猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清最佳免疫程序及保存条件的初步筛选

为了获得高效价的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清,试验采用冻融法制备猪免疫血清,ELISA阻断法、血凝试验及血凝抑制试验分别检测各组猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体效价,比较试验组及空白对照组两种病原的血清抗体效价。将两种病原抗体效价最高组血清分别置不同温度保存不同时间检测其抗体效价,探讨最适保存条件。结果表明:S6组的两种病原血清抗体效价最高,猪伪犬病病毒血清OD630值为0.352、猪传染胃肠炎病毒血清抗体效价为1∶64;试验组与空白对照组之间、S6组与其他试验组之间抗体效价差异显著。说明S6组为此次探讨的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清的最佳免疫程序,通过30 d的基础免疫及10~15 d的强化免疫能获得较高效价的猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体。-20℃和4℃分别适合猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清抗体液的长期和短期保存。     

猪圆环病毒2型高免卵黄抗体的研制与应用

为制备猪圆环病毒2型(porcine circovirus serotype2,PCV-2)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,通过自制猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活苗,免疫SPF产蛋鸡,收集高免蛋,制备PCV-2高免卵黄抗体,对高免卵黄抗体进行无菌检验、活体动物安全性检测,用琼脂扩散方法进行效价检验和人工感染保育猪治疗试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果抗体效价达到1∶64;人工感染治疗试验治愈率达100%;临床试验治愈率为96%,应用效果良好。     

猪瘟高免血清冻干粉的初步研究

为获得高效价的猪瘟高免血清冻干粉,以设计的3种冻干保护剂及两种冻干曲线对制备的猪瘟高免血清液冻干并比较冻干前后猪瘟抗体效价与色泽、干燥度、吸水性等,筛选最佳冻干保护剂及最佳冻干曲线;对制备的血清冻干粉作稳定性试验、生物安全性试验及无菌检验。结果表明,于屠宰前40 d按每周免疫1次,屠宰前2~3 d 3倍剂量免疫,制备的高免血清按1.2∶1、1.5∶1的添加比例添加含有明胶、果糖、海藻糖及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)冻干保护剂并经二级预冻的制备工艺能获得抗体效价为1∶512且无毒副作用的猪瘟高免血清冻干粉;-20℃保存1年血清冻干粉猪瘟抗体效价及品质均无改变,为猪瘟高免血清冻干粉较理想的贮藏温度。     

猪圆环病毒2型卵黄抗体和血清抗体水平的监测

为获得猪圆环病毒2型卵黄抗体消长规律,试验用猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活疫苗免疫健康鸡群,收集高免蛋,用水稀释法和饱和硫酸铵盐法提纯卵黄抗体,ELISA抗体检测试剂盒检测血清抗体和卵黄抗体效价。结果表明:卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,且卵黄抗体效价变化幅度小于血清抗体,卵黄抗体稳定性好,血清抗体最高效价可达5 000,提纯的抗体浓度最高为9 200μg/mL。     

猪伪狂犬病高免血清的制作与初步应用

用伪狂犬病抗体阴性健康猪,以不同剂量、间隔一定时间、多次免疫接种伪狂犬病强毒S株,制备伪狂犬病病毒高免血清,试验表明,用本方法制备的伪狂犬病病毒高免血清特异性强、抗体效价高达256倍以上,完全符合诊断用血清标准要求.并将高免血清在中和试验、ELISA、免疫胶体金等进行了对比试验.     

一种猪流行性腹泻病毒阳性血清的制备方法

本文所阐述的方法用猪流行性腹泻病毒活抗原和灭活抗原及其佐剂,分别免疫实验动物-大兔来制备猪流行性腹泻病毒高免血清。将多次免疫该病毒后无菌收获的兔血清用细胞中和抗体效价检测法测定,当血清中和抗体效价在1:256以上时(新兽药的规定标准为1:64),即对收获的该血清全部进行物理性状检验、无菌检验、支原体检验、特异性检验、外源病毒及其抗体的检测,检测结果均符合要求者才是合格的高免阳性血清。该血清可最终用于该类疫苗的鉴别检验、效力检验和该类疾病的诊疗过程。本方法大大降低了因用本体动物-猪来制备阳性血清而引发的同源动物其他外源病毒污染的风险。该高免阳性血清的成功制备,对猪流行性腹泻疫苗的研究提供了基础保障。     

