兔出血症-巴氏杆菌病蜂胶二联灭活苗保存期试验

研制兔出血症-巴氏杆菌病蜂胶二联灭活苗2批，分别在4-8℃和室温条件下保存6个月、12个月后进行免疫保护试验。结果显示：蜂胶二联苗在4～8℃和室温条件下保存6个月、12个月，对兔出血症的保护率均为100％；4～8℃保存6个月对巴氏杆菌病的保护率为100％，保存12个月对巴氏杆菌病的保护率为90％；室温保存6个月对巴氏杆菌病的保护率80％，保存12个月对巴氏杆菌病的保护率为70％。据此可以确定蜂胶二联苗的保存期为4～8℃一年或室温半年。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗与相应单苗免疫效力的比较试验

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗分别与两种单苗进行免疫效力、免疫持续期及保存期的试验,试验结果表明:二联蜂胶灭活疫苗对兔病毒性出血症的免疫保护率为100%(10/10),对多杀性巴氏杆菌病的免疫保护率为90%(9/10),而两种单苗的免疫保护均为100%(10/10);二联苗和单苗免疫后第3天对兔病毒性出血症产生部分免疫力,至第10天产生坚强免疫力而对多杀性巴氏杆菌第14天产生坚强免疫力;二联苗和单苗免疫6个月后,对兔病毒性出血症的免疫保护为100%(10/10),对多杀性巴氏杆菌病的免疫保护为90%(9/10);二联苗和单苗在2~8℃和室温条件下保存15个月后,对兔病毒性出血症的免疫保护为100%(10/10),对多杀性巴氏杆菌病的免疫保护为90%(9/10)。二联苗中两组分的配比科学合理且两者之间无干扰作用。     

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联蜂胶灭活疫苗研制

以具有良好免疫原性的兔病毒性出血症病毒野毒WF株和兔多杀性巴氏杆菌C51-17株作为种子,研制出了兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌二联蜂胶灭活苗,并对疫苗进行了免疫剂量、免疫产生期、免疫保护期、保存期等试验,确定出二联苗免疫剂量1.0mL,二联苗在免疫后5天对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,免疫后10天对兔多杀性巴氏杆菌的保护率均达到80%,二联苗分别在免疫后6个月用兔出血症强毒攻击仍产生100%保护,在6个月用1个MLD的兔多杀性巴氏杆菌攻击保护率可达80%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为18个月。     

兔出血症-巴氏杆菌病二联灭活苗的研制

本试验筛选出了具有良好免疫原性的兔瘟强毒株GMH881和兔巴氏杆菌C51-17株,研制出了兔出血症-巴氏杆菌二联灭活苗。确定出二联苗免疫剂量为1.0mL;二联苗在免疫后5d对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,二联苗免疫后7d对兔巴氏杆菌的保护率均达到80%以上;二联苗免疫家兔后7d兔病毒性出血症HI抗体可达22.75,15d明显上升,二联苗HI效价30d达到最高峰,可达28.0,二联苗在60～120d均可维持在27.0～25.5水平,到180d时抗体水平略有下降,为25.25,二联苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击,均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击,保护率可达70%以上;二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔出血症-巴氏杆菌病二联灭活苗的研制

筛选出了具有良好免疫原性的兔瘟强毒株GMH881和兔巴氏杆菌C51-17株,研制出了兔出血症-巴氏杆菌二联灭活苗,对疫苗进行了免疫剂量、免疫产生期、兔出血症抗体测定、免疫保护期、保存期等试验：确定出二联苗免疫剂量1.0 mL;二联苗在免疫后5 d对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,二联苗免疫后7d对兔巴氏杆菌的保护率均达到80%以上;二联苗的兔病毒性出血症抗体测定,结果表明,二联苗免疫家兔后7d HI抗体均可达22.75,15 d明显上升,二联苗HI效价30 d达到最高峰,可达28.0,二联苗在60~120 d均可维持在27.0~25.5水平,到180 d时抗体水平面略有下降为25.25,二联苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击保护率可达70%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔出血症-巴氏杆菌病铝胶二联灭活苗的研制

