提高（P<0.01）;股二头肌花生四烯酸含量显著降低（P<0.05）,十七碳一烯酸、α-亚麻酸、EPA、n-3 PUFA含量极显著提高（P<0.01）;膈肌棕榈油酸含量显著降低（P<0.05）。②在脂肪组织饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲滩羊羔羊皮下脂肪十一碳酸、十五碳酸含量显著降低（P<0.05）,十三碳酸含量极显著降低（P<0.01）;肾周脂肪葵酸、肉豆蔻酸含量显著降低（P<0.05）,丁酸、硬脂酸含量极显著提高（P<0.01）;尾脂十一碳酸含量显著降低（P<0.05）。在脂肪组织不饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲滩羊羔羊皮下脂肪十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）,肉豆蔻油酸、棕榈油酸、γ-亚麻酸含量极显著降低（P<0.01）;肾周脂肪十八碳一烯酸、α-亚麻酸、n-3PUFA含量显著提高（P<0.05）,肉豆蔻油酸含量显著降低（P<0.05）,十七碳一烯酸、二十碳二烯酸、十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）;尾脂肉豆蔻油酸、棕榈油酸含量显著降低（P<0.05）,十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）。综上,不同饲养方式对滩羊羔羊肌肉和脂肪组织脂肪酸含量存在一定影响,舍饲滩羊羔羊股二头肌中饱和脂肪酸含量及肾周脂肪中不饱和脂肪酸含量显著高于放牧滩羊羔羊。     

Ingestion of starch-rich meals after exercise increases glucose kinetics but fails to enhance muscle glycogen replenishment in horses

Fatiguing exercise substantially decreases muscle glycogen concentration in horses, impairing athletic performance in subsequent exercise bouts. Our objective was to determine the effect of ingestion of starch-rich meals after exercise on whole body glucose kinetics and muscle glycogen replenishment. In a randomized, cross-over study seven horses with exercise-induced muscle glycogen depletion were either not fed for 8 h, fed half of the daily energy requirements ( approximately 15 Mcal DE) as hay, or fed an isocaloric amount of corn 15 min and 4 h after exercise. Starch-rich meals fed after exercise, when compared to feed withholding, resulted in mild to moderate hyperglycemia (5.7+/-0.3 vs. 4.7+/-0.3 mM, P<0.01) and hyperinsulinemia (79.9+/-9.3 vs. 39.0+/-1.9 pM, P<0.001), 3-fold greater whole body glucose kinetics (15.5+/-1.4 vs. 5.3+/-0.4 micromol kg(-1)min(-1), P<0.05), but these only minimally enhanced muscle glycogen replenishment (171+/-19 vs. 170+/-56 and 260+/-45 vs. 294+/-29 mmol/kg dry weight immediately and 24 h after exercise, P>0.05). It is concluded that after substantial exercise-induced muscle glycogen depletion, feeding status only minimally affects net muscle glycogen concentrations after exercise, despite marked differences in soluble carbohydrate ingestion and availability of glucose to skeletal muscle.     

运动对苏尼特羊肌纤维组织学特性和肉品质的影响及其调控机理

本试验以6月龄苏尼特羊为研究对象,采用肌球蛋白重链(MyHC)分子分型法、ATP酶染色法分析肌纤维组织学特性,并对肉品质指标、能量代谢相关基因mRNA相对表达量、代谢酶活性进行测定及分析,以探究运动对苏尼特羊肌纤维特性和肉品质的影响及其调控机理.选取体况良好、平均体重为(19.77±3.81)kg的3月龄苏尼特羊14只...     

