一种检测荷载pGMCSF-SS质粒的 减毒沙门氏菌数的方法学研究

以荷载pGMCSF-SS质粒的减毒沙门氏菌为参考菌，连续培养13h，间隔1h连续采样，用紫外分光光度计检测OD600值，同时用平板计数计算活菌数。根据所测数据，建立细菌对数与细菌浊度之间的直线回归数学模型，即Y=1.5568x+7.0944, R2=0.9543，并对相关关系进行了显著性检测︱r︱>r0.01，表明此回归方程可信度很高。为进一步检测该模型的可靠性，在培养时间内随机取样，检测OD600值，比较利用平板计数与回归方程所得细菌对数Y，二者差异不显著（p>0.05）。通过探讨细菌浊度与细菌计数之间的相关性建立的回归方程，可以有效地克服传统计数方法的不足，便于应用     

两种细菌学检查方法的比较

摘 要: 【目的】采用两种细菌学检查方法对牛乳中细菌进行菌数测定,比较得出最佳检测方法。【方法】采用显微镜计数法、标准平板计数法进行测定。【结果】微生物显微镜直接计数法随机性大,对菌体数量不能做出较为宏观,全面的反应.优点是计数快速;平板菌落计数法速度慢,需要平板上长出菌落一段时后才能计数。【结论】由于平板菌落计数法通常间做梯度稀释,所以计数的线性范围大.由于是菌悬液涂布,所以比较均匀,能较好的反应菌落的疏密程度.重复性,平行性很好,是经典的计数方法。     

解磷巨大芽孢杆菌液体发酵培养条件的优化

为了获得高密度培养的解磷细菌菌剂,以一株解磷巨大芽孢杆菌为研究对象,以OD600为依据测定活菌数量,优化最佳液体发酵培养条件。首先采用单因素试验对其培养条件如接种量、装液量、发酵温度、起始pH、发酵时间、摇床转速等进行筛选,获得单因素试验最佳值;在此基础上,利用L9(34)正交试验对其培养条件进行优化及验证,并制作菌株生长曲线。研究结果表明：该株巨大芽孢杆菌的最佳培养条件为：发酵温度30℃、起始pH 8.0、装液量20 mL/250 mL三角瓶、接种量3%、摇床转速250 r/min、培养时间22 h。在此最优条件下培养,以平板涂布法计数,发酵液最终活菌数达到3.2×109 cfu/mL以上。培养2~8 h,菌体生长处于对数期,8 h后菌体生长进入稳定期,22 h后进入衰亡期。试验结果为工业生产解磷巨大芽孢杆菌菌剂提供了基础数据。     

酸奶发酵菌株特性的研究

摘要：通过对酸奶发酵菌株保加利亚乳杆菌(Lb)和嗜热链球菌(St)在培养基中的活菌数OD值及pH值的研究,得出两菌最适收获期分别是16h、14h;两菌1：1混合接种发酵效果优于单株发酵且在脱脂乳培养基中活茵数达到8.5x108cfu／g。     

电导率筛选法快速检测鱼粉细菌总数的研究

首次建立了一种基于电导率的快速检测鱼粉饲料细菌总数的间接检测方法.结果表明：所选间接检测方法具有较好的稳定性和重现性.细菌总数lg （cfu/mL）与检出时间（DT）之间存在显著的负相关性.统计学配对t检验和卡方检验的p值均＞0.05,表明电导率法与平板计数法对鱼粉饲料细菌总数的检测结果无显著性差异.相比于平板计数法,电导率法的检测周期更短,操作更为简便,作为快速检测鱼粉饲料细菌总数的方法是可行的.     

与乳酸菌具有共生作用酵母菌培养基的优化

以对乳酸菌（LC5）有促进作用的酵母菌（YE4）为研究对象, OD值和活菌数为测定指标,筛选合适的培养基。通过对5种酵母菌常用培养基的初筛及二次筛选,确定在YPD培养基中YE4生长良好。以YPD培养基作为基础培养基,进一步利用单因素试验和正交试验的设计方法对其进行优化,得出改良YPD培养基的最佳成分是大豆蛋白胨为0.4%,胰蛋白胨为0.4%,酵母浸提粉为0.4%,蔗糖为1.2%,蒸馏水为100 mL。改良YPD培养基活菌计数测得的活菌数可达到5.01×108 CFU/mL,比YPD基础培养基高一个数量级; OD值是YPD基础培养基的1.06倍。     