筛选了具有良好免疫原性的兔瘟强毒株GMH881和兔巴氏杆菌C51-17株,研制出了兔出血症-巴氏杆菌二联铝胶灭活苗,对疫苗进行了免疫剂量、免疫产生期、兔出血症抗体测定、免疫保护期、保存期等试验;确定出二联铝胶苗免疫剂量1.0 mL;二联铝胶苗在免疫后7 d对兔病毒性出血症强毒的保护率达到100%,二联苗免疫后10～14 d对兔巴氏杆菌的保护率均达到75%以上;二联铝胶苗的兔病毒出血症抗体测定结果表明：二联铝胶苗免疫家兔后7 d,HI抗体均可达25.0,15 d明显上升,二联苗HI效价60～90 d达到最高峰,最高可达210,二联苗在120～180 d仍可维持在27.0～29.5水平。二联铝胶苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击保护率可达70%以上,二联铝胶苗4～8℃条件下保护期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔出血症,波氏杆菌病,巴氏杆菌病三联苗与三种单苗免疫比较试验

通过对兔出血证（ＲＨＤ）、波氏菌（Ｂｂ）病、巴氏杆菌（Ｐｍ）病三联苗和三种单苗的免疫比较试验测定，结果三联苗免疫兔对ＲＨＤ、Ｂｂ、Ｐｍ免疫效力分别为１００％（２８／２８）、８８．９％（２４／２７）和８８．５％（２３／２６），对应的三种单苗保护率为１００％（２４／２４）、９１．３％（２１／２３）和８７．５％（２１／２４）；联苗与单苗免疫力产生时间相一致；免疫后持续５个月，三联苗的ＲＨＤ、Ｂｂ、Ｐｍ的保护率分别为１００％（２４／２４）、９１．７％（１１／１２）和８３．３％（１０／１２），对应的单苗保护效果为１００％（２３／２３）、８８．２％（１５／１７）和８８．５％（１２／１４）；联苗与单苗无论冰箱（４－８℃）或室温（＜２５℃）均易保存。比较试验表明，三联苗保持原三种单价的苗克疫效果，三种组分联合制苗无干扰现象。     

兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联蜂胶灭活苗的研制

用兔出血症毒(RHDV)和巴氏杆菌研制成蜂胶佐剂灭活苗,用1.0mL免疫试验兔,免疫后第5天,对RHDV保护率达100%;免疫后第7天对巴氏杆菌的保护率为72.5%,通过HI法监测兔病毒性出血症抗体水平,结果表明:蜂胶苗产生抗体时间较早,第7天后HI效价25.0,第20天效价显著上升达29.25以上,第30天达到最高峰,可达211.0,60~120 d均可维持在27.0~25.5水平,到第180天时抗体水平面略有下降为25.25,蜂胶苗分别在免疫后4个月、6个月用兔出血症强毒攻击均产生100%保护,在6个月用2个MLD的兔巴氏杆菌攻击保护率可达70%以上,二联苗4~8℃条件下保存期暂定为1年,25℃条件下暂定为半年。     

兔出血症、波氏杆菌病、巴氏杆菌病三联苗的研究

兔出血症(RHD)、波氏杆菌(Bb)病和巴氏杆菌(Pm)病是家兔三种主要传染病。采用新的液体培养工艺。使Bh和Pm含菌量稳定在186～230亿/ml、200～260亿/ml之间。用RHD、Bb和Pm联合制成的三联苗免疫剂量为1ml/只,经免疫试验测定,对RHD等5天的保护率达100％(28/28),持续保护6.5个月以上;对Bb和Pm的平均保护率达88.9％(24/27)和88.3％(23/26),6.5个月的保护率仍有75％(9/12)和72.7％(8/11),室温和冰箱均易保存;抗体动态测定与攻毒结果一致。经29.5万头份试用证明,安全可靠,效果良好。     

家兔大肠杆菌-魏氏梭菌二联苗研制及与两种单苗免疫比较试验

应用改进液体培养法研制家兔大肠杆菌——魏氏梭菌二联苗，大肠杆菌抗原含量一般可达220亿～250亿／mL，并对二联苗和对应的两种单苗进行了免疫比较试验。结果二联苗免疫兔对大肠杆菌和魏氏梭菌免疫效力分别达91．7％(22／24)和95．2％(20／21)，而对应的大肠杆菌单苗和魏氏梭菌单苗的保护率分别为91．3％(21／23)和87％(20／23)；免疫后持续4个月，二联苗对大肠杆菌和魏氏梭菌的保护率分别为83．3％(10／12)和81．8％(9／11)；对应的两种单苗保护率分别为75％(9／12)和80％(8／10)；临床应用效果良好。结果表明，研制的二联苗保护率高，两种组分联合制苗无干扰现象，降低了防疫成本。     

鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗与同类产品的免疫效力比较

将鸡新城疫、禽流感（H9亚型,SY株）二联灭活疫苗与市售同类对照苗分不同剂量皮下注射接种30日龄SPF鸡,免疫后定期采血,分离血清,通过检测血清中ND和AI的HI抗体水平比较各组鸡抗体产生期、抗体高峰及免疫持续期,并进行不同血凝抗原检测HI抗体结果的对比。试验鸡血清样品检测结果显示,免疫鸡抗体产生期为免后2周内,免后8周和5周ND和AI的HI抗体滴度分别达到峰值,抗体至少可持续28周以上,两种灭活苗之间免疫效果基本相当。     

山羊痘灭活疫苗免疫持续期试验

将实验室制备的3批山羊痘油佐剂灭活疫苗,分别免疫接种一定数量无羊痘抗体的山羊,山羊于免疫接种后4.5个月、7个月、9.5个月和12个月用AV40株强毒进行攻击。结果显示,3批疫苗接种的山羊免后4.5个月攻毒均100%保护,免后7个月攻毒平均80%保护,免后9.5个月攻毒平均60%保护。实验表明,此山羊痘灭活疫苗免疫后6个月能够维持较高的抗体水平,其免疫持续期可规定为6个月。     

牛溶血性曼氏杆菌及牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗对小鼠的保护性研究

牛溶血性曼氏杆菌及牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌是导致牛呼吸道疾病（bovine respiratory disease,BRD）的重要细菌性病原,每年给养牛业带来巨大的经济损失,目前对其疫苗研究仍显不足。本研究选用牛溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica,Mh） Mh422株和牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm） PmCQ2株作为疫苗菌株,分别制备了2种菌体浓度的Mh和Pm单价灭活菌苗及3种菌量配比（1∶1、2∶1和3∶1）的Mh-Pm二联灭活苗,以小鼠为模型,皮下多点免疫（0.2 mL）,加强免疫2次,免疫剂量均为首免的一半。首免后第7天及其后每隔5 d,小鼠尾静脉采血分离血清,ELISA方法检测抗体效价,三免后第20天,分别以Mh422或PmCQ2进行腹腔攻毒测定免疫保护效果。结果显示,所有小鼠接种疫苗均无不良反应,二免后第10天抗体达较高水平,三免后抗体水平持续升高,第15天到达高峰,其后25 d维持高水平,后缓慢下降。Mh单菌苗的2种免疫剂量对Mh422株攻毒的免疫保护率均为0,而Pm单菌苗的2种免疫剂量对PmCQ2株攻毒的免疫保护率全为100%;Mh和Pm间无交叉免疫保护作用;3种菌量配比的Mh-Pm二联疫苗对Mh422株和PmCQ2株攻毒的各自免疫保护率分别为53%～71%和100%。该研究结果表明,所制备的Mh422单菌苗对同型攻毒无免疫保护作用,在诱导机体抗体产生方面,Mh和Pm间无相互抑制作用,PmCQ2株具有促进Mh422株灭活疫苗对Mh422的免疫保护作用,这为牛溶血性曼氏杆菌和牛多杀性巴氏杆菌二联疫苗的进一步研究提供了理论基础。     

猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)对兔与猪免疫攻毒保护平行关系的研究试验

用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率。结果表明,兔免疫28 d后的血清抗体中和指数为794～1258时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥1479时可获得100%保护;仔猪免疫28 d后的血清抗体中和指数为229～269时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥331时可获得100%保护。兔与仔猪对猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)均产生良好的免疫应答反应,抗体值较高者获得保护率相对较高,兔与猪免疫与攻毒保护呈现平行关系。     

福建省部分规模猪场猪圆环病毒病疫苗免疫效果评价与分析

为了解免疫不同圆环病毒病疫苗的抗体水平,给养殖户提供合适的免疫依据,对福建省不同地区8个猪场在使用不同猪圆环病毒病疫苗和免疫程序后猪群的抗体水平进行检测。结果显示:免疫场和未免疫场各阶段种猪群的猪圆环病毒病抗体阳性率皆为100%,差异不显著(P>0.05);但各阶段种猪群的S/P平均值,免疫场较未免疫场更高;同时通过比较变异系数发现,未免疫场种猪的抗体水平更活跃;14日龄免疫亚单位疫苗后抗体水平较高且维持时间较长,而免疫全病毒灭活苗后抗体水平仍持续下降。综上,种猪群免疫圆环病毒病疫苗是必要的,亚单位疫苗比全病毒灭活苗的免疫效果好。     