马兜铃酸A致大鼠肾病的肾毒性作用机理研究

以大鼠为靶动物进行亚慢性毒性试验,探究马兜铃酸A的肾毒性作用机理。将56只健康雄性Wistar大鼠适应性饲养1周,随机分为马兜铃酸A高剂量组(40 mg/kg BW)、马兜铃酸A中剂量组(8 mg/kg BW)、马兜铃酸A低剂量组(4 mg/kg BW)和空白组4组,试验持续28 d,后进行14 d恢复性试验。通过监测体质量,计算肾脏指数,检测血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)和肌酐(SCr)的含量,检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC),观察肾脏的组织病理学变化,采用实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达情况,来综合评价马兜铃酸A的肾毒性作用。结果分析显示,从第16天开始马兜铃酸A高剂量组大鼠体质量显著低于空白组(P<0.05);肾脏指数各组间差异不显著;试验第28天,高剂量组BUN、UA、CA含量均显著高于空白组(P<0.05),中剂量组BUN、UA含量均显著高于空白组(P<0.05),低剂量组UA含量显著高于空白组(P<0.05),试验第42天,高剂量组的BUN、UA、CA含量仍然均显著高于空白组(P<0.05),中剂量组CA含量显著高于空白组(P<0.05);试验第28天,高剂量组MDA含量显著高于空白组(P<0.05),SOD、GSH-Px活性均显著低于空白组(P<0.05),中剂量组和低剂量组GSH-Px活性显著低于空白组(P<0.05),试验第42天,高剂量组MDA含量仍然显著高于空白组(P<0.05),SOD、GSH-Px活性和T-AOC均显著低于空白组(P<0.05),中剂量组SOD、GSH-Px活性和T-AOC均显著低于空白组(P<0.05),低剂量组MDA含量显著高于空白组(P<0.05),GSH-Px活性显著低于空白组(P<0.05);肾脏组织病理学观察发与组织和细胞层面的损伤程度大体呈剂量相关性;试验第28天和第42天,高剂量组和中剂量组TGF-β1、smad3、collagen1、collagen3的mRNA表达量显著高于空白组(P<0.05),低剂量组TGF-β1、smad3的mRNA表达量显著高于空白组(P<0.05)。说明马兜铃酸A对大鼠肾脏有毒性作用,肾功能被损害,引起一定程度的肾纤维化,这种损害作用在一定时间内不能自行恢复。马兜铃酸A的毒性作用可能与氧化应激与TGF-β1/smad通路作用有关。     

Effects of β-Hydroxy-β-Methylbutyrate and γ-Oryzanol on Blood Biochemical Markers in Exercising Thoroughbred Race Horses

In both the horse and the man, nutritional ergogenic aids have been used to improve physical ability in conjunction with an appropriate training regimen. Although training increases physical condition, the ease of taking a nutritional additive to improve training results explains the demand for supplementation, which may increase mechanical energy of work, delay onset of fatigue, or improve neuromuscular coordination. The purpose of this study was to determine the effects of oral supplementation of β-hydroxy-β-methylbutyrate (HMB) and γ-oryzanol (GO) on indices of exercise-induced muscle damage in Thoroughbred race horses. In this 32-week study, the horses were assigned to either a placebo, GO (3.0 g/d), HMB (15 g/d), or GO and HMB treatment groups. The supplements were administered for the first 16 weeks of the study during the training period before the racing season began. Blood samples were taken at baseline, and then during training, before exercise, immediately after exercise, and 30 minutes after exercise. Heart rate and speed were monitored in each exercise session. Hematocrit, glucose, lactate (LA), creatine phosphokinase, and aspartate aminotransferase were measured before and after each exercise session. Analysis of variance showed a significantly greater increase in postexercise creatine kinase activity in placebo-supplemented group than in the other treatment groups, both in the training period and during the racing seasons (P < .05). Blood LA was higher immediately after exercise in the placebo group compared with the supplemented groups. In conclusion, supplementation with HMB and GO resulted in decreased creatine kinase and LA after exercise. These findings support the hypothesis that HMB and GO supplementation helps to prevent exercise-induced muscle damage.     