毛竹EMF2类基因原核表达条件优化

在对毛竹EMF2基因功能研究的过程中,需要制备其抗体用于蛋白表达的检测。由于PheEMF2原核表达量低,纯化到的蛋白量不利于抗体制备,所以本研究用正交设计的方法对PheEMF2原核表达诱导条件进行优化,提高其原核蛋白表达量。根据L25(56)正交设计表设计诱导时间、诱导温度、IPTG终浓度、菌液OD值四因素五水平的融合蛋白表达诱导条件。用凝胶图像光密度分析系统分析各诱导条件下融合蛋白的表达量,发现菌液OD值和诱导温度对蛋白表达量有显著影响,而IPTG终浓度和诱导时间对蛋白表达量影响不显著。根据正交设计的效应曲线和方差分析结果,选择在菌株生长值OD600为1.1时,加入IPTG至终浓度1.0mmol/L,放入25℃摇床中振荡8 h诱导融合蛋白表达,融合蛋白的表达量约提升了10倍,占细菌总蛋白量的21.4%。     

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的生长特性

【研究目的】研究尖孢镰刀菌的生长特性，寻找培养过程的异质性指标。【方法】供试菌株为黄瓜尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2和花生尖孢镰刀菌F-P.5.0-030710，培养基采用PSA培养基，装液量为100ml/250ml，接菌量从培养7d的平板上打取3个6mm的菌片，培养温度为25±1℃，摇床转速为110r/min，培养10d，观察测定发酵液颜色、OD值、pH值、菌丝干重变化，并利用聚类分析方法划分生长阶段。【结果】在培养过程中，尖孢镰刀菌发酵液的颜色、OD值、pH值和菌丝干重都会随着培养时间而变化。在相同的培养条件下，来源于不同寄主的尖孢镰刀菌菌株之间在颜色和OD值变化存在着显著性差异，而pH值和菌丝干重变化未表现出显著性差异。来自黄瓜和花生的尖孢镰刀菌菌株的生长分为3个阶段：1~2d为适应阶段，3~5d为对数生长阶段，6~10d为稳定阶段。【结论】尖孢镰刀菌在培养过程的色素变异和OD值的变化可作为菌株培养的表征性特征     

甲氰菊酯降解菌的培养基优化

本研究旨在优化甲氰菊酯降解菌在培养基中的生长条件,探索基础盐培养基配方为该菌的大量繁殖提供理论依据。从淤泥中富集分离筛选出一株甲氰菊酯降解菌(Y1)并保存,经过鉴定该菌属于蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。通过单因素试验测定OD600值确定了该菌繁殖的最适碳源和氮源,正交试验明确最佳基础盐培养基。结果表明：最适碳源与氮源分别为蔗糖和蛋白胨,最适浓度分别为0.15%和2.5%;最佳基础盐培养基配方为：pH 6.0,蔗糖0.15%,蛋白胨2.5%,K2HPO4 0.001%,KH2PO4 0.01%,MgSO4· 7H2O 0.1%,NaCl 0.01%。在优化后的基础盐培养基中Y1 能够大量繁殖,为该菌在甲氰菊酯污染的土壤中进行修复奠定了基础。     

发财树根腐尖孢镰刀病菌生物学特性的研究

本文对发财树根腐尖孢镰刀病菌进行了分离纯化并对其生物学特性进行了研究。结果表明：尖孢镰刀病菌在各个温度下生长速度依次为27℃>24℃>30℃>33℃>36℃>40℃,生长率依次为：97.93%>95.48%>12.75%>4.93%>2.23%>1.48%,27℃为最适生长温度。含毒介质培养生长速率法对药剂的筛选实验表明：精甲咯菌腈在有效浓度为62.5mg/kg,稀释浓度1000倍时的抑制率最高,达80.87%,EC50为64.59mg/L,用最小二乘法计算的药剂的毒力回归方程为: Y=4.351+0.359x；嘧菌酯在有效浓度为250mg/kg,稀释浓度1000倍时,抑制率较明显,为74.19%,EC50为78.17mg/L, 毒力回归方程为: Y=2.419+1.363x；甲基硫菌灵在有效浓度为700mg/kg,稀释浓度1000倍时,抑制率较明显,为85.80%,EC50为202.61mg/L, 毒力回归方程为: Y=0.575+1.919x。     

