不同饵料和饥饿对魁蚶幼虫生长和存活的影响

在水温23.2-24.0℃,盐度29.5-30.0条件下,研究了5种单胞藻饵料和饥饿对魁蚶浮游幼虫生长与存活的影响。投喂不同饵料试验中,球等鞭金藻与4种单胞藻混合投喂试验组幼虫的特定生长率、眼点幼虫比例和壳长均显著高于单一投喂试验组,其中球等鞭金藻与小球藻混合投喂的效果最好;投喂单一饵料试验中,球等鞭金藻组幼虫的生长、眼点幼虫比例与存活率显著高于其它试验组。在饥饿试验中,不同饥饿天数条件下幼虫的存活率差异不显著;生长方面,饥饿1-2d较短时间与一直投喂对照组的幼虫相比较,特定生长率、眼点幼虫比例、壳长的差异不显著,但随着饥饿时间延长,幼虫的生长变慢且眼点幼虫比例下降,一直饥饿情况下幼虫的生长基本停滞。研究结果可以为魁蚶人工苗种繁育技术的改进提供参考依据。     

海带（Laminaria japonica）发酵液的制备及其对单胞藻生长的影响

[目的]研究海带发酵液对单胞藻生长的作用。[方法]海带洗净烤干粉碎,制备海带发酵液。加入酿酒酵母和醋酸醋杆菌发酵,测定了发酵前后发酵液性质的变化。向F／2培养液（CK）。附加2．5％（实验组1）和5．0％（实验组2）发酵液的F／2培养液中接种盐藻和新月菱形藻．观察单胞藻数量的变化。[结果]加入酿酒酵母和醋酸醋杆菌后,海带发酵液发酵总糖含量降低;总还原糖、总氨基酸及总酸度显著增高;总蛋白含量升高。除培养72h外,实验组盐藻数量均多于对照组。新月菱形藻培养0～48h时,对照组的数量多于实验组。此后,实验组1数量远多于实验组2和CK,实验组2和CK的数量相差不多。[结论]2．5％和5．0％的海带发酵液促进盐藻生长的影响相似,2．5％的海带发酵液可明显促进新月菱形藻生长.     

环境因子对大竹蛏稚贝生长及存活的影响

采用实验生态学的方法,研究了底质、养殖密度及饵料密度对大竹蛏稚贝生长及存活的影响。结果表明：（1）不同底质对大竹蛏稚贝生长、存活均有影响,生长速度细砂组〉粗砂组〉细粉砂组,细砂组存活率（64．25％）〉粗砂组（62．79％）〉细粉砂组（60．41％）;但各组间差异不显著。（2）随着养殖密度增大,大竹蛏稚贝的生长速度减慢,存活率也逐渐降低。（3）随着饵料密度增加,大竹蛏稚贝生长速度加快,存活率表现为先高后低,饵料密度为20×10^4ind／mL时的成活率最高。可见,粒径在0．25～0．063mm的细砂为大竹蛏稚贝培育的最佳底质,壳长5～10mm稚贝的适宜培育密度为1×10^4ind／m^2,每日2次投喂时的饵料密度应控制在20×10^4ind／mL。     

环境因子对大竹蛏稚贝生长及存活的影响

采用实验生态学的方法,研究了底质、养殖密度及饵料密度对大竹蛏稚贝生长及存活的影响。结果表明：（1）不同底质对大竹蛏稚贝生长、存活均有影响,生长速度细砂组〉粗砂组〉细粉砂组,细砂组存活率（64．25％）〉粗砂组（62．79％）〉细粉砂组（60．41％）;但各组间差异不显著。（2）随着养殖密度增大,大竹蛏稚贝的生长速度减慢,存活率也逐渐降低。（3）随着饵料密度增加,大竹蛏稚贝生长速度加快,存活率表现为先高后低,饵料密度为20×10^4ind／mL时的成活率最高。可见,粒径在0．25～0．063mm的细砂为大竹蛏稚贝培育的最佳底质,壳长5～10mm稚贝的适宜培育密度为1×10^4ind／m^2,每日2次投喂时的饵料密度应控制在20×10^4ind／mL。     