不同浓度油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响

试验旨在探究油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响。试验设1个空白对照组（CON）和3个油酸（OA）诱导组：50、100、200 μmol/L油酸组（OAL、OAM、OAH）。油酸诱导96 h后,通过测定细胞大小及活力评估油酸对细胞的影响。通过油红O染色和测定甘油三酯来验证脂滴的形成,通过实时荧光定量PCR测定相关成肌成脂基因的表达水平来验证脂肪细胞的生成。结果显示,与对照组相比,添加油酸后,延边牛骨骼肌卫星细胞内有脂滴生成,并且脂滴形成量、甘油三酯累积量与油酸呈剂量依赖关系;实时荧光定量PCR测定结果表明,成肌相关因子Pax3、MyoD显著下调（P<0.05）,成脂相关因子C/EBPβ、PPARγ显著上调（P<0.05）,脂肪酸代谢相关因子SCD显著下调（P<0.05）,PLIN2基因显著上调（P<0.05）。综合上述试验结果,用油酸诱导处理延边牛骨骼肌卫星细胞可促进细胞的成脂转分化。     

油橄榄叶提取物对酒精性脂肪肝大鼠PP1-DNA-PK-USF1信号通路的干预作用

试验旨在探讨油橄榄叶提取物（olive leaf extract，OLE）防治酒精性脂肪肝（AFLD）的作用机制。将50只健康大鼠随机均分为5组：空白对照组，模型组，OLE高、中、低剂量组，除空白对照组外，其他各组均采用递增法灌胃食用乙醇24周，建立大鼠肝损伤模型，造模同时OLE高、中、低剂量组分别用OLE（1 000、500、250 mg/kg）进行灌胃治疗。利用生物显微技术观察肝脏组织结构的变化，全自动生化分析仪测定血脂水平，实时荧光定量PCR、Western blotting和酶联免疫吸附法（ELISA）检测肝组织蛋白磷酸酶1（PP1）、DNA依赖的蛋白激酶（DNA-PK）、上游刺激因子1（USF1）mRNA水平和蛋白含量。结果显示，与空白对照组相比，模型组大鼠肝脏损伤程度明显加重，血清甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）含量极显著升高（P<0.01）；肝脏PP1、DNA-PK、USF1水平和蛋白含量极显著升高（P<0.01）。与模型组相比，OLE干预后，肝脏病理改变明显减轻；血清TG、FFA含量显著或极显著降低（P<0.05；P<0.01）；肝脏PP1、DNA-PK、USF1 mRNA水平和蛋白含量显著或极显著降低（P<0.05；P<0.01）。结果表明，OLE可通过调节PP1-DNA-PK-USF1信号通路缓解肝脏脂肪变性，抑制AFLD的发展。     

SD大鼠2型糖尿病模型的建立及相关指标的测定

通过链脲佐菌素(STZ)结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病大鼠模型。30只健康雄性SD大鼠随机分为模型组(20只)、空白组(10只)。模型组喂饲高糖高脂饲料4周后,用STZ 30mg/kg一次性左下腹腔注射。检测试验第1周、第4周,注射STZ后第1周、第4周、第8周、第12周空腹体重、血清葡萄糖(BG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、胰岛素(INS)、葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(GIP)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)等指标,进行统计分析。处死大鼠,取胰腺进行病理切片检查。动物成模率为75%。试验第4周,模型组TG、TC值明显升高,与空白组比较,P<0.01。注射STZ后第1、4、8、12周,模型组BG、TG、TC值均明显升高,与空白组比较,P<0.01;ISI均明显降低,与空白组比较,P<0.01。注射STZ后第1、4、8周,模型组的GLP-1、IGF-1值明显降低,与空白组比较,P<0.01。注射STZ后第12周,模型组的GLP-1、GIP、IGF-1值明显降低,与空白组比较,P<0.01。试验结果表明,STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食可成功诱导2型糖尿病大鼠模型。GIP、IGF-1、GLP-1等细胞因子参与了2型糖尿病的病理发生。     