籼稻谷带菌量与储藏温度和时间回归方程的研究

通过模拟储藏,研究了温度和时间对储藏籼稻谷水分、细菌量和霉菌量的影响.结果表明:随着温度的升高和时间的延长,符合安全水分的稻谷含水量下降,在15℃、20℃时,细菌量和霉菌量基本维持原来水平,储藏200 d后,稻谷的色泽、气味正常,无霉变、生虫现象,而当储藏温度超过25℃时,细菌量和霉菌量下降,但储藏200 d后,稻谷的色泽、气味不正常,并出现生虫现象,因此低温储藏有利于稻谷水分的保持和延缓细菌和霉菌的生长,减少数量和霉变损失.方差分析和回归方程的拟合表明温度和时间是储藏稻谷细菌量或霉菌量变化的极显著影响因素,并且细菌量或霉菌量与储藏温度和时间呈显著的二元线性关系.     

外源蛋白酶对蚯蚓蛋白酶解的影响

蚯蚓为多功能性生物资源, 利用酶解工艺将蚯蚓蛋白制作成的氨基酸原料有广泛的用途。为进一步提高蚯蚓蛋白水解效率,本文在实验室条件下研究了三种外源酶对蚯蚓粗蛋白下脚料水解的影响,重点探讨了酸性蛋白酶加入后鲜蚯蚓浆水解过程中氨基酸浓度的变化,建立了回归方程。结果表明：三种外源蛋白酶对蚯蚓粗蛋白水解率的影响明显,与对照不加酶相比均提高了水解率,顺序为酸性蛋白酶>碱性蛋白酶>中性蛋白酶。鲜蚯蚓浆水解产物的氨基酸浓度与水解时间存在明显的相关性,加酶处理与不加酶处理的回归方程分别为：Y=0.432371*EXP(0.130930*X); Y=0.260455*EXP(0.143428*X),回归方程均达到显著水平。与不加酶处理相比,酸性蛋白酶处理显著提高了鲜蚯蚓浆水解过程中的氨基酸浓度。水解提高率随着水解时间的延长而下降,提高率与水解时间两者呈负相关。     

鲜蛋中沙门氏菌的分离鉴定及生长模型分析

为了了解鲜蛋中沙门氏菌的污染情况及其生理特性,按照国家标准中蛋制品的检验程序,对养鸡场及市场共50个鸡蛋样品中的沙门氏菌进行分离,并对分离出的可疑菌株做生理生化鉴定试验,根据试验结果分析,确定其中1株为沙门氏菌,对其在温度37℃下的生长曲线进行数学分析,得出最适生长模型为MMF模型。     

棉子油分近红外光谱测定技术研究

以近红外光谱分析技术无损、快速和高效等优点,建立棉籽油分含量的近红外分析模型,进行棉籽油分快速大批测定,提高分析水平和效率。218份陆地棉的脱绒光籽为定标样品,通过不同的光谱数学预处理和光谱反射方式,优化棉子含油量近红外光谱法所建立的回归方程。结果表明,采用(2,4,4,1)光谱数学预处理和散射校正(SNV)得到的回归方程效果最好,回归决定系数(RSQ=0.9773)和验证决定系数(1-VR=0.9646)最高,回归标准误差(SEC=0.6977)和交互验证标准误差(SECV=0.8714)最小。对30份验证样品的化学测定值和近红外光谱预测值相关系数高达0.9882,平均偏差0.65%,回归标方程具有很好的预测效果,可以在实践中应用。长江流域棉花杂交种棉子含油量平均值为28.05%,含油量在26.50%~30.05%区间的品种居多,具有很大的改良潜力。     

南方水稻黑条矮缩病发生面积预测模型研究

南方水稻黑条矮缩病是近年来在中国南方稻区新发生的一种重要病毒性病害,在我国许多地区频繁流行成灾。为探索南方水稻黑条矮缩病发生流行动态规律并建立发生趋势预测模型,作者应用相关分析、逐步回归分析和通径分析方法对南方水稻黑条矮缩病发生发展的气象因子、介体虫量进行分析和模拟。结果表明：5—7月气象因子、介体虫量与发生面积均呈正相关,相关性均达显著或极显著水平;通径分析发现8月上旬稻飞虱成虫量和6月下旬—7月上旬降水量之积(X’3)对发生面积的直接作用最大(0.9318),其次为8月上旬稻飞虱成虫量和6月中旬—7月上旬降雨日数之积(X’4),而5月相对湿度(X’1)、5月上中旬相对湿度(X’2)主要通过X’3间接影响发生面积;通过逐步回归建立了预测模型y=-2.521645+0.017466 X’1+0.014457X’2+0.000050X’3-0.000296X’4。利用上述方程对2006—2016年进行回归拟合,模型预测准确、精度高,并对2017年进行预报,拟合值与实测值相差很小,准确率较高。利用该方程可对化州地区乃至粤西地区晚稻南方水稻黑条矮缩病的发生进行预测。     

