肉鸽免疫禽流感疫苗的安全性试验观察

本试验选用两种禽流感疫苗按不同剂量免疫不同生长期肉鸽,进行安全性试验观察.在此基础上,又随机选择1月龄以上的肉鸽640只进行分组隔离试验,分别注射H5、H9亚型禽流感灭活疫苗,免后第3周,试验组半量肉鸽再进行同剂量二免,定期检测H5、H9亚型禽流感抗体效价,并加以分析总结,旨在为肉鸽禽流感疫苗免疫程序方案的制订提供参考.     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫抗体监测试验

为了评估重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫效果以及对白羽肉鸡最佳免疫时间,试验选取3个厂家(a、b、c厂)重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)分别在1日龄和7日龄进行接种,于接种前(1,7日龄)、14,21,28,35,42日龄采血进行抗体检测,以了解不同厂家高致病禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果以及最佳免疫时间。结果表明:3个厂家高致病性禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果没有明显差异,在21日龄后H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗体效价均在4 lb以上,各毒株抗体效价在28,35,42日龄时,1日龄抗体效价要高于7日龄,且a厂家疫苗产生的抗体效价要略高于b、c厂。说明1日龄免疫效果要好于7日龄,最佳免疫时间为1日龄。     

禽流感灭活疫苗H5N2 D7株与H5N1 Re-6株对鸭的免疫效果研究

为评价禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)对鸭的免疫效果,根据兽医流行病学中利用比较率判断疫苗应用效果的样本量计算方法,得出所需的最小样本量;以田间试验的方式,常规养殖白鸭300只、番鸭240只,并对其进行随机分组;按程序免疫,从10日龄首免后2周开始,每周采集血清测定抗体效价,直至出栏(白鸭45日龄、番鸭66日龄)。结果显示,10日龄白鸭和番鸭的母源抗体分别为3.02 log2和0 log2,需进一步开展研究,以确定最佳首免时间。首免后2周,无论是白鸭还是番鸭,H5N2 D7株疫苗组抗体HI效价和抗体合格率均高于H5N1 Re-6株疫苗组;首免后3~5周,两种疫苗对白鸭和番鸭的HI效价均4 log2,抗体合格率均≥70%。二免后1周至出栏,两种疫苗对白鸭和番鸭均产生较好的免疫效果,HI效价均7 log2,抗体合格率均80%。是否采用对应亚型的血凝抑制抗原对抗体的检测结果有较大影响。研究表明:免疫两种疫苗后均能产生较好的免疫抗体,但相对而言,H5N2 D7株疫苗较H5N1Re-6株疫苗更适合于鸭的免疫;在鸭等水禽中推广使用该疫苗将能更有效地防控高致病性禽流感。     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的分析与评估

目的 分析与评估禽流感疫苗对禽类的免疫效果.方法 采用疫苗接种、抗体试验和分组试验法,在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验,并对结果分析比较.结果 不同日龄蛋鸡免疫接种20天后HI抗体效价不同、饲养方式不同、家禽种类不同疫苗效果不同.85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2,鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养,H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上,而对鹌鹑和鸭为1log2和3.2log2.结论 单价禽流感疫苗和二价疫苗对鸡群免疫的效果不同,2价疫苗的免疫效果较单价疫苗差.     

信鸽新城疫抗体及血清生化指标检测及分析

为了提高信鸽新城疫疫苗的免疫效果,研究信鸽新城疫疫苗免疫失败的原因,试验按照《新城疫诊断技术》(GB/T 16550—2008)方法对50份信鸽血清样品进行了新城疫抗体检测,同时利用全自动生化分析仪对其中5份血清样品进行了生化指标的检测。结果表明:4~5号鸽棚的信鸽新城疫抗体效价均在24以上,1~3号鸽棚的信鸽新城疫抗体效价偏低或抗体离散度较高。1号鸽棚进行生化指标检测的5只信鸽肌酸激酶的平均值为3 045. 80 U/L,明显高于欧洲肉鸽肌酸激酶(415. 35±78. 94) U/L的水平。说明被检信鸽新城疫免疫成功率较低。1号鸽棚的信鸽可能存在不同程度的骨骼肌损伤或剧烈运动造成的过度疲劳等问题。     