抗猪瘟高免血清的制备及应用

1　抗猪瘟高免血清的制备　选取体况和健康状况一致的试验猪为供试猪进行首次免疫,将供试猪颈部肌注猪瘟兔化弱毒苗10头份/头猪,观察免疫后猪只的精神、食欲等变化。10天后耳静脉采血,Ｄｏｔ-ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒测效价达1∶80。二免猪瘟兔化弱毒苗20头份/头猪,15天后采血测效价达1∶320。三免用猪瘟野毒强毒颈部肌注1∶10脾组织悬液10ｍＬ/头,20天后采血测效价达1∶1280。器械消毒准备完成后,颈总动脉放血致死,分离血清,加入2000ｉｕ/ｍＬ双抗,0.01%硫柳汞,即制成抗猪瘟高免血清,分装于-15℃冷冻保存备用。(见表1)表1　抗猪瘟高免血清的制…     

猪繁殖与呼吸综合症与猪圆环病毒-2型对猪瘟抗体的影响

<正>在2006～2008年期间,运用ELISA方法,对猪瘟抗体检测的血清进行了对猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪圆环病毒-2型的抗体水平的监测,以期了解育肥猪群中繁殖与呼吸综合症和猪圆环病毒-2型的感染情况,3种病毒抗体水平之间的关系,寻求更好地解决实际问题的措施。     

猪瘟、蓝耳病及猪O型口蹄疫母源抗体消长规律

为了研究猪瘟、猪高致病性蓝耳病和猪O型口蹄疫母源抗体的消长规律,制定科学合理的免疫程序。本试验利用ELISA抗体检测试剂盒,对仔猪0、7、14、21、28、35、42、49、56日龄的猪瘟、猪高致病性蓝耳和猪O型口蹄疫母源抗体分别进行检测。结果表明仔猪猪瘟、猪高致病性蓝耳病和猪O型口蹄疫哺乳前抗体水平均与阴性对照相当,抗体为0,7日龄时各疾病抗体均达到最高水平;猪瘟抗体水平在28日龄时明显下降;猪高致病性蓝耳病35日龄时抗体水平明显下降;仔猪O型口蹄疫14日龄抗体明显下降。猪瘟、猪高致病性蓝耳和猪O型口蹄疫的母源抗体具有不同消长规律,为临床制定合理的首免日龄提供科学依据。     

2017-2020年浙江省猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析

为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病痛原和抗体检测.抗体检测结果显示:PRRSV、CSFV、PCV2、PRV...     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅱ有关扁桃体冰冻切片荧光抗体法在应用上的几个问题

前报已报导了用免疫荧光抗体法对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片诊断猪瘟的研究结果,证明这是一种特异的、快速的实验室诊断方法。本报提出了制备荧光抗体用高免血清效价的测定方法、活体扁桃体病料的采样方法、感染猪瘟病毒猪扁桃体免疫荧光的检出时间和猪瘟兔化弱毒疫苗接种后是否产生免疫荧光等研究结果。     

猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体的研制

针对猪传染性胃肠炎病尚无有效的治疗药物,本文研究开发抗猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体,以期为该病的防治提供技术支持.用猪传染性胃肠炎灭活疫苗按程序免疫90～140日龄健康商品海兰褐蛋鸡,三免14天后收集高免蛋进行卵黄抗体提取、ELISA抗体效价检测及攻毒保护试验.高免蛋三免后14天效价可达到1:256,并维持3个月,三免后...     

不同动物高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制作用研究

选用猪、兔、鸡、小鼠和豚鼠5种试验动物分别制备猪肺炎支原体高免阳性血清,并测定了其对猪肺炎支原体的代谢抑制效价。再从兔高免血清中纯化特异性抗体,比较抗体纯化前后的代谢抑制效价是否发生变化。结果表明,5种试验动物高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制价分别为0、104、103、105、102,纯化后的抗体仍可抑制猪肺炎支原体的生长,代谢抑制价没有明显变化。由此可见,不同动物来源的高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制价不同,代谢抑制作用的主要作用物质为特异性抗体;首次证明病原靶动物——猪的高免抗血清对猪肺炎支原体没有代谢抑制作用,其他支原体是否也表现为对靶动物(或人)抗血清的耐受性还有待进一步研究。     

不同动物高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制作用研究

选用猪、兔、鸡、小鼠和豚鼠5种试验动物分别制备猪肺炎支原体高免阳性血清,并测定了其对猪肺炎支原体的代谢抑制效价。再从兔高免血清中纯化特异性抗体,比较抗体纯化前后的代谢抑制效价是否发生变化。结果表明,5种试验动物高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制价分别为0、10~4、10~3、10~5、10~2,纯化后的抗体仍可抑制猪肺炎支原体的生长,代谢抑制价没有明显变化。由此可见,不同动物来源的高免血清对猪肺炎支原体的代谢抑制价不同,代谢抑制作用的主要作用物质为特异性抗体;首次证明病原靶动物——猪的高免抗血清对猪肺炎支原体没有代谢抑制作用,其他支原体是否也表现为对靶动物(或人)抗血清的耐受性还有待进一步研究。     