Antibody Responses Against Equine Influenza Virus Induced by Concurrent and by Consecutive Use of an Inactivated Equine Influenza Virus Vaccine and a Modified Live Equine Herpesvirus Type 1 Vaccine in Thoroughbred Racehorses

An inactivated equine influenza virus (EIV) vaccine and a live equine herpesvirus type 1 (EHV-1) vaccine are usually administered concurrently to Thoroughbred racehorses in Japan. The objective of this study was to evaluate whether concurrent administration of an inactivated EIV vaccine and a live EHV-1 vaccine in Thoroughbred racehorses influences the antibody response against EIV. We compared the antibody response against EIV in horses administered both vaccines on the same day (Group A; n = 27) and the response in horses administered an inactivated EIV vaccine first and then a live EHV-1 vaccine 1–2 weeks later (Group B; n = 20). In both groups, geometric mean hemagglutination inhibition (HI) titers against A/equine/Ibaraki/1/2007 and A/equine/Yokohama/aq13/2010 increased significantly after EIV vaccination. However, the percentage of horses that showed a twofold increase or greater in HI titers against A/equine/Yokohama/aq13/2010 was significantly higher in Group B (75%) than in Group A (37%; P = .02). These results suggest that the concurrent use of an inactivated EIV vaccine and a live EHV-1 vaccine reduced the immune response against EIV to some extent, and it would be better to use these vaccines consecutively, especially for naïve horses or horses whose vaccination history is incomplete.     

Protection, systemic IFNgamma, and antibody responses induced by an ISCOM-based vaccine against a recent equine influenza virus in its natural host

In the horse, conventional inactivated or subunit vaccines against equine influenza virus (EIV) induce a short-lived antibody-based immunity to infection. Alternative strategies of vaccination have been subsequently developed to mimic the long-term protection induced by natural infection with the virus. One of these approaches is the use of immune-stimulating complex (ISCOM)-based vaccines. ISCOM vaccines induce a strong antibody response and protection against influenza in horses, humans, and a mouse model. Cell-mediated immunity (CMI) has been demonstrated in humans and mice after ISCOM vaccination, but rarely investigated in the horse. The aim of this study was to evaluate EIV-specific immune responses after intra-muscular vaccination with an ISCOM-EIV vaccine (EQUIP F) containing both equine influenza H7N7 (A/eq/Newmarket/77) and H3N8 (A/eq/Borl?nge/91 and A/eq/Kentucky/98) strains. The antibody response was measured by single radial haemolysis (SRH) assay using different H3N8 EIV strains. Stimulation of type-1 immunity was evaluated with a recently developed method that measures EIV-specific IFNgamma synthesis by peripheral blood lymphocytes (PBL). The protective efficacy of this ISCOM-based vaccine against challenge infection with a recent equine influenza (H3N8; A/eq/South Africa/4/03) strain was also evaluated. Vaccinated ponies developed elevated levels of EIV-specific SRH antibody and increased percentage of EIV-specific IFNgamma(+) PBL, whereas these responses were only detected after challenge infection in unvaccinated control ponies. Vaccinates showed minimal signs of disease and did not shed virus when challenged shortly after the second immunisation. In conclusion, evidence of type-1 immunity induced by an ISCOM-based vaccine is described for the first time in horses.     

内蒙古地区牛羊口蹄疫灭活疫苗的免疫效果比较研究

为准确掌握牛羊口蹄疫疫苗免疫效果,2012年对内蒙古自治区的牛羊口蹄疫O—AsiaI型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗免疫效果进行了监测。采用液相阻断ELISA方法。共检测了8个旗县23018份免疫牛羊口蹄疫O—AsiaI型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗15日、30日、60日的血清中口蹄疫免疫抗体水平。结果显示,牛羊口蹄疫疫苗免疫效果总体良好,免疫抗体合格率超过了70％。规模化奶牛养殖场免疫效果稳定,散养地区免疫效果稳定性差,且不同厂家的疫苗免疫效果不同,加强免疫后A、B、D三个厂家抗体合格率能达到100％,C厂家的免疫效果较差,抗体合格率为93-3％。采用3ABC—ELISA检测试剂盒对部分地区牛羊进行感染抗体检测,结果为阴性。