通过电穿孔法用血凝素蛋白DNA疫苗对小鼠进行单独免疫可以诱导其产生针对H5N1亚型禽流感病毒的早期保护

试验背景：研制一种疫苗使人类免受H5N1亚型禽流感病毒的感染是一项迫在眉睫的任务。DNA疫苗是传统疫苗的替代品,可以预防新的H5N1亚型禽流感病毒的出现。在本试验中,笔者对用表达H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白（HA）的质粒DNA进行单独免疫时在感染早期是否可以使小鼠模型抵抗致死攻击进行了评估。试验方法：在对小鼠进行致死攻毒前的第3、5、7天用HA疫苗分别单独免疫1次。小鼠的存活率、肺中病毒的滴度及体重的变化作为评估疫苗保护力的指标。在免疫后的不同天数,摘除小鼠眼球收集血清并通过ELISA和HI试验对特异性抗体进行检测,用以测定HA DNA疫苗介导的体液免疫反应。免疫后分离脾细胞,通过ELISPOT试验测定抗原特异性T细胞反应。试验结果：攻毒试验结果表明,用H5N1亚型禽流感病毒HA DNA疫苗进行单独免疫可以产生针对同型致死病毒量的有效的早期保护。免疫学分析显示,在免疫后的短时间内小鼠体内可以产生具有抗原特异性的抗体及T细胞反应。疫苗的保护能力取决于所注射的DNA的量及免疫后的持续时间。结论：与电穿孔法相结合,用100μg H5N1亚型禽流感病毒HA DNA疫苗对小鼠进行单独免疫能够在同型病毒感染的早期产生保护力。     

禽流感灭活疫苗(H5N2,N28株)和重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫鸡和鸭后抗体消长规律的比较研究

禽流感灭活疫苗（H5N2，N28株）和重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re-1株）各3批，以重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re．1株）推荐的免疫程序和剂量分组免疫5周龄SPF鸡和5周龄非免疫鸭。免疫后定期采集血样，测定血清HI抗体效价，分别计算各免疫组鸡和鸭HI抗体效价的几何平均数，绘制各批疫苗免疫鸡和鸭后HI效价消长曲线，并分别对两种疫苗免疫鸡和鸭后各时期的HI抗体效价进行t检验。结果为：①免疫后1周，各免疫组均未测到HI抗体；②鸡免疫后4～5周，HI抗体效价达到峰值1：2^6.0～1：2^7.0，随后2周下降相对较快，平均每周下降0．3—0．7个滴度，之后HI抗体效价缓慢下降，直到试验结束，平均每周下降0．04～0．17个滴度；③鸭首次免疫后第3周各免疫组HI抗体效价达到1：2^4.0～1：2^5.3，加强免疫（首次免疫后第3周）后，HI抗体效价迅速升高。加强免疫后第3周（首次免疫后第6周）HI抗体效价达到最高值1：2^10.6-1：2^11.7，且在峰值水平维持3周，之后1周下降相对较快，平均下降1．2～2．7个滴度，然后缓慢下降，到首免后24周平均每周下降0．28～0．39个滴度，24周除049H5N2批疫苗免疫组外，其他各批免疫鸡HI抗体效价均小于1：2^4.0；④免疫后3周内，两种疫苗刺激鸡产生的HI抗体效价均高于相应批次疫苗免疫鸭产生的HI抗体效价，免疫后第2周相差1．9—2．3个滴度，免疫后第3周相差1．6～2．0个滴度；⑤两种疫苗免疫鸡和鸭后，各时期HI抗体效价t检验差异均不显著（P〉0．05）。以上结果表明，两种疫苗免疫SPF鸡和非免疫鸭后，HI抗体效价消长规律一致，两种疫苗免疫后各个时期的HI抗体效价在统计学上差异均不显著（P〉0．05）。     

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1，Re-4 Re-5）免疫肉鸽效果试验

随机选择1月龄以上肉鸽640只,进行分组隔离试验,分别注射0．2、0．3、0．4、0．5、1．0、1．5、2．0mL重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-4＋Re-5）,免疫后第3周,0．2、0．3、0．4、0．5mL疫苗试验组肉鸽半数再进行同剂量第二次免疫。定期采集血样,应用血凝抑制试验方法检测禽流感抗体。结果表明：初次免疫,Re-4比Re-5抗体形成效果好,相对高出1个抗体滴度;第二次免疫,二者效果相近,都比初次免疫整体效果好。免疫1次,至少接种0．4mL;免疫2次,至少接种0．3mL,才能形成较好免疫效果。     