昆明某规模猪场猪瘟、猪圆环病毒2型和猪口蹄疫免疫效果评价

为了解昆明市某规模化猪场猪瘟、猪圆环病毒2型和猪口蹄疫的免疫效果,从2栋猪舍随机采集49份血样,分离血清样品采用酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒检测相关免疫抗体,分析评估三种病的免疫效果。结果表明,猪瘟抗体总阳性率为59.2%(68.6%~90%),口蹄疫抗体阳性率平均为73.5%(59.7%~83.8%),猪圆环病毒2型抗体阳性率平均为89.8%(78.2%~95.6%)。结合该猪场的免疫程序分析,猪瘟、猪口蹄疫二种病的抗体水平和阳性率均处于上升阶段,59.2%和73.5%阳性率虽是合理水平,但栋舍间差异较大,有些栋舍存在免疫失败可能;圆环病毒2型免疫效果评价合格。建议进一步查清引起猪瘟、猪口蹄疫免疫失败的原因,改进免疫程序并及时补免。     

蓝耳疫苗对猪群猪瘟抗体水平影响分析

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了12个猪场317份血清中的猪瘟和蓝耳抗体,其中免疫蓝耳疫苗的猪群猪瘟和蓝耳抗体阳性率分别为34．64％和90．2％,未免蓝耳疫苗的猪群猪瘟和蓝耳抗体阳性率分别为31．37％和74．39％,结果表明猪群蓝耳病毒的隐性感染和持续感染仍很严重。进一步对免疫和未曾免疫蓝耳疫苗的猪群进行猪瘟和蓝耳抗体阳性率比较,结果发现育肥猪和仔猪的猪瘟和蓝耳病抗体阳性率存在着反比关系,因此,蓝耳疫苗（活苗）的免疫对猪瘟抗体的产生有一定的抑制作用。     

2012-2013年山东滨州及周边地区3种猪病血清抗体检测与统计分析

鲁北兽医诊断中心对2012-2013年山东滨州及周边地区免疫猪场送检的血清样品应用ELISA （酶联免疫吸附试验）试剂盒进行了猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病的抗体检测,现将检测结果介绍如下。     

应用斑点-ELISA 检测猪瘟血清抗体的研究

应用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)orngonC_(24)株作抗原,混合纤维素微孔滤膜作固相载体,制备检测猪瘟(HC)抗体的快速诊断膜,进行斑点-ELISA(Dot-ELISA)试验.结果,以 HC 高免血清和自然感染 HC 猪阳性血清作阻断试验,证明了本方法的特异性:猪轮状病毒阳性血清、猪流行性腹泻阳性血清、猪细小病毒阳性血清及断奶后未注射任何疫苗的健康猪血清均为阴性;断奶前后和未注苗仔猪血清几何平均效价低于1:40;注苗猪效价为1:70～1:160;注苗后又爆发,流行 HC 场的猪血清效价为16:10～1:320;未注苗爆发 HC 场的猪血清抗体效价与未注苗猪相似。本法特异性强、敏感性高、操作简便快速,适于现地 HC 免疫监测及流行病学调查.     

规模化猪场免疫程序调整前后抗体变化及分析

本文针对某规模化猪场免疫程序调整前后的猪群进行了血清学检测。对两个季度共计177个样本进行了猪瘟抗体、猪肺炎支原体抗体、猪圆环病毒2型抗体、猪蓝耳病抗体的检测和分析。结果显示,该场商品猪猪瘟免疫调整后免疫效果不佳,猪蓝耳和猪圆环调整后免疫表现良好;后备母猪虽未修改计划,但蓝耳病抗体滴度下降,猪瘟和圆环两个季度表现一致,主要呈现猪肺炎支原体中等程度(42%)感染;母猪猪瘟免疫计划调整后免疫良好,蓝耳病免疫方案调整后阳性率和抗体滴度均有下降。结合两个季度的抗体表现,表明本场对商品猪的猪圆环、猪蓝耳免疫程序调整较为理想,可继续保持;对经产母猪进行的猪瘟和猪蓝耳病免疫调整也基本可行,可继续实施;同时需调整商品猪的猪瘟免疫程序;并考虑通过保健或免疫措施提升后备母猪抵抗猪肺炎支原体的能力。     

猪口蹄疫、猪瘟、高致病性蓝耳病三种疫苗不同组合同时分点免疫的效果观察

为了寻求猪瘟(CSF)、猪口蹄疫(FMD)和猪高致病性蓝耳病(PRRS)疫苗联合注射的新型免疫程序,本研究采用这3种疫苗的不同组合进行免疫,将40～50日龄健康仔猪133头分为7组,观察其免疫反应,并经ELISA试验检测血清抗体效价来评价其免疫效果。结果得出:3种疫苗同时分点免疫,免疫副反应率比较低,特别是进行二免、三免后抗体效价更高,适宜推广。