湘西黄牛青年牛与经产牛超排后冲胚试验初报

对68头湘西黄牛进行超排处理,配种后第7天对供体牛采用非手术法冲胚,回收胚胎301枚,可用胚168枚,头均获胚4.33枚,头均可用胚2.47枚。     

不同处理方法对萨福克肉羊超排回收效果的影响

对119只萨福克肉羊进行超排处理,其中48只为首次超排处理,71只为第二次超排处理。结果表明,首次超排胚胎回收率显著高于二次超排胚胎回收率(P＜0.05);首次超排和二次超排间供体羊平均黄体数、胚胎可用率均差异不显著(P＞0.05);供体羊经第二情期或埋栓同期发情处理后均能达到预期的效果,但首次超排和二次超排供体羊胚胎回收率均差异显著(P＜0.05)。     

超排方案及冲胚方法对牛超排效果的影响试验

采用捷克、澳大利及国产促卵泡素（FSH）进行牛的超数排卯试验，对牛的处理采用FSH＋PG和FSH＋CIDR两种方式。结果三种FSH来源获可用胚数分别为5．43、5．33和4．80，差异不显著（P〉0．05）；而2次PG处理与CIDR处理供体牛所获得的回收胚胎数和可用胚数差异也不显著（P〉0．05）；冲胚操作时采用不需硬膜外腔麻醉的注射式冲胚与传统需麻醉的滴注式冲胚比较，回收率分别为102％和98％，差异不显著；经产牛和育成牛超排效果比较，可用胚数分别为5．27和5．17，无明显差异（P〉0．05）。     

波德代羊超排效果的研究

选择60只波德代羊进行超排效果研究。结果表明:两次超排所获得的胚胎总数分别为7枚和8枚,有效胚占回收总胚分别为61.90%、87.50%;对不同年龄的波德代羊超排后,所获得的总胚胎数差异不显著;开始配种后的第6~7天冲胚,能获得较多的桑椹胚,第8天冲胚时将获得较多孵出囊胚;从绵羊两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著;人工授精能显著提高超排供体母羊授精率和胚胎质量;用FSH恒量注射和PMSG两次注射法较其它方法能明显提高所获得总胚胎数和有效胚胎数。超排技术对波德代羊超排效果理想,为进一步的胚胎移植提供了大量优质胚胎。     

季节对杜泊羊体内胚胎生产与移植效果的影响

为了研究季节对杜泊羊体内胚胎生产效率及胚胎移植妊娠率的影响,于2016年选取内蒙古赛诺草原羊业有限公司种羊场经产纯种杜泊母羊作为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等方法对供体羊进行处理后,利用手术冲胚的方法获得纯种杜泊羊胚胎,同时对受体羊进行同期发情处理和胚胎移植。经统计分析,2016年全年该公司共有放栓供体4 241只,超排处理4 180只,配种供体4 131只,冲胚供体3 987只,供体可用率为94.01%;冲出胚胎总数为23 516枚,可用胚胎18 002枚,胚胎可利用率为76.55%,平均每只供体能获得可用胚胎4.52枚。供体在10月、11月、12月冲胚所获得的平均冲胚数和平均可用胚数明显高于4月、5月、6月(P<0.05),其中10月的平均冲胚数和平均可用胚数最高(P<0.01),分别为7.04枚和5.62枚。将获得的部分胚胎用于胚胎移植,移植单胚怀孕受体数为4 446只,妊娠率为53.67%;移植双胚怀孕受体数805只,妊娠率65.02%。此外,受体在1月、3月、6月、12月受胎率较其他月份高(P<0.05)。该研究可为杜泊种羊超数排卵、胚胎移植和肉羊的产业化生产提供一定的数据参考。     

FSH使用方法对无角道塞特绵羊超数排卵的影响

为探讨FSH的种类、剂量及注射次数和注射季节对绵羊超数排卵的影响,采用中国科学院动物所、宁波、加拿大生产的FSH对206只无角道塞特绵羊进行了超排处理,观察了供体发情率、回收胚胎数、可用胚胎数、退化胚及未受精卵比率以及供体的表现.结果,无论那种FSH,在适当的剂量范围都可有效进行超排,中国科学院FSH与宁波FSH联合使用可提高回收胚胎数和可用胚胎数;与6次递减注射相比,7次或8次递减注射的结果更为理想;秋季的超排效果优于春、夏和冬季.供体对激素处理表现复杂多变的超排反应,同时也出现卵子受精失败现象.结果表明,外源FSH只能在一定程度上控制超排反应,进一步的研究应考虑外源性FSH与内分泌反应的关系.     

