小鼠和猪胚胎冷冻保存技术的研究进展

从胚胎冷冻保存技术原理对小鼠和猪胚胎冷冻发展速度相差悬殊的原因进行了概述,比较了小鼠和猪胚胎冷冻技术发展的历程及影响两种动物胚胎冷冻的因素,并展望了未来猪胚胎冷冻保存技术。以期能对今后的研究提供参考。     

显微注射抗冻剂对牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎毒性及冷敏感性的影响

摘要 鱼类胚胎冷冻保存经过多年研究,尽管有所突破,但目前仍未达到应用水平,其主要原因是由于鱼类胚胎体积大、卵膜通透性差等特点,导致传统的平衡法,无法使抗冻剂足够、有效的进入胚胎内部起到保护胚胎的作用。而在鱼类胚胎冷冻保存中利用显微注射技术,可直接将抗冻剂注射到鱼类胚胎卵黄囊内,这一定程度上弥补了普通平衡法的不足,提高抗冻剂对胚胎的保护程度。本研究主要对抗冻剂的选择、抗冻剂对牙鲆胚胎的注射剂量、注射浓度、以及注射后牙鲆胚胎的冷敏感性进行了比较分析。结果表明：1、牙鲆胚胎较适宜的显微注射剂量为750pl。2、几种抗冻剂注射牙鲆胚胎后的毒性大小相对排列为PVP>蔗糖,DMSO > MeOH > PG,其中注射PG获得的胚胎成活率和孵化率最高,注射PVP获得的胚胎成活率和孵化率最低,而PG与MeOH组成混合抗冻剂PM毒性更低获得的胚胎成活率和孵化率更高。而任何一种抗冻剂均随着浓度的增加其毒性随之增加。3、另外,在冷敏感实验中,显微注射6M的PM的胚胎胚胎,应用程序化法处理,以2℃/min的速率降至-20℃,平衡10min后解冻处理,发现注射PM的胚胎低温处理后成活率为25.07±1.57%,而6M的PM五步平衡法同步处理的对照组胚胎成活率为20.88±2.84%,说明显微注射的胚胎冷敏感性一定降低。     

猪卵母细胞冷冻损伤的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精、核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径。在此,综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理及冷冻保存对卵母细胞超微结构和发育潜力的影响,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率。     

影响猪卵母细胞冷冻效果的主要因素及其研究进展

卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精和核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径.本文综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理并对影响卵母细胞冷冻保存的各种因素进行分析,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率.     

“哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存技术研究与应用”取得突破性成果

动物科技学院动物繁殖教研室的自选研究课题“哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存技术的研究与应用”于１９９９年１２月１８日通过鉴定。专家委员会认为:该项目在系统研究哺乳动物胚胎对几种常见抗冻剂的耐受性和细胞膜通透性的基础上,结合抗冻剂的化学特点,研制出在常温下高效、低毒的冷冻保护液ＥＦＳ和ＧＦＳ,并建立了简易、快速、稳定的胚胎玻璃化冷冻技术方法。运用这种技术方法已成功地对小鼠、家兔、绵羊和牛的体内、外受精胚胎及显微操作胚胎进行了玻璃化冷冻保存。冷冻胚胎解冻后的体内、外继续发育率高于国内同类研究水平,达到或超过本…     

奶牛胚胎冷冻保存技术的研究

<正> 自从Whittngham发现经超低温冷冻保存的小鼠胚胎可以成活后,超低温冷冻保存哺乳动物胚胎的方法取得很大进展。目前许多国家都在对不同的胚胎冷冻保护技术进行探讨,如加入冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻程序的选择、脱除保护剂的方法等,试图寻找一个胚胎冷冻和解冻的最佳方案。我们从87年开始从事这方面的研究,其目的是探索胚胎冷冻的方法和步骤、寻找适宜于基层生产单位应用的解冻和脱除冷冻保护剂的简易方法。为今后胚胎移植的推广应用打下基础。     

鱼类胚胎低温保存

低温生物学技术的问世，为人类控制利用生物资源提供了有效的手段。畜牧业、医疗保健已率先尝受到了这一技术成果，当今家畜胚胎的低温保存令人振奋鼓舞，其应用程度已遍及全球了。然而鱼类胚胎的冷冻保存研究进展几乎是停滞的，原因不外现行试验研究手段受限以及鱼卵与胚胎的自身特性所致。近年我们对此也进行了初步的探索，并就此课题的研究前景借本文一并讨论。     

鱼类胚胎低温保存

低温生物学技术的问世，为人类控制利用生物资源提供了有效的手段。畜牧业、医疗保健已率先尝受到了这一技术成果，当今家畜胚胎的低温保存令人振奋鼓舞，其应用程度已遍及全球了。然而鱼类胚胎的冷冻保存研究进展几乎是停滞的，原因不外现行试验研究手段受限以及鱼卵与胚胎的自身特性所致。近年我们对此也进行了初步的探索，并就此课题的研究前景借本文一并讨论。     

绵羊胚胎冷冻保存及移植的研究

本研究的目的在于建立绵羊胚胎的慢速冷冻和玻璃化快速冷冻保存方法,为绵羊胚胎移植技术应用于生产提供保证。结果:慢速冷冻保存,解冻后正常胚胎占72％,移植受体的受胚率33％、产羔率66％。玻璃化快速冷冻保存,解冻后正常胚胎率亦达72％,移植受体3只,产羔4只。     