两种禽流感疫苗不同免疫程序对蛋鸡免疫的效果

为了探讨蛋鸡的禽流感免疫方案、指导免疫工作,选择遵义市目前使用的2种主要禽流感疫苗(H5N1单苗,H5+H9二价苗)按不同免疫程序对试验蛋鸡进行免疫,对免疫效果进行了对比分析。结果表明:2种禽流感疫苗的不同免疫程序均能在一定时期内达到保护效果,最高抗体效价在首免后28~40天达到峰值,之后开始下降;单次的免疫效果较加强免疫的效果差,其中H5+H9二价苗加强免疫、H5N1单苗与H5+H9二价苗混合免疫均能使鸡群产生长期有效的免疫保护。     

重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的观察

用重组禽流感灭活苗接种10日龄、14日龄和21日龄的SPF鸡,接种后HI抗体效价无显著差异。将H5N1和H5N2疫苗分别接种21日龄SPF鸡,结果表明,H5N1和H5N2均能刺激SPF鸡产生较高的HI抗体;分别接种三黄鸡,接种后21 d,H5N1能刺激三黄鸡产生较高的HI抗体;而H5N2不能刺激三黄鸡产生合格的HI抗体,与SPF鸡免疫组相比差异显著。经过二次接种,HI抗体平均为8.9 log2,与SPF鸡组接种后42 d的各组相比差异不显著,而与一免后21 d的各组HI抗体效价相比差异显著。表明应用禽流感灭活苗对三黄鸡免疫接种,必须进行二免方可达到理想免疫效果,而应用重组禽流感灭活苗对三黄鸡进行免疫接种,一次免疫即可获得较高的HI抗体效价。     

鸡禽流感H5N1和新城疫疫苗混合后接种对抗体水平的影响

为了探索高致病禽流感H5N1亚型和鸡新城疫疫苗混合免疫对其产生抗体水平的影响,将4 000只10日龄同品种雏鸡随机分为试验组和对照组,试验组雏鸡用禽流感H5N1亚型疫苗和新城疫疫苗混合注射免疫,对照组雏鸡用禽流感H5N1亚型和新城疫疫苗同时分别注射免疫,35日龄时按相同的方法加强免疫1次,分别于免疫前及首次免疫后第7,14,21,28,35,50,66天随机采集血液样品不少于30份,进行H5N1 Re-6株、Re-7株、Re-8株和新城疫抗体检测。结果表明:鸡禽流感和新城疫疫苗混合后注射和同时分别注射的免疫效果一致,对禽流感、新城疫疫苗的免疫效果影响不大;但降低了劳动强度、减少了物力成本、降低了免疫应激次数。说明可以将禽流感H5N1亚型疫苗和新城疫疫苗混合注射免疫。     

肉鸽免疫禽流感灭活疫苗（H9亚型SS株）的效果观察

随机选取一月龄以上肉鸽，进行分组隔离试验，按0．2、0．3、0．4、0．5、1．0、1．5、2．0mL不同免疫剂量，采用一次免疫和二次免疫的方式，注射禽流感灭活疫苗（H9亚型ss株）。第一次免后14d开始采血，以后每周采血一次，连续采血24-B，检测H9亚型禽流感抗体效价。结果显示：肉鸽免疫H9疫苗后，一次免疫0．3mL、二次免疫0．2mL就有较好的免疫效果。     

水禽专用H5N2亚型禽流感疫苗对番鸭免疫效果评价

研究旨在通过临床免疫试验来评价水禽专用H5N2亚型禽流感疫苗的免疫效果。560只10日龄非免疫番鸭随机分为三个免疫剂量组,每个剂量组又分免疫1次组和免疫2次组,定期采血检测H5亚型禽流感病毒HI抗体效价。结果显示:在各剂量组内,不论是免疫1次还是免疫2次组,免疫后都能迅速产生HI抗体;免疫剂量对HI抗体的产生有一定影响;免疫次数对HI抗体的产生有显著影响。     

禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-6株）现地应用的安全性及效力

禽流感灭活疫苗（HSNl亚型，Re－6株）在梅河地区应用后，我们对疫苗的安全性和效力性进行了试验。安全性试验中，对蛋鸡进行了大剂量注射（1mL），在观察期间内未见不良临床反应，统计2个月的产蛋率，和未注苗组无明显差异；效力试验中，对蛋鸡免疫0．5mL疫苗，在免疫后的2个月内，不同时间采血进行了抗体效价测定，在3周后，抗体效价平均在5log2以上，在3个月抗体平均值一直持续7log2以上。从以上结果表明，禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-6株）具有良好的安全性和免疫原性。     

肉鸽高致病性禽流感免疫效果评估试验

通过对肉种鸽、肉乳鸽采用不同类型、不同剂量的禽流感疫苗注射,在不同的时间段监测观察其抗体滴度水平变化,探索出肉鸽高致病性禽流感的最佳免疫剂量及疫苗品种：乳鸽使用0.3ml的H5N1＋Re-1疫苗进行禽流感的首免,二免采用0.5ml的H5N2灭活疫苗进行免疫,从而提高肉鸽免疫抗体滴度水平,保证免疫效果。     

重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉免疫效果的研究

为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉的免疫保护效果,选取30日龄的雉,按照免疫程序首免后21 d,加强免疫1次,分别于接种前和接种后定期采血,分离血清,检测H5、H7亚型HI抗体滴度。结果显示,免疫前,雉血清中H5、H7亚型HI抗体滴度均为0;免疫后14 d,H5和H7亚型抗体平均滴度分别达到7.0log2和7.07log2,49 d后平均滴度达到峰值,分别为8.04log2和9.20log2;H5亚型免疫有效期可达105 d以上,H7亚型可达189 d以上。结果表明,重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对雉具有良好的免疫保护效果且安全性良好,但疫苗免疫49 d后,H5、H7抗体效价逐渐下降,133 d后明显下降,群体免疫合格率低于70%,因此生产中推荐,30日龄首免后,51日龄和5月龄各加强免疫1次。本研究为珍稀禽的禽流感免疫疫苗选择和程序制定提供了参考。     

重组禽流感灭活疫苗抗体消长规律分析

重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)3批,按重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)规程规定的检验方法免疫28日龄SPF鸡,免疫后定期采集血样,测定血清HI抗体效价,绘制各批疫苗免疫鸡HI效价消长曲线,结果表明,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)能诱导SPF鸡产生高的抗体而且维持时间长 .     

禽流感高效价卵黄抗体的制备和应用

试验选用4个免疫增强成分,采用1%添加水平添加到130日龄法国伊莎褐壳蛋鸡的日粮中,并用禽流感H5N1疫苗连续免疫鸡群3次,试验结果显示,4个免疫增强成分的试验组与对照组相比,前两次免疫效果显著,但当血清抗体效价达到15log2左右时,效果不是很明显;用制备的高效价卵黄抗体与疫苗同时接种未免疫过的海兰褐蛋雏鸡发现其能填补单独使用疫苗免疫时的抗体空白期,可提高紧急预防高致病性禽流感的效果。     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的检测与分析

禽流感大流行时，在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验，并对其结果进行比较和分析。得出不同日龄的蛋鸡免疫接种20d后其HI抗体效价不同，不同的饲养方式、不同种类的家禽及不同种类疫苗的免疫效果均不同。85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2，鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养，H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上，而对鹌鹑和鸭为1log2和3．2log2；单价禽流感疫苗和二价苗对鸡群免疫的效果不同，二价苗的免疫效果不如单价苗。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗在肉鹅中的应用效果评价

为评价重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 Re-1株)在商品肉鹅中的安全性和有效性,各取200只肉鹅进行单剂量和大剂量安全试验,另取500只进行免疫效力试验。结果显示:接种大剂量疫苗试验组的鹅,采食、饮水及精神状况正常,未见有不良临床反应,注射部位肌肉均未观察到炎症、疫苗残留现象,疫苗吸收良好,增重差异不明显。效力试验中,加强免疫后2周,抗体合格率达70%以上,病毒分离均为阴性。结果表明,该重组禽流感病毒二价灭活疫苗具有较好的安全性和有效性。建议对2周龄雏鹅进行首免,每只注射0.5 mL,5周龄时加强免疫1次,每只1.5 mL,这样可取得较好的免疫保护效果。