利用藻-溞系统去除富营养水体中磷的研究

微藻对水体有明显的净化作用,探讨了在开放条件下蛋白核小球藻及蛋白核小球藻-大型溞修复系统对污水中磷的去除效果。研究表明接种8 h蛋白核小球藻对磷达到过饱和吸收,过饱和吸收量是（3.12±039）×10-10 mg/cell;接种量1.00×105 cells/mL～3.72×106 cells/mL无菌培养96 h对总磷的去除率达到75%;正常生长过程中藻细胞除磷量（饱和含磷量）为（1.46±0.05）×10-10 mg/cell;在每日补充营养盐的开放环境下,72 h～216 h藻细胞除磷量（饱和含磷量）稳定在（1.50±0.50）×10-10 mg/cell,微藻系统稳定运转时除磷量为（006±0.01）mg/（L·d）,此时藻密度为1.11×106～3.79×106 cells/mL。藻-溞修复系统表明,藻密度在928×105～1.60×106 cells/mL范围内,藻溞数量比为3.02×106∶1时藻－溞修复系统能稳定运行。     

温度对等鞭金藻塔溪堤品系细胞密度和叶绿素荧光参数的影响

以等鞭金藻塔溪堤品系Isochrysis galbana（Tahitian strain）为试验材料,采用Water-PAM叶绿素荧光仪测定了该藻一次性培养过程中,不同温度（5～40℃）对其细胞密度、叶绿素相对含量以及叶绿素荧光参数（PSⅡ最大光能转化效率Fv/Fm、光化学淬灭qP）的影响。结果表明：温度对等鞭金藻塔溪堤品系的叶绿素相对含量和细胞密度均有显著影响（P〈0.05）;在本试验条件下,等鞭金藻塔溪堤品系在5、10℃和40℃下不能生长繁殖,该藻生长的适温为15～35℃,最适温度为20～30℃,各处理组的相对生长率从高到低依次为25℃〉20℃〉30℃〉35℃〉15℃;温度对等鞭金藻塔溪堤品系各叶绿素荧光参数也有显著影响（P〈0.05）,从接种后第1天到试验结束,5、10℃和40℃处理组藻类的主要荧光参数（Fv/Fm、qP）均显著低于其它处理组（P〈0.05）,其中25℃和30℃处理组藻类的主要荧光参数总体上低于15℃、20℃和35℃处理组,但高于其它处理组;试验结束时将5、10℃和40℃处理组的藻细胞重新置于25℃下继续培养6 d,5℃和40℃处理组藻类的主要荧光参数不能恢复,而10℃处理组藻类的主要荧光参数可恢复正常。相关性分析结果表明：荧光参数、叶绿素相对含量以及细胞密度与温度的相关性随着培养时间的变化而变化,叶绿素相对含量与细胞密度呈显著的正相关关系（P〈0.05）。     

海洋酵母培育仿刺参Apostichopus japonicus浮游幼体研究

采用海洋酵母（Rhodotorula sp.）作为单细胞藻类的替代饵料培育仿刺参（Apostichopus japonicus）浮游幼体。从生长速度（G）、浮游期成活率（SRP）、变态成活率（SRM）、特定生长率（SGR）和40%樽形幼体出现时间（T）等5个指标比较了海洋酵母组（Z9）与不同种类和比例单胞藻混合饵料组（8个组合,Z1~Z8）的投喂效果;并确定了不同发育阶段海洋酵母的最佳投喂组合。结果表明：海洋酵母能够促进刺参幼体的正常发育和变态。ANOVA分析表明,不同饵料组间的生长和变态率等指标差异显著,Z2和Z9两组间差异不显著,但显著优于其他单胞藻混合组。投喂不同数量的海洋酵母对浮游幼体也有显著影响。     

饵料对卤虫生长和生殖的影响

试验用盐藻、酵母、麸皮三种饵料培养卤虫。结果表明,卤虫生长速度的差异显著（ｐ〈０．０５）。其中,麸皮且最好,其次是盐藻组,最差的是酵母组。麸组的卤虫提高８ｄ达到性成熟,其体长分别是盐藻组的１．２３倍、酵母组的１．２７倍。三种饵料对卤虫成活率的影响差异显著（ｐ〈０．０１）。在达到性成熟时成活率最高的为盐藻组,其次为麸皮组,最差的为酵母组,其均值分别为８６％、６７％、２７％。三种饵料对卤虫生殖的影响差异也极显著（ｐ〈０．０１）,麸皮组的生殖次数、生殖总量和平均每次生殖量均最高,分别为５、３２０、６４;其次是酵母组,分别为１．５、６３、４２;盐藻组的卤虫在本实验中不生殖。故以麸皮培养卤虫量好,有利于卤虫的生长和种群增殖。     

