应用多聚酶链反应检测生鸡肉中沙门氏菌的研究

目的:建立快速、特异、灵敏的PCR方法以检测生鸡肉中的肠炎沙门氏菌。方法:以肠炎沙门氏菌的sefA基因作为靶序列设计一对引物,将样品增菌后用煮沸法提取细菌基因组DNA进行检测。结果:每克生鸡肉污染3.0×10°CFU肠炎沙门氏菌,经16h增菌培养后可扩增出500bp特异性性DNA带,对28份屠宰场样品的检测结果与传统方法相符合。结论:PCR法适于生鸡肉中肠炎沙门氏菌的快速、准确检测。     

水产品中4种常见致病菌多重PCR检测方法的建立及评价

根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因nuc、沙门氏菌的侵袭蛋白基因invA、志贺氏菌的侵染性质粒抗原H基因ipaH和副溶血性弧菌的毒力表达调控基因toxR设计引物,建立一种快速检测水产品中上述4种常见食源性致病菌的多重PCR方法。结果显示,沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌及副溶血性弧菌的多重PCR扩增片段产物大小分别为549、426、348和243 bp,该检测方法具有良好的特异性和灵敏度。设计优化了可用于水产样品中4种目标致病菌的共增菌培养基,该方法应用于35份实际水产样品的检测,并与国标方法对比验证,4种致病菌的整体符合率达94%以上,两种检测方法无显著性差异(P>0.05)。可见,该多重PCR方法可应用于水产品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌及志贺氏菌4种食源性致病菌的快速检测和分子流行病学调查。     

生猪屠宰加工流通环节沙门氏菌的监测研究

沙门氏菌在各种动物以及人类当中分布广泛,其中有些菌株可导致猪病,这种细菌主要在生长猪以及有些母猪的肠道内繁殖。感染猪只可连续数周甚至数月从粪便中排出病原,而不表现任何症状。应用沙门氏菌快速检测方法对生猪加工进行流行病学监测、分析确定生产流通过程的危害因素,以最大限度地提高猪肉加工的质量和安全性。     

生猪屠宰加工流通环节沙门氏菌的监测研究

沙门氏菌在各种动物以及人类当中分布广泛，其中有些菌株可导致猪病，这种细菌主要在生长猪以及有些母猪的肠道内繁殖。感染猪只可连续数周甚至数月从粪便中排出病原，而不表现任何症状。应用沙门氏菌快速检测方法对生猪加工进行流行病学监测、分析确定生产流通过程的危害因素，以最大限度地提高猪肉加工的质量和安全性。     

贝类派琴虫PCR检测方法的建立及初步应用

根据派琴虫的基因保守序列设计了特异性引物,对派琴虫的DNA进行PCR扩增并将产物克隆到pMD18-T载体后测序.结果表明,扩增大小为596bp,与预期扩增序列同源性为99.8%.该PCR方法检测灵敏度高,最低可检测1pg的派琴虫DNA;特异性强,对荧光假单胞菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌、葡萄球菌、副溶血孤菌、沙门氏菌、诺瓦克样病毒等贝类病原体的扩增均为阴性.用该PCR技术对广西沿海的104份牡蛎、49份贻贝和20份文蛤病料进行检测,阳性率分别为14.6%、10.6%和15.0%.结果显示,派琴虫广泛存在于中国南方沿海的养殖贝类中,建立的PCR方法可用于贝类派琴虫的临床快速检测.     

自由市场鲜鸡蛋黄中沙门氏菌的检测

从山东省潍坊市奎文区早春园自由市场随机购买鲜鸡蛋30枚作为检样,蛋黄进行沙门氏菌的检测,通过预增菌、增菌、分离培养及鉴定,发现所购买的这些鸡蛋黄中沙门氏菌检出阳性率为76.7%。     

某猪场猪沙门氏菌病的诊断和药敏实验

猪沙门氏菌病是由猪霍乱沙门氏菌引起的仔猪传染病。猪沙门氏菌病的诊断方法可根据流行病学特点、临床症状、病理变化、细菌分离来确定。对于疑似病例要采用综合方法诊断。对猪沙门氏菌有较强药敏性的药物有土霉素、强力霉素、呋喃,药敏性低的药物有卡那霉素、多粘菌素E、青霉素。     

