链霉菌NW136菌株发酵条件的研究

对拮抗链霉菌NW136液体发酵条件进行了研究.认为其产抗培养基配方为黄豆饼粉2.0%,葡萄糖1.5%,淀粉1.5%,K2HPO40.05%,CaCO20.5%.NW136菌株在28℃条件下采用接种8%量,发酵初始pH值为7.5.在一定通气量下.经过108 h振荡培养(210 r/min).,其抑菌率可达86.26%.     

利用基因组DNA诱变技术选育高抑制物耐受性工业酵母菌

通过化学诱变和基于基因组DNA诱变的遗传重组技术,对乙醇工业酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的抑制物耐受性进行改造,获得了重组酿酒酵母HN-1-24,其抑制物耐受性能和发酵性能均得到了提高。重组菌株在含7 g/L乙酸和1 g/L糠醛的抑制物耐受性发酵培养基中,具有良好的糖转化率和乙醇产量,发酵100 g/L葡萄糖能够产生38 g/L乙醇。在纤维素水解液发酵培养中进行乙醇发酵,发现重组菌株的乙醇发酵效率明显快于原始菌株,发酵时间提前6 h,且发酵终点乙醇产量为37 g/L,比原始菌株HN-1提高了8.8%。     

高产丁醇菌株诱变选育及发酵研究

菌株是丁醇发酵生产的重要因素,优良丁醇菌株的选育及发酵条件优化是提高丁醇产量的有效途径。本研究选取工业上重要的产丁醇菌株——拜氏梭菌Clostridium beijerinckii ATCC 55025为对象,进行紫外诱变,获得了一株丁醇产量高、耐受性强和稳定性好的优良突变株Clostridium beijerinckii U-57,由中国典型培养物保藏中心保存,注册号为CCTCC M 2013208。该突变株发酵产丁醇和总溶剂(丙酮、丁醇、乙醇)分别为6.44g/L、10.57 g/L,较原始菌株分别提高了7.15%、6.98%。采用Plackett-Burman设计以及Box-Behnken响应面设计,对突变株U-57的最佳培养基组分进行了筛选。进一步通过正交实验对突变株U-57的最佳发酵条件进行了优化,发酵得丁醇和总溶剂产量分别为7.85 g/L、12.28 g/L,比优化前分别提高了21.9%、15.3%。研究结果为进一步工业化应用提供了基础。     

菌根辅助细菌短小芽孢杆菌HR10扩繁条件优化

菌根辅助细菌(mycorrhiza helper bacteria,MHB)短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HR10可与外生菌根真菌(ectomycorrhizal fungi,EMF)互作,对马尾松具有显著促生作用。为将短小芽孢杆菌HR10进行规模化应用,在前期对其增殖扩繁培养基成分优化的基础上,对短小芽孢杆菌HR10培养条件(p H、发酵瓶装液量、发酵温度、接种量)进行了试验优化。结果表明,该菌株最适扩繁条件为:p H 6.5、装液量50%、发酵温度28℃、接种量5%。发酵液生物量在此条件下比前期的培养条件下提高了10.4%。     

灵芝菌发酵枇杷叶茶的研制

以枇杷叶为主料,研究利用灵芝菌来发酵枇杷叶制成养生茶,并测定其营养成分与重金属、农残含量。结果表明：美芝、大红芝可作为发酵枇杷叶的灵芝菌株;美芝菌丝生长速度较大红芝的快,生长速度配方B>配方C>配方A;添加少量的玉米粉、甜叶菊能够促进灵芝菌丝的生长,添加少量的甜叶菊有助于提升发酵茶的口感;发酵后的枇杷叶中多糖、总蛋白、游离氨基酸含量均有显著增加,但三萜酸含量有所下降;不同灵芝菌株发酵后的枇杷叶营养成分有所差别;发酵后的枇杷叶的重金属、农残含量均符合检测标准。     

一株桑椹菌核病生防菌分离鉴定及其拮抗作用分析

桑椹菌核病是主要由桑实杯盘菌Ciboria shiraiana、桑椹核地杖菌Scleromitrula shiraiana和肉阜状杯盘菌Ciboria carunculoides引起的果桑毁灭性病害。采用组织分离法从健康桑椹中分离纯化获得内生细菌Wh-1,对其进行抑菌谱测定和种类鉴定;以桑实杯盘菌为靶标菌株研究Wh-1发酵滤液拮抗活性,分析拮抗机理。结果表明:Wh-1对分离自发病桑椹上的真菌具有显著拮抗作用,对桑椹核地杖菌,肉阜状杯盘菌,桑实杯盘菌的抑菌率分别为100%,100%,63.15%;基于形态学、Biolog鉴定及16S rDNA序列分析结果,将该菌株鉴定为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezens,其在PDB中振荡培养48 h,发酵滤液具有较强拮抗活性;PDA平板中发酵滤液的体积分数为5%时可完全抑制菌丝的生长;且发酵滤液热稳定性好。发酵滤液对桑实杯盘菌菌丝有致畸作用,Wh-1菌株具有脂肽基因(srfAA)、芽孢菌霉素基因(bmyB)、杆菌溶素基因(bacA)、丰原素基因(fenD)和生物素基因(bioA)脂肽类化合物合成相关功能基因。菌株Wh-1可作为开发桑椹菌核病生防制剂较为理想的候选菌株。     