饵料对卤虫生长和生殖的影响

试验用盐藻、酵母、麸皮三种饵料培养卤虫。结果表明,卤虫生长速度的差异显著（ｐ〈０．０５）。其中,麸皮且最好,其次是盐藻组,最差的是酵母组。麸组的卤虫提高８ｄ达到性成熟,其体长分别是盐藻组的１．２３倍、酵母组的１．２７倍。三种饵料对卤虫成活率的影响差异显著（ｐ〈０．０１）。在达到性成熟时成活率最高的为盐藻组,其次为麸皮组,最差的为酵母组,其均值分别为８６％、６７％、２７％。三种饵料对卤虫生殖的影响差异也极显著（ｐ〈０．０１）,麸皮组的生殖次数、生殖总量和平均每次生殖量均最高,分别为５、３２０、６４;其次是酵母组,分别为１．５、６３、４２;盐藻组的卤虫在本实验中不生殖。故以麸皮培养卤虫量好,有利于卤虫的生长和种群增殖。     

负压式光生物反应器对微藻的培养效果

采用一种新型负压式光生物反应器对常用饵料微藻威氏海链藻(Thalassiosira weissflogii)的培养效果进行研究,分析培养过程中藻密度、异养菌与弧菌(Vibrios)数量及氨氮与亚硝酸氮质量浓度变化及相互关系。结果表明:在负压光生物反应器培养下威氏海链藻的生长速度快,培养第4天达到平台期,藻密度最大值可达到1.5×10~6个/mL,最大比生长率可达1.37;弧菌与异养菌数量两者变化趋势相同,分别为(0.19～2.70)×10~4 cfu/mL和(0.071～0.93)×10~6 cfu/mL,藻与细菌表现出相互竞争抑制的效果,在指数增长期藻对细菌抑制较强,特别是对弧菌的抑制,在平台期与衰败期藻对弧菌与异养菌的抑制作用逐渐减弱。藻液中氨氮与亚硝酸氮质量浓度随藻密度增加而上升,最高值分别达到0.24 mg/L和0.37 mg/L,指数增长期藻密度与氨氮和亚硝酸氮质量浓度呈显著正相关(P0.05)。因此,采用负压式光生物反应器培养威氏海链藻,可以大大缩短培养周期,抑制细菌生长,提高培养效率和藻液质量,但需要在投喂幼体前对藻液进行充分曝气来降低氨氮与亚硝酸氮质量浓度。该反应器是一种适合饵料微藻培养的系统。研究结果为负压光生物反应器作为微藻生物饵料培养系统的应用提供了参考依据。     

Lactobacillus helveticus|ND-01高密度培养条件的优化及冻干发酵剂的制备

瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus ND-01是一株分离、筛选自新疆酸马奶中的乳酸菌,并且在发酵牛乳的过程中能产生较高的ACE-Ⅰ抑制活性和γ-氨基丁酸。实验通过对L.helveticus ND-01培养基的组分进行优化,从而得出L.helveticus ND-01优化培养基配方为：乳糖25 g/L,大豆蛋白胨14.1 g/L,酵母粉14.1 g/L,醋酸钠15.3 g/L,柠檬酸纳6.5 g/L,K2HPO42.2 g/L,MgSO4.7H2O 2 g/L,MnSO4.5H2O 25 mg/L,吐温-80 1 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐750 mg/L,维生素B9（VB9）20 mg/L。L.helveticus ND-01在此培养基中经42℃,18 h培养,其活菌数可达到4.2×10^8cfu/mL,比MRS中（8.2×10^7cfu/mL）提高近5倍。将此优化培养基作为基础培养基,在5 L发酵罐中,经优化发酵条件,其活菌数可达到3.1×10^9cfu/mL,发酵液离心收集菌体,加入保护剂,冷冻干燥后活菌数可达到2.5×10^10cfu/g。冻干菌粉经90 d的低温贮藏,其存活率为81.20%。     