推广水产品药残快速检测 加强水产品质量管理

随着社会对水产品质量关注及消费要求的提高,水产品质量安全已成为今后水产品生产、经营必须严肃对待的、最重要的事情.水产品质量检测也就成为水产品质量管理、衡量水产品质量安全水平的首要手段.当前,水产品质量检测主要针对的是药物残留,常用的检测方法有实验室的标准检测方法和快速检测方法两种.实验室的标准检测虽然精确,但成本高、耗时长,而快速检测作为补充,将成为水产品质量管理中必不可少的手段.     

禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析

通过对临床分离并经生化试验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了PCR扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;利用PCR检测四环素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段.     

5种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立

本研究建立一种同时特异性地检测5种常见食源性致病菌的多重PCR方法。根据目前食品中常见病原菌副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes、肠炎沙门氏菌Salmonella enteritidis、福氏志贺氏菌Shigella flexneri的相关毒力基因,选择具有特异性的副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因、单核细胞增生性李斯特菌编码溶血素O基因、沙门氏菌侵袭蛋白A基因及志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因,设计5对特异性引物进行多重PCR检测,对反应条件进行优化并评价了其特异性和灵敏度。通过对48份实际样品检测,验证了此多重PCR体系具有很好的可靠性和实用性。     

气相色谱测定水中六六六和滴滴涕残留处理方法研究

对气相色谱法测定水中HCHs和DDTs残留的前处理方法进行研究,新的前处理方法（方法二）以5μg/L、50μg/L、150μg/L作为不同添加水平测定水中HCHs和DDTs的回收率,出峰顺序为：①α-HCH、②γ-HCH、③β-HCH、④δ-HCH、⑤ρ＇ρ-DDE、⑥ο＇ρ-DDT、⑦ρ＇ρ-DDD、⑧ρ＇ρ-DDT,加标回收率范围为85.3%-114.6%。与方法一（GB7492-87）相比,能够达到定量准确、具有高的精密度和准确度,而且操作较简单,需时较短,因此本文推荐使用方法二作为气相色谱法测定水中HCHs和DDTs残留前处理方法。     

阿维菌素等三种常规渔药对卡拉白鱼的急性毒性

采用半静态法,研究了三种常规渔药阿维菌素、三氯异氰脲酸和硫酸铜对卡拉白鱼(Chalcalburnus chal coides aralensis)急性毒性效应。结果表明:阿维菌素对卡拉白鱼24、48、72、96 h的半致死浓度分别为6.25、4.66、3.66和2.82 mg/L,安全浓度为0.77 mg/L;三氯异氰尿酸对卡拉白鱼24、48、72、96 h的半致死浓度分别为3.22、2.49、2.19、1.79 mg/L,安全浓度为0.45 mg/L;硫酸铜对卡拉白鱼24、48、72、96 h的半致死浓度分别为5.56、3.96、2.03、1.74 mg/L,安全浓度为0.6 mg/L。三种药物对卡拉白鱼毒性高低依次为:硫酸铜三氯异氯尿酸阿维菌素。三种常规渔药的安全浓度近于或高于生产中常用泼洒浓度,可放心使用。     

氰戊菊酯、醚菊酯对日本囊对虾的急性毒性

为了研究两种拟除虫菊酯类农药对日本囊对虾(Penaeus japonicus)的急性毒性效应,采用半静态换水补药方法研究了氰戊菊酯和醚菊酯对平均体重(10.6±2.5)g日本囊对虾的急性毒性。试验结果表明:在水温(18.2±0.3)℃时,氰戊菊酯对日本囊对虾的24 h LC50、48 h LC50、72 h LC50、96 h LC50分别为1.52、0.810、0.520、0.310μg·L-1,安全浓度为0.069 0μg·L-1;醚菊酯对日本囊对虾的24 h LC50、48 h LC50、72 h LC50、96 h LC50分别为1.88、1.30、0.940、0.760μg·L-1,安全浓度为0.190μg·L-1。两种农药均属于极高毒药物,对日本囊对虾的毒性大小为:氰戊菊酯醚菊酯。因此在作为清塘药物进行清塘时需特别谨慎使用。     