波德代羊超排效果的研究

选择60只波德代羊进行超排效果研究。结果表明：两次超排所获得的胚胎总数分别为7枚和8枚，有效胚占回收总胚分别为61．90％、87．50％；对不同年龄的波德代羊超排后，所获得的总胚胎数差异不显著；开始配种后的第6～7天冲胚，能获得较多的桑椹胚，第8天冲胚时将获得较多孵出囊胚；从绵羊两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著；人工授精能显著提高超排供体母羊授精率和胚胎质量；用FSH恒量注射和PMSG两次注射法较其它方法能明显提高所获得总胚胎数和有效胚胎数。超排技术对波德代羊超排效果理想，为进一步的胚胎移植提供了大量优质胚胎。     

优质肉羊超数排卵优化组合方案应用研究

试验旨在探索优化超排方案,提高肉羊胚胎生产效率。在新疆哈密市牧祥合作社用FSH+PG递减4 d 8针注射法处理供体羊44只,冲胚数503枚、只均冲胚数11.43枚±0.79枚,可用胚数394枚、只均可用胚数8.95枚±0.95枚;同样的方法用FSH+PG+PMSG处理供体45只,冲胚数608枚、只均冲胚数13.51枚±1.04枚,可用胚数435枚、只均可用胚数9.67枚±1.06枚,差异均极显著(P0.01);对39只供体羊分别采用开膣器输精+自然交配+开膣器输精和自然本交方法配种,重复超排跟踪统计,重复超排和不同授精方式冲胚数无明显差异(P0.05);选用自然发情与人工诱情法处理,自然发情组可用胚胎数289枚,诱情组可用胚胎数221枚,两者差异极显著(P0.01);供体羊在不同营养状态下超排处理,营养良好者与营养中等者只均回收胚胎数分别为14.4枚和8.52枚,只均可用胚胎平均数分别为7.0枚和5.25枚,差异也极显著(P0.01)。该研究优化了绵羊超排方法和配种授精方案,初步建立了高效胚胎移植体系。     

肉用黑萨福克绵羊超数排卵和配种授精方案的优化

本研究旨在优化肉用黑萨福克绵羊超排方案,筛选生产条件下最佳配种授精方式,提高黑萨福克体内胚胎生产效率,建立高效绵羊胚胎移植体系。供体超数排卵采用不同超排方案、不同FSH剂量、不同配种授精方式、不同侧卵巢超排效果、不同季节以及重复利用6组因素的比较试验。结果表明:采用CIDR+FSH+PMSG递减4d 8针注射法供体平均黄体数16.00个/只、可用胚数14.00枚/只和移植妊娠率71.43%,效果最好(P<0.05);FSH注射剂量范围在200²60 IU,超排平均黄体数、平均可用胚胎数分别为14.87、13.28枚/只,高于160260 IU,超排平均黄体数、平均可用胚胎数分别为14.87、13.28枚/只,高于160²00 IU组和260200 IU组和260³20 IU组(P<0.05);开膣器输精+自然交配+开膣器输精方法供体冲出卵子的受精率97.32%、平均可用胚数11.25枚/只,高于其他2种配种方式(P<0.05);不同侧卵巢超排效果无差别;繁殖季节(秋季)供体平均黄体数13.00个/只、可用胚10.75枚/只,高于非繁殖季节(P<0.05);重复超排效果无明显差异。本研究获得了黑萨福克绵羊超数排卵的技术参数,优化了黑萨福克绵羊超排方法和配种授精方案,建立了高效的胚胎移植体系。     

不同手术冲胚方法对供体羊重复利用率的影响

在绵山羊胚胎移植手术中,往往由于各种人为因素造成供体母羊内生殖系统的出血和粘连,使供体母羊失去自然繁殖和再次利用的机会,从而造成优质种源的严重浪费,给种羊生产场家带来不必要的经济损失。乌兰察布市从2000年开始,在进口肉羊良种繁育中,推广应用了绵羊胚胎移植技术,多年来,通过对手术操作程序和冲胚方法的不断改进,供体羊的重复利用率得到显著提高,供体有效利用次数平均达到3.5次以上,最大限度地挖掘了供体母羊的繁殖潜能。     