益生菌Lactobacillus casei|Zhang 高密度发酵中试工艺及动力学研究

在益生菌L.caseiZhang高密度培养小试（3L）基础上,进行30L到150L逐级放大中试生产工艺的研究以确定规模化生产工艺。在优化的发酵工艺下,150L规模发酵菌体密度可达2.9×10^10cfu/mL,与小试水平无差异。采用origin7.5软件在logistic equation基础上建立L.caseiZhang的生长和葡萄糖代谢动力学模型,模型与试验值拟合良好,平均误差小于10%,能够较好地反应发酵过程。初步探讨发酵后菌体的离心和冷冻干燥过程对菌体的影响,虽然发酵液经离心收集菌体后冷冻干燥可得到平均活菌数2.65×10^11cfu/g的菌粉,能够满足益生菌制剂和发酵剂对高活菌数的要求,但冻干前后活菌得率仅49.97%。有必要针对L.casei Zhang的冻干保护剂和冻干工艺进一步优化,以提高菌体存活率得到更高菌体浓度的益生菌粉。     

3种微藻对池蝶蚌幼蚌的选择滤食与生长的影响

为研究3种不同藻类对池蝶蚌幼蚌的摄食率和生长的影响,进行了普通小球藻、斜生栅藻、舟形藻为影响因素,以养殖产量和相对（体重）生长率为评价指标的正交试验。结果表明：池蝶蚌幼蚌的摄食量在5 h内随着藻类浓度的增加而增加,实验组3、7、9的摄食量明显高于其他实验组;相对生长率（壳长、壳高、壳宽和蚌重）、绝对生长率和养殖产量在9组实验中均变化明显;在试验所设定的水平范围内,舟形藻对养殖产量和相对（体重）生长率影响最大,3种藻类的最佳水平组合是：普通小球藻为250个/mL,斜生栅藻为2.5×104个/mL,舟形藻2.5×104个/mL。     

织锦巴非蛤幼虫对不同种类单胞藻的摄食和消化效果

【目的】明确织锦巴非蛤幼虫在不同发育时期饲喂单胞藻饵料的合适种类,为织锦巴非蛤的苗种规模化人工繁育提供饵料投喂策略及参考依据。【方法】以从广西北海市铁山港区自然海域捕捞的织锦巴非蛤2龄贝为亲本,人工培育D形幼虫,在幼虫培育期间分别投喂小球藻、微绿球藻、杜氏盐藻、亚心形扁藻、湛江等鞭金藻、球等鞭金藻、绿色巴夫藻、牟氏角毛藻和三角褐指藻,显微镜下观察幼虫在不同时期对不同种类单胞藻的摄食情况和消化效果。【结果】织锦巴非蛤初孵幼虫（D形幼虫）大小（壳长×壳高）为（82.49±3.02）μm×（63.98±2.16）μm,于4 dph（孵化后第4 d）发育至壳顶前期（115.89±3.86）μm×（101.62±3.80）μm,13 dph进入变态期（205.61±15.84）μm×（182.61±13.53）μm,于15 dph变态至稚贝（225.63±8.99）μm×（198.65±8.25）μm。织锦巴非蛤幼虫在运动过程中也伴随着摄食,通过纤毛的摆动形成水流,单胞藻则随着水流方向进入幼虫口沟,在口沟纤毛摆动下进入胃内,胃内的单胞藻在微绒毛摆动下快速旋转并消化。织锦巴非蛤幼虫在1 dph时能摄食小球藻、微绿球藻、绿色巴夫藻、湛江等鞭金藻和球等鞭金藻,在4 dph时有少量幼虫开始摄食杜氏盐藻,至10 dph时幼虫开始摄食亚心形扁藻和牟氏角毛藻,整个浮游幼虫期均不摄食三角褐指藻。在9种单胞藻饵料中,小球藻和微绿球藻较其他种类更难消化。【结论】在织锦巴非蛤幼虫培育过程中,幼虫开口饵料宜选择湛江等鞭金藻、球等鞭金藻和绿色巴夫藻,在10 dph时适宜投喂杜氏盐藻,至13 dph时可投喂牟氏角毛藻和亚心形扁藻;在其他易被摄食和消化单胞藻种类充足的情况下,一般不选取小球藻和微绿球藻作为幼虫培育的首选饵料。     