苹果果实形状和重量的早期预测研究

通过果实生育早期的果形指数和果实纵径 横径可以成功预测苹果果实成熟时的果形指数和单个果实的重量。红富士苹果通过盛花后30d时的果形指数(X)预测成熟时的果形指数(Y)的回归方程为幂函数Y=0.805X0.278,果形指数随盛花后天数的变化拟合抛物线函数Y=1.36-0.009X 0.000035X2。在中国西北黄土高原旱原地区,红富士苹果在盛花后约50d以前果形指数大于1;之后逐渐降低,盛花后约129d时降低至最小0.7814;果实成熟前有所回升,至成熟采收时约为0.8740。通过测量盛花后50d时的果实纵径 横径(X,cm),可以预测成熟时的单果重(Y,g),其回归方程为幂函数Y=0.677X3.2。     

棉花(Gossypium hirsutum)ROP1基因酵母双杂交体系的诱饵载体构建及鉴定

ROP是高等植物里一类分布广泛的信号小G蛋白,在植物生长、发育、抗逆、抗病和激素信号转导过程中起重要调控作用。本研究用PCR体外扩增技术获得棉花GhROP1基因片段,将目的基因与诱饵质粒载体pGBKT7通过双酶切定向重组,构建诱饵质粒pGBKT7-GhROP1,并成功的转入到Y187酵母菌通过缺陷性培养基培养进行毒性和自激活检测。结果表明,成功克隆棉花GhROP1基因,该基因开放阅读框共有591 bp。双杂交诱饵表达载体pGBKT7-GhROP1构建成功,并成功转化酵母菌Y187;结果显示含表达载体的酵母菌Y187在SD/-Trp平板上长势良好,说明表达蛋白对酵母菌无毒害作用。在SD/-Leu,SD/-Trp-Leu,SD/-Trp-Leu-His-Ade平板上则没有生长,说明转化pGBKT7-GhROP1质粒后的Y187酵母菌无自激活发生。本研究结果为下一步利用酵母杂交系统筛选GhROP1蛋白相互作用的蛋白提供理论参考。     

主成分回归分析法在永州烟叶评吸质量与外观质量的关系模型构建中的应用

为了研究烟叶评吸质量指标与外观质量指标的关系,利用统计分析软件SPSS的主成分分析和逐步回归分析的方法建立了湖南永州评吸质量与外观质量的关系模型。结果表明：（1）建立的回归方程：?=1.286+0.150Z1+0.058Z2,回归方程达到极显著水平,方程的决定系数R2=0.893,对烤烟评吸质量进行预测是可行的。（2）通过主成分分析可知,颜色、成熟度和油份是决定烤烟评吸质量的主要因素,叶片结构和身份也是决定评吸质量的重要因素。     

澳洲长鳍鳗各形态性状对体重的影响效果分析

随机选取澳洲长鳍鳗（Anguilla reinhardtii）1龄鱼50尾,分别测量全长、体长、背鳍长、臀鳍长、体高、头长、吻长、眼径、眼间距、口裂宽和体重共11个形态学指标。采用多元分析的方法,计算了以形态性状为自变量,体重为依变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数。结果表明,除眼径和头长以外其他各形态性状与体重的相关性均达到了极显著（P<0.01）水平。剔除了通径系数未达到显著水平的变量,保留了全长、体高和口裂宽三个变量,其中全长对体重的直接影响最大（P1=0.398）。所选性状与体重的相关指数R2=0.965,说明所选性状是影响体重的主要形态性状。采用逐步多元回归方程法建立了回归方程为：Y=-1412.565+1.923X1+13.000X5+15.767X10。式中,X1、X5、X10分别为全长（mm）、体高（mm）和口裂宽（mm）,为澳洲长鳍鳗育种提供了理论依据。