超排方案及冲胚方法对超排效果的影响试验

采用捷克、澳大利亚及国产促卵泡素（FSH）进行牛的超数排卵试验,对牛的处理采用FSH＋PG和FSH＋CIDR两种方式。结果表明：三种FSH来源获可用胚数分别为：5．43、5．33和4．80个,差异不显著（P〉0．05）;2次PG处理与CIDR处理供体牛所获得的回收卵数和可用胚数差异不显著（P〉0．05）;冲胚操作时采用不需硬膜外腔麻醉的注射式冲胚与传统需麻醉的滴注式冲胚比较。回收率分别为102％和98％,差异不显著;经产牛和育成牛超排效果比较,可用胚数分别为5．27和5．17个,无明显差异（P〉0．05）。     

牛胚胎移植产业化超数排卵的系统研究

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的产业化,试验系统地研究了超排方案、青年奶牛的月龄及发情周期不同阶段、重复超排次数、超排间隔时间、卵巢状态、胎次与产后间隔时间对超排效果的影响,共超排供体奶牛1 127头次,回收胚胎共10 900枚,可用胚胎数量为6 942枚,平均每头次获得胚胎数量为6.73枚.结果表明:①应用PSO1、PSO2和 PSO3三种方案进行超排处理,PSO3方案的超排成功率和平均回收可用胚胎数均高于其他两个方案;②利用发情周期9～11 d的自然发情奶牛直接超排效果最好;③对青年奶牛进行超排处理,应限制超排起始时间,15月龄以上的青年奶牛超排效果较好;④供体牛连续重复超排控制在3次以内,连续4次超排处理后极大降低胚胎可用率;⑤超排处理的间隔最短时间应该选择46～60 d;⑥经产牛1～3胎次超排效果较好,7胎次以上较差;⑦产后间隔时间选取80～90 d.     

夏洛莱羊超数排卵及鲜胚移植技术应用的试验

以120 IU、144IU、168IU三种剂量FSH（促卵泡素），在供体羊发情的第2d开始超排，126只供体的超排结果如下：共回收卵1112枚，平均8．83枚，其中胚胎可用胚胎986枚，平均7．83枚。剂量为144IU组和168IU组的超排效果都很好，但与20IU组比无显著差异（P〉0．05）。供体羊的年龄对超排效果影响较大，2～5岁经产羊的超排效果显著高于育成羊和老龄羊（P〈0．01）。将986枚胚胎移植给972只受体，有682只妊娠，妊娠率为70．16％。共产羔羊661只，产羔率为68％。受体羊与供体羊同期化程度、胚龄等因素对妊娠率有一定影响，但无显著差异（P〉0．05）。用CIDR（阴道孕酮释放装置）诱导供体母羊同期发情，与自然发情比较，不影响供体超排效果。用PG（氯前列烯醇）诱导受体母羊发情，与自然发情比较，不影响受体羊的妊娠率。供体羊在繁殖季节可以重复超排利用。     

超排技术在无角陶赛特羊胚胎移植生产中的应用研究

在胚胎移植生产中,用从新西兰引进的肉用绵羊品种无角陶赛特羊作供体进行规模化胚胎移植生产.超排结果表明:两次超排分别回收平均卵数为5.62枚和9.08枚;从不同年龄的无角陶赛特羊上获得总卵数差异不显著;配种后第7天冲取胚胎,以桑椹胚为最多,占总回收胚胎数的75.78%,配种后第8天回收的胚胎,以扩展囊胚和孵出囊胚数所占比例为最多,分别占总数的25.89%和31.75%;从两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著;用人工授精法比试验中的其它方法能显著提高所获得的有效胚胎数;用促卵泡素恒量注射、孕马血清两次注射法进行超排效果好,所获得的平均胚胎数为8.53枚,有效胚占回收总胚的百分率则增加到82.11%.     