氮含量对等鞭金藻生长及生化组分的影响

[目的]为了确定利于等鞭金藻生长及不同生化组分积累的优化氮含量.[方法]采用流加培养方式和单因素考察,研究5种硝酸钠浓度时等鞭金藻生物量及细胞内生化组分含量随培养时间的变化趋势.[结果]在在流加培养方式下,适合等鞭金藻生长和细胞内蛋白质积累的硝酸钠含量为150 mg/L培养液;在含37.5 mg/L硝酸钠的培养液中,等鞭金藻细胞内的总脂含量在培养中期达到最高值;而在含75 mg/L硝酸钠的培养液中可溶性总糖和淀粉含量分别在培养的中后期和后期达到最大值.[结论]培养液中的氮含量对等鞭金藻细胞生长及细胞内生化组分的含量有重要影响.这可能由不同氮浓度下等鞭金藻的代谢途径发生变化所致.从等鞭金藻作为生物能源资源的角度考虑并兼顾生物量,应选择含75 mg/L硝酸钠的培养液培养等鞭金藻.     

利用响应面法优化全蚀病生防菌YB-81的发酵条件

为了优化全蚀病生防菌株YB-81的发酵培养基及培养条件,提高其对全蚀病的抑制效果,在单因素试验的基础上,利用响应面法(Response surface methodology)对小麦全蚀病生防菌株YB-81的发酵条件进行优化。生防菌株YB-81的最优发酵条件为:时间36h,温度36℃,初始pH值8.0,转速200 r·min-1,牛肉膏+葡萄糖(1∶1)0.53%,蛋白胨0.99%,氯化钠0.20%。在此培养条件下试验,其菌落总数为18.8亿个·mL-1,较基础培养基提高了72%,对全蚀病菌抑制率达到87.2%,较优化前提高了32.5%。生防菌YB-81的最优发酵培养条件的确定,可为该菌大规模生产应用提供理论基础。     

不同培养条件对球孢链霉菌JK-1生长及其产生抗菌物质的影响

[目的]研究不同培养条件对球孢链霉菌JK-1生长及其产生抗菌物质的影响,明确该菌生长及其产生抗菌物质的最适培养条件.[方法]在不同培养条件下分别测量球孢链霉菌JK-1的菌体干重,并以稻瘟菌为指示菌,采用菌丝生长速率法测定不同培养条件下JK-1发酵液的抑菌活性.[结果]在供试的7种培养基中,LB培养基最有利于菌体生长,PSB培养基最有利于产生抗菌物质.JK-1在10~35℃范围内均可以生长并产生抗菌物质,25℃为菌体生长和产生抗菌物质的最适温度.JK-1在PSB中培养5d菌体干重可达最大值,培养7d抑菌活性可达到最大值.适宜于JK-1生长及其产生抗菌物质的pH值范围为6~8,最适为pH 7.JK-1能够有效利用多种碳源和氮源进行生长和产生抗菌物质,其中分别以甘油为碳源和酪氨酸为氮源时生长最好;以麦芽糖为碳源和硫酸铵为氮源时发酵液的抑菌活性最强.[结论]球孢链霉菌JK-1生长和产生抗菌物质的最佳培养条件为pH 7的PSB培养基,25℃条件下培养7d,甘油和酪氨酸最适于该菌的菌体生长,麦芽糖和硫酸铵最适于产生抗菌物质.     

2种微藻间的化感作用

[目的]研究球等鞭金藻和纤细角毛藻间的化感作用。[方法]利用交叉培养和添加胞外滤液萃取物2种方法,确定2种微藻间的化感作用。最后,通过气相色谱测定两种微藻细胞及胞外滤液萃取物中脂肪酸的组成。[结果]球等鞭金藻滤液对纤细角毛藻的生长有显著的促进作用,仅当滤液浓度为100%时表现抑制作用。纤细角毛藻滤液对球等鞭金藻的生长有显著的抑制作用,滤液浓度越高,抑制作用越强。球等鞭金藻(或纤细角毛藻)胞外滤液萃取物对纤细角毛藻(或球等鞭金藻)生长的影响近似于其胞外滤液对纤细角毛藻(或球等鞭金藻)生长的影响,这暗示着2种微藻培养液中的化感物质可以用有机溶剂进行提取。[结论]通过气相色谱分析,笔者认为球等鞭金藻对纤细角毛藻的化感作用主要由饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的混合物共同作用引起;而纤细角毛藻对球等鞭金藻的化感作用主要由饱和脂肪酸引起。