长江三峡库区蓄水后鱼类资源现状

2005~2006年对三峡库区长江干流及主要支流的鱼类资源进行了3次流动调查,共设17个采样点,每次调查时间为1~2个月;同时在巴南和万州进行定点监测,每月2次。监测到鱼类108种,分属9目20科71属。鲢、南方鲶、鲤、黄颡鱼类、铜鱼、圆口铜鱼、长鳍吻鮈、圆筒吻鮈、长吻鮠、草鱼、鲹类为三峡库区渔获物主要种类。不同江段的渔获物组成存在差异,渔获物中个体小型化、低龄化现象明显。     

B超诊断技术在动物繁殖上的临床使用

B超诊断技术是一项最为快速、安全的、最有效的活体诊断方法。该诊断技术已广泛用于医学疾病的诊断,而且在畜牧兽医领域也开始应用。本文就其在动物繁殖上的临床使用进行简单概述,为这项新技术在动物繁殖上快速的运用和推广提供参考,从而为促进动物养殖业更稳定、健康和快速的发展提供理论和实际指导。     

副猪嗜血杆菌病的诊治

近几年频繁发生以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎以及急性死亡为特征的传染病,导致猪场经济损失严重。本文就该病的病原史、流行特征、临床表现、诊断方法和综合防控等几方面加以分析,希望能对该病的防治起到一定的作用。     

菲、芘、壬基酚对黑褐新糠虾的急性毒性

通过测定菲、芘、壬基酚对黑褐新糠虾的急性毒性,探讨了这三种难降解有机物对黑褐新糠虾的24h、48 h、72 h和96 h半致死浓度(LC50 ).结果表明菲对黑褐新糠虾24 h、48 h、72 h和96 h的半致死浓度分别为530 μg/L、310 μg/L、166 μg/L和126 μg/L;壬基酚对黑褐新糠虾24 ...     

抗冻剂对日本鳗鲡精子活力及运动时间的影响

利用精子稀释液(0.5%氯化钠+0.25%氯化钾+0.25%葡萄糖)分别配制4%、8%、12%、16%、20%、24%的二甲亚砜(DMSO)、甘油(Glycerol)、1,2-丙二醇(1,2-Propanediol)、乙二醇(Ethyleneglycol)四种抗冻剂,对日本鳗鲡精子进行激活处理,观察记录精子在不同浓度抗冻剂中的活力和5种运动(激烈运动、快速运动、慢速运动、摆动、死亡)时间。结果表明:4%~24%的四种抗冻剂都可以激活日本鳗鲡精子,其中二甲亚砜浓度为12%时,精子活力最高,平均可达到78.3%;甘油浓度为8%时,精子活力最高,平均可达到72.8%;12%的1,2-丙二醇和乙二醇激活精子后,精子活力都可以达到最高,分别是47.6%和57.8%。日本鳗鲡精子在8%的二甲亚砜、8%的甘油、8%的1,2-丙二醇和8%的乙二醇中,激烈运动时间均为最长,分别为11.8 s、11.1 s、6.0 s和2.9 s;用8%的甘油、16%的二甲亚砜、16%的1,2-丙二醇和12%的乙二醇激活日本鳗鲡精子后,精子存活时间均最长,分别达到154.6 s、45 s、20 s和34 s。与其它几种抗冻剂相比,8%的甘油能显著延长日本鳗鲡精子的寿命。四种抗冻剂对日本鳗鲡精子都有一定的毒性作用,处理后精子的活力和寿命均降低。     

信阳市主要野生水产动物重金属含量分析及质量安全评价

测定了信阳市主要野生水产动物Cd、Cr、Pb、As和Hg的含量,并根据单因子污染指数评价法对信阳市主要野生水产动物的品质进行质量安全评价。结果表明,8种信阳市主要野生水产动物的所有样品中均检出Pb和Cr,但均未检出Cd和Hg。在鲫鱼、鲤鱼、青虾和克氏原螯虾中检出As,检出率分别为60%、65.5%、55%和50%。单因子污染指数评价法表明,8种信阳市主要野生水产动物均受到不同程度的Pb污染,鲤鱼和鲫鱼受到了轻度的As污染。