牛胚胎冷冻技术及冷冻保护剂研究进展

胚胎冷冻保存是胚胎移植过程中重要的步骤之一,在地方牛品种遗传资源保护方面具有广泛的应用价值。当前胚胎冷冻技术有3种,一是慢速冷冻法,二是快速冷冻法,三是玻璃化冷冻法,冷冻保护剂可分为细胞内液冷冻保护剂、细胞外液冷冻保护剂与抗冻蛋白。该文综述了国内外牛胚胎冷冻技术及冷冻保护剂的研究进展,旨在为相关从业人员提供技术参考。     

牛胚胎移植技术产业化推广模式探索

正家畜胚胎移植技术(ET),尤其是牛胚胎移植技术经过几十年的研究日趋成熟并在生产中得到了广泛的应用,成为家畜育种和快速扩繁的重要技术方法。牛胚胎移植技术是加速遗传进展及在国家和国际上引种的重要工具。同时,将胚胎冷冻保存有助于保护现有的遗传资源。目前,可移植胚胎通过在体内超数排卵和胚胎采集(MOET)及活体采卵体外受精(OPU-IVF)获得。无论是MOET还是OPU-IVF技术,大量胚胎的产生依赖于对供体母牛使用促卵泡激素(FSH)进行卵巢超数排卵处理。世界上每年大约产生130万余枚胚胎,超过90%的经过基因选择模式获得的种公牛来自胚胎移植。     

水污染对鱼类性腺及胚胎发育的影响

随着我国工业和化学技术的飞速发展,工业废水、化工污染及人类生活对水资源的污染问题日益严重。作为鱼类赖以生存的环境,水资源的污染情况已经严重影响到鱼类的正常生存发展。本研究就当前我国水污染对鱼类性腺及胚胎的发育影响展开分析,从对鱼的生理、神经及胚胎等方面的影响进行具体研究,以期全面改善水资源环境,促进鱼类的正常生长。     

哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展

[目的]介绍哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[方法]从冷冻原理、防冻剂种类、冷冻方法、解冻方法等方面综述了哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[结果]胚胎冷冻保存的原理是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶;防冻剂的种类大致分为低分子量渗透性防冻剂、低分子量非渗透性防冻剂、大分子物质、生物活性物质;胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法、玻璃化冷冻法和快速冷冻法;解冻方法主要介绍了快速解冻。[结论]胚胎冷冻保存技术的应用愈加广泛,将对胚胎生物工程和其他生物技术产生推动作用。     

动物胚胎冷冻保存技术的研究进展

分析了动物胚胎冷冻保存的机理,综述了几种常见的动物胚胎冷冻保存方法的研究进展,并对动物胚胎玻璃化冷冻保存技术的发展前景进行了展望。     

哺乳动物卵母细胞和胚胎冷冻损伤研究进展

哺乳动物卵母细胞和胚胎的冷冻保存在胚胎工程技术方面有重要意义。卵母细胞和胚胎在冷冻保存过程中很容易受到冷冻损伤的危害,甚至会影响细胞超微结构。冷冻损伤包括细胞膜、细胞质、细胞核以及细胞外透明带、卵丘细胞的损伤。阐述了目前在这些方面的研究进展,并探讨了冷冻损伤的机制,以期为今后改善冷冻保存技术提供理论依据。     

小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存

以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<0.05);与其他发育阶段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率;小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组,但无统计学差异(P>0.05)。结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行OPS法冷冻保存,可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低。     

奶牛受精卵的移植及其冷冻保存新技术的初报

本文叙述了胚胎移植及胚胎冷冻保存新技术的操作过程。其中包括:①激素超排处理;②受精卵收集;③胚胎冷冻保存;④胚胎解冻;⑤胚胎移植等。同时就其操作方法从理论上给以分折讨论。     

21世纪哺乳动物胚胎生物工程发展趋向

动物胚胎生物工程主要是指在实验室条件下,对动物胚胎进行人为干预、改造和操作,按照人们的意愿生产某种性别或特定功能动物的实践。进入21世纪以来,动物胚胎生物工程技术发展迅速,研究不断深入,在动物配子/胚胎超低温冷冻保存、MOET育种、性别鉴定与控制、转基因、克隆和胚胎干细胞分离与培养技术等研究领域取得了令人瞩目的成就,同时也突现了许多新的研究热点和存在的问题。该文围绕哺乳动物配子与胚胎生物工程中几个热点研究进行简述。     

我国鱼类胚胎发育研究进展

鱼类胚胎发育一直都是水产育种工作中最为关键的一个环节,对种群延续及渔业资源可持续发展也至关重要.而鱼类胚胎在发育过程中极易受外界环境的影响,进而对胚胎受精率和孵化率有较大影响,因此需要对不同鱼类胚胎发育的生物学特征进行深入研究.本研究通过对我国近些年来鱼类胚胎发育的研究现状进行总结,分析探讨了孵化温度、盐度及其他因素对我国鱼类胚胎发育的影响,最后也探讨了我国杂交鱼类胚胎发育的研究近况,以期为我国更多鱼类繁育研究提供一定参考.     

小鼠扩张囊胚细胞膜对不同抗冻保护剂通透性的测定

胚胎玻璃化冷冻保存最重要的条件是胚胎细胞膜对抗冻保护的通透速度,即细胞内外液保护剂达到平衡和时间。温度及抗冻剂的种类不同,其通透性速度各异。本试验将玻璃化抗冻液中常用的几种抗冻保护剂,如乙二醇,丙三醇,二甲基亚砜,乙酰胺及丙二醇的通透性进行比较。