饲粮中添加泛酸对生长獭兔肝脏脂肪代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中添加泛酸对生长獭兔肝脏脂肪代谢的影响。试验选用体重相似的断奶獭兔160只,随机分为4组,每组40个重复,每个重复1只。对照组獭兔饲喂基础饲粮,试验组獭兔分别饲喂在基础饲粮中添加10、20和40 mg/kg泛酸的饲粮。预试期7 d,正试期56 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加40 mg/kg泛酸显著降低了生长獭兔肩胛、胃周和肾周脂肪沉积率(P0.05);饲粮中添加10~20 mg/kg泛酸显著降低了生长獭兔肝脏中脂滴的含量(P0.05)。饲粮中泛酸添加水平对生长獭兔血浆中总胆固醇和白蛋白的含量无显著影响(P0.05);随着饲粮中泛酸添加水平的升高,生长獭兔血浆中甘油三酯的含量先降低后趋于稳定,20、40 mg/kg添加组显著低于对照组(P0.05);与对照组相比,饲粮中添加20~40 mg/kg泛酸显著升高了生长獭兔血浆中极低密度脂蛋白的含量(P0.05)。与对照组相比,饲粮中添加40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中激素敏感脂酶(HSL)和骨骼肌中脂肪酸转运蛋白(FATP)基因的表达量(P0.05);饲粮中添加20~40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因的表达量(P0.05);饲粮中添加10~40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中脂肪酸合成酶(FAS)基因和骨骼肌中CPT1基因的表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加泛酸影响生长獭兔肝脏内脂肪代谢,泛酸添加水平为40 mg/kg时可降低肝脏内脂肪的沉积,并能降低机体脂肪沉积率,增加骨骼肌对脂肪酸的摄取和利用。     

杜仲叶对绵羊脂肪代谢的影响及其机理

为研究杜仲叶对绵羊脂肪代谢和肉品质的影响,本研究随机选择70~80日龄、体重25~30 kg的绵羊(湖羊)30只,平均分为3组,分别为对照组(CTL组,饲粮中不含杜仲叶)、低水平杜仲叶组(EUL1组,饲粮含10%杜仲叶)和高水平杜仲叶组(EUL2组,饲粮含20%杜仲叶),每组10只。预试期15 d,正试期90 d。采集血液,测定血浆脂质代谢分析指标;采集背最长肌,测定营养物质含量;采集肝脏组织,测定脂肪代谢相关酶和核转录因子的mRNA表达水平和蛋白水平。结果表明:1)各组干物质采食量EUL1组EUL2组CTL组,组间差异显著(P0.05)。2)与CTL组相比,EUL2组血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL)、非酯化脂肪酸(NEFA)含量显著升高(P0.05),EUL1和EUL2组血浆低密度脂蛋白(LDL)(0.05≤P0.10)、总胆固醇(TC)(P0.05)含量降低。3)与CTL组相比,EUL1组肌肉粗蛋白质含量、EUL2组肌肉粗脂肪含量显著升高(P0.05),EUL1组肌肉剪切力显著减小(P0.05)。4)与CTL组相比,EUL1组和EUL2组肌肉饱和脂肪酸(SFA)含量略有降低(P0.05),肌肉不饱和脂肪酸(UFA)含量显著升高(P0.05),其中,EUL2组肌肉MUFA、PUFA含量及UFA/SFA显著升高(P0.05)。5)与CTL组相比,杜仲叶能够显著下调肝脏脂肪合成相关酶硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)和核转录因子固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达水平(P0.05);显著上调肝脏脂肪酸分解相关酶肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)、脂蛋白酯酶(LPL)mRNA表达水平显著上调(P0.05);与CTL组相比,EUL2组肝脏SCD1蛋白水平显著下降(P0.05)。结果提示,杜仲叶通过调节脂肪合成和分解相关基因的表达,显著影响绵羊脂肪的代谢和肌肉脂肪酸的组成。     

Exercise-induced phospholipid degradation in the equine skeletal muscle and erythrocytes.

To understand the pathogenesis of equine exercise-induced myopathies and hemolysis, changes of phospholipid peroxidation products in the equine middle gluteal muscle and erythrocytes following the high-speed treadmill exercise were studied. In the skeletal muscle, the peroxidized phosphatidylethanolamine (PE) were increased at 24 hours after the exercise. The malondialdehydes (MDAs) were also increased as the protein-bound MDAs following exercise. In the erythrocytes, the peroxidized PE were significantly decreased at 24 hours after the exercise. The protein-bound MDAs were significantly increased at 5 min after the exercise and returned to the base values at 24 hours after the exercise. These findings indicate that the PE is more susceptible to in vivo oxidative effects than the other phospholipid classes, and the accumulation of the protein-bound MDAs is considered to play some cytotoxic roles in the equine skeletal muscle and erythrocytes following exercise.