杉木和湿地松容器育苗轻基质配方优选

为了降低容器育苗轻基质成本,提高林区易获取轻基质比例,将泥炭、蛭石、珍珠岩、发酵牛粪、发酵松鳞、发酵木屑、砻糠按不同体积比配制成7种不同配方基质,每立方米基质施加N、P₂O₅、K₂O含量分别为18%、6%和12%的控释肥4 kg,研究其对杉木Cunninghamia lanceolata和湿地松Pinus elliottii 1年生实生容器苗成活率和生长量的影响。结果表明,不同配方基质对1年生实生容器苗苗高、地径生长量和成活率均有显著影响,综合生长性状和成本,筛选出适合培育1年生杉木和湿地松实生容器苗的最优基质配方均为泥炭∶珍珠岩∶发酵牛粪∶发酵木屑∶发酵松鳞=0.3∶0.1∶0.2∶0.15∶0.25。尽管筛选的配方与传统配方(泥炭∶蛭石∶珍珠岩=0.4∶0.3∶0.3)在苗木生长量和成活率上没有显著差异,但育苗成本降低了25%。以上研究结果可为南方地区杉木和湿地松容器苗高效培育提供理论指导。     

自带介质血红密孔菌NFZH-1的鉴定及其木质素降解特性

菌株自带介质可提高其漆酶降解木质素能力,因此自带介质高产漆酶菌株的筛选、鉴定对漆酶的商业应用将起到促进作用。从南京山林地区分离出两株血红密孔菌NFZH-1和NFZH-2,并以杂色云芝为对照,研究了两株血红密孔菌发酵产漆酶和木质素降解特性。首先通过形态学特性鉴定了NFZH-1为自带介质血红密孔菌。其次以愈创木酚为反应底物,平板接种菌株,培养5天,NFZH-1颜色圈较菌丝圈大,且颜色最深;经10天固态发酵,NFZH-1所产漆酶酶活高达23600 U/g,且未检测出木质素过氧化物酶( LiP)和锰过氧化物酶( MnP)。平板显色和固态发酵产酶结果表明自带介质血红密孔菌NFZH-1为漆酶高产菌株。麦草粉经菌株 NFZH-130天降解,木质素降解率、综纤维素降解率分别达56.7%和36.6%,表明血红密孔菌NFZH-1为选择性高木质素降解活性菌株。     

自带介质血红密孔菌NFZH-1的鉴定及其木质素降解特性（英文）

菌株自带介质可提高其漆酶降解木质素能力,因此自带介质高产漆酶菌株的筛选、鉴定对漆酶的商业应用将起到促进作用。从南京山林地区分离出两株血红密孔菌NFZH-1和NFZH-2,并以杂色云芝为对照,研究了两株血红密孔菌发酵产漆酶和木质素降解特性。首先通过形态学特性鉴定了NFZH-1为自带介质血红密孔菌。其次以愈创木酚为反应底物,平板接种菌株,培养5天,NFZH-1颜色圈较菌丝圈大,且颜色最深;经10天固态发酵,NFZH-1所产漆酶酶活高达23 600 U/g,且未检测出木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)。平板显色和固态发酵产酶结果表明自带介质血红密孔菌NFZH-1为漆酶高产菌株。麦草粉经菌株NFZH-1 30天降解,木质素降解率、综纤维素降解率分别达56.7%和36.6%,表明血红密孔菌NFZH-1为选择性高木质素降解活性菌株。     

一株分离自竹黄产蒽醌类色素菌株的鉴定及其培养特性

以分离自竹黄菌天然子座的LBR-SB6菌株为出发菌株,通过对形态特征、培养特性的研究,确定了该菌株为曲霉菌属Aspergillus sp.以改良查氏培养基为基础,对LBR-SB6液态发酵碳氮源等条件作了初步探讨,结果表明:乳糖、麦芽糖和玉米浆、亚硝酸钠分别是菌株生长和产色素的最佳碳源和氮源,1.0%竹汁对菌株生物量和色素生成量具有明显的促进作用.最终确定了LBR-SB6菌株液态发酵培养的最佳条件为:乳糖2%,亚硝酸钠0.2%,玉米浆0.1%(以干物质计),1.0%竹汁,磷酸氢二钾0.1%,硫酸镁0.025%,氯化钾0.5%,硫酸亚铁0.001%;最适温度25～28℃,摇床转速150～200 r/min.起始pH值7.6～8.0.研究结果将为蒽醌类色素的生物合成以及在医药领域的研究应用提供一定的科学依据.     

Induction of tumours by various strains of Agrobacterium tumefaciens on Abies nordmanniana and Picea abies

Abies nordmanniana and Picea abies seedlings were inoculated with a wild‐type (C 58) or an attenuated strain (rooter or shooter mutants) of Agrobacterium tumefaciens. Large tumours were formed on A. nordmanniana in response to the wild‐type and rooter strains, 60–65 % of the seedlings being susceptible. Smaller tumours were formed on Picea abies in response to the wild‐type strain, at least 12% of the seedlings being susceptible. Tumours from both species induced by the wild‐type strain grew in vitro on medium without added phytohormones.     

硫磺菌液体培养基及pH值条件的研究

本试验以硫磺菌菌丝体的生物量为测量指标,对硫磺菌菌株6 600液体培养基配方以及初始pH值条件进行了研究。结果表明,硫磺菌菌株6 600液体培养最佳培养基配方为:玉米粉3%,蛋白胨1.5%,MgSO4.7 H2O0.05%,KH2PO40.2%。液体培养基最适初始pH值为5.0。液体培养基中添加微量的VB1不利于菌丝的生长。     

紫外诱变提高Pachysolen tannophilus单宁耐受性及产燃料乙醇性能

通过对Pachysolen tannophilus 1770进行紫外诱变和单宁浓度梯度驯化培养,以乙醇产量为筛选指标,筛选获得2株稳定的单宁耐受性突变株P05和P18。比较了突变菌株P18与原始菌株P.tannophilus 1770的单宁耐受性,乙醇耐受性和发酵橡子淀粉产乙醇的情况。结果表明,P05和P18有稳定的遗传特性,经5代传代后发酵70 g/L除单宁的橡子淀粉时,P05和P18发酵液中乙醇质量浓度达到71.30和77.07 g/L,较原始出发菌株P.tannophilus 1770增加了13.95%和23.17%。P18有较好的乙醇耐受性和单宁耐受性,相比原始菌株P.tannophilus 1770,在含单宁2.00%的培养基中,P18生物量增加53.33%,在含单宁2.50%的培养基中生物量增加43.48%;在含乙醇2.00%的培养基中生物量增加8.82%。采用突变菌株P18发酵橡子淀粉可以将橡实单宁的浸提取次数从5次减少到3次,从而可以简化生产工艺,降低生产成本。突变菌株P18发酵浸提3次橡子淀粉的最适发酵温度为30℃,最适初始p H值为5.5,最适接种量为6.0%~8.0%,在此发酵条件下发酵液中乙醇质量浓度达到85.18 g/L,乙醇产量达到0.37 g/g。     

大别山野生“扒皮菇”菌种分离与栽培条件研究

选择不同培养基对大别山野生＂扒皮菇＂菌种进行分离与栽培试验研究。结果表明,PDA培养基可以作为野生扒皮菇母种培养基,母种菌丝长势较好,长速较快。以小麦培养基作为栽培种培养基菌丝生长最好,棉籽壳培养基次之,玉米芯培养基最差。3种培养基在温度20~30℃,昼夜平均温差14℃,pH值4~4.5,空气相对湿度85%~95%条件下,均未有子实体的出现。     

软枣猕猴桃组织培养快繁体系的建立

以黑龙江省采集的软枣猕猴桃野生驯化品系雌株4021、雄株4023为实验材料,研究适宜的腋芽萌发、丛生芽增殖、继代时间以及生根的培养基,并探讨了适宜的移栽条件,以期建立猕猴桃组织培养快繁体系,可加快野生优良种质的驯化、选育及用于种质资源保存。试验结果表明:软枣猕猴桃生长培养基采用1~2 mg/L 6-BA+0.1~0.5 mg/L IAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂;增殖培养基采用0.5~1 mg/L 6-BA+0.5~1 mg/L ZT+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,40 d继代一次;生根培养基采用1/2MS+0.2~0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。软枣猕猴桃组培苗高度不超过1.5 cm、根系小于0.5 cm时移栽;移栽后遮光率不高于60%,空气湿度不低于40%,环境温度不低于15℃、不高于30℃,移栽成活率可达到93%。     

Dynamics of symbiotic establishment between an IAA-overproducing mutant of the ectomycorrhizal fungus Hebeloma cylindrosporum and Pinus pinaster

To clarify the early steps of symbiotic establishment, we studied the dynamics of Pinus pinaster (Ait.) Sol. tap root colonization and mycorrhiza formation by an IAA-overproducing mutant of the ectomycorrhizal fungus Hebeloma cylindrosporum Romagnesi and by the corresponding wild type strain. Differences between wild type and mutant strains were quantitative rather than qualitative and were detected two days after inoculation. Both fungal strains established a typical Hartig net when they colonized the tap roots. Consequently, colonized tap roots exhibited features of a true mycorrhiza and fungal colonization enhanced plant growth. Fungal colonization and Hartig net formation were more rapid with the mutant than with the wild type. Colonization, especially with the mutant strain, increased rhizogenesis and the production of mycorrhizas. The mutant formed a hypertrophic Hartig net in tap roots and mycorrhizal short roots and we obtained evidence that the process of short root transformation into mycorrhiza started before their emergence from the tap root. Hyphae of the Hartig net in the tap root penetrated the cortex of young lateral roots at the beginning of their elongation, after the endodermis layer broke under the pressure of the elongating lateral root. Colonization was inhibited when triiodobenzoic acid was added to the culture medium, providing circumstantial evidence that auxin is involved in mycorrhiza formation.     

珍珠梅全光照扦插育苗试验

在山西省交城县采用全光照自动间歇喷雾装置对野生珍珠梅优良单株进行嫩枝扦插试验。结果表明：在7月份，剪取当年生半木质化嫩枝的梢部和中部，用ABT1号、3号、6号，浓度均为0．01％浸泡1h。在河砂和林土的人工混合基质上扦插，生根效果最佳。     

长白松野生种群株间种实性状多样性的研究

以长白松野生种群不同植株的果实与种子为材料,对其性状多样性进行观测与分析,结果表明：不同植株的球果大小、种翅大小与特征、种皮特征、果鳞开裂程度等性状均存在差异或明显差异。各植株的平均出种率均值为1.1%,变化范围在0.28%～2.65%之间;各植株种子的成熟粒百分率的均值为82.7%,变化范围在56.5%～94.0%之间;种子千粒重变化范围在6.6～11.5 g之间,均值为8.3 g,株间差异极显著（F0.01=550＊＊）,主要由遗传差异所造成。长白松野生种群不同植株间的种实性状表现出明显的多样性。     

Micropropagation of western hemlock (Tsuga heterophylla [Raf.] Sarg.) from embryonic explants

An in vitro propagation protocol is described for western hemlock, an important forestry species in Canada. For shoot bud induction, embryonic explants were placed initially on one-third strength Schenk and Hildebrandt medium containing 5 M N⁶-benzyladenine (BA) or 5 M BA in combination with either 5 M kinetin or 5 M 2-isopentenyl adenine for 14 days. The explants were transferred to basal medium without cytokinins for 3 weeks, and then to basal medium containing 0.05% activated charcoal. Elongating shoots were subcultured every 4 weeks on charcoal medium. Shoots, 10 mm in stem height, were rooted either in agar or sterilized peat/perlite (1:1). Up to 70% of the shoots formed roots when they were transferred to the latter, moistened with 1/2 strength Gresshoff and Doy medium containing 5 M -naphthaleneacetic acid. About 90% of the plantlets survived transfer to greenhouse conditions.     

华中五味子两个不同野生雄株花粉特性研究

华中五味子是重要的中药材。为给野生华中五味子的引种驯化和开发利用提供参考依据,采用电镜扫描技术、纤维素酶法、TTC法、琼脂固体培养法、授粉比较等试验手段,对河南省伏牛山地区华中五味子两个不同野生雄株的花粉形态、花粉量、花粉生活力、花粉离体萌发特征、授粉特性进行了研究。结果表明:华中五味子两个不同野生雄株的花粉均呈辐射对称状,其外壁均具网状雕纹,与雄株B花粉相比,雄株A花粉的萌发沟长、网眼小而网脊宽;雄株A的单药花粉量高于雄株B;两个雄株的花粉均在散粉24 h后失去活性,且其失去活性的趋势相似,但雄株A的花粉活力在其失活前始终强于雄株B的花粉活力;蔗糖浓度、硼酸浓度对华中五味子两个野生雄株花粉萌发率的影响均达到极显著水平;花粉萌发率,雄株A低于雄株B;雄株A花粉的最适萌发培养基为1%琼脂+0.015%硼酸+10%蔗糖,雄株B花粉的最适萌发培养基为1%琼脂+0.020%硼酸+15%蔗糖;雄株A、雄株B人工授粉的花朵结实率、心皮结实率均高于其自然授粉的结实率;花朵结实率,雄株A高于雄株B;而心皮结实率,雄株A低于雄株B。