影响杜泊绵羊超数排卵效果的因素分析

对53只杜泊绵羊实施超排处理,系统地分析了供体羊年龄、胎次、重复超排、两次超排间隔时间、胚胎回收部位和季节对超数排卵效果的影响.结果表明:24月龄以上羊平均回收胚胎数显著高于8～12月龄羊(8.71和7.18)(P＜0.05);8～12月龄羊可用胚胎所占比例显著高于13～24月龄羊(95.29%和75.96%)(P＜0.05).经产2胎羊平均回收胚胎数显著高于初产羊(8.71和7.00)(P＜0.05);初产羊可用胚胎所占比例显著高于经产1胎羊(96.14%和75.88%)(P＜0.05).第3次超排处理平均回收胚胎数显著低于首次和第2次处理(6.60、8.71和8.10)(P＜0.05);首次超排处理平均可用胚胎数显著高于第2次和第3次超排处理(7.47、5.90和5.00)(P＜0.05).两次超排间隔10个月可用胚胎所占比例显著高于间隔1个月(92.14%和77.09%)(P＜0.05).从输卵管平均回收胚胎数显著高于从子宫角平均回收胚胎数(10.14和8.22)(P＜0.05).秋季超排处理平均可用胚胎数和可用胚胎所占比例均显著高于冬季(7.53和5.97)(91.67%和74.90%)(P＜0.05).     

绵山羊CIDR放置时间对超排效果的影响

研究主要针对CIDR放置时间长短对绵山羊超排效果的影响进行研究,以期为羊胚胎工程技术产业化提供坚实的基础.研究结果表明绵羊第10天起针的供体,平均回收数8.94枚±3.78枚,平均可用胚7.67枚±3.76枚,胚胎可用率90.34%.第13天起针超排的供体绵羊,平均回收8.38枚±3.79枚,平均可用胚6.37枚±3.03枚,胚胎可用率为76.03 %;第10天起针平均可用胚高于第13天起针的超排效果,两者差异显著(P＜0.05),两者之间平均回收胚基本一样,无显著差异(P＞0.05),但第10天起针的胚胎利用率高于第13天起针的胚胎可用率,差异极显著(P＜0.01).CIDR放置9天起针的供体山羊,平均可用胚为17.59枚±3.22枚,胚胎可用率87.40 %;CIDR放置15天起针的供体,平均可用胚数为12.73枚±4.01枚,胚胎可用率为67.95 %.CIDR放置9天起针平均可用胚高于CIDR放置15天起针的超排效果,差异极显著(P＜0.01),CIDR放置9天起针的胚胎可用率高于放置15天的胚胎可用率,差异极显著(P＜0.01).波尔山羊在11月、12月这种结果更明显;4月份虽然9天比15天高,但平均可用胚数和胚胎可用率之间没有差异(P＞0.05),而3月份平均可用胚差异显著(P＜0.05),胚胎可用率差异显著(P＜0.05).     

性控胚胎生产对育成牛繁殖机能影响的研究

选择良种育成牛作供体,超排处理后用X精子冷冻精液人工授精生产性控胚胎,累计处理38头供体,冲胚35头,获可用胚胎96枚,平均2.74枚;冲胚后的育成牛用常规冷冻精液配种的情期受胎率和总受孕率分别为76.32%和94.74%,与该场同时期未作供体的育成牛的73.81%和94.44%相比差异不显著(P0.05);同时在夏、秋、冬三季对育成牛进行超排,胚胎可用率分别为18.95%、40.18%和57.89%(P0.05)。结果表明:利用育成牛作供体生产性控胚胎,对其繁殖机能无明显的影响;在秋、冬两季生产胚胎的可用率显著高于在夏季生产,而且在冬季供体冲胚后繁殖机能恢复的时间最短。     

影响绵羊超数排卵效果因素的研究

通过对绵羊超数排卵技术的主要环节进行研究,得出适用于规模化生产的一套简便、稳定、低成本、高效、实用的羊胚胎生产技术.其结果如下①超排处理的499只供体羊平均排卵、回收胚、可用胚分别是14.41枚±4.34枚、12.56枚±4.05枚、9.13枚±4.03枚,育成羊组的此3项指标均高于经产羊组(P＜0.01);②对6个品种的412只供体羊进行超排处理,罗米利希尔斯羊的排卵、回收胚胎及可用胚胎平均数均高于其他品种(P＜0.01),其他品种之间无显著差异(P＞0.05),帮德羊的可用胚胎平均数显著低于其他品种(P＜0.01);③舍饲和放牧条件下供体羊排卵黄体平均数没有显著差异(P＞0.05).但是,舍饲羊的回收胚和可用胚胎平均数显著高于放牧羊(P＜0.01);④3种方式发情羊的排卵黄体平均数无显著差异(P＞0.05),但是,自然发情羊的回收胚及可用胚平均数均明显高于其他两组(P＜0.01);⑤用宁波和加拿大生产的FSH制剂进行超排处理,黄体平均数并无差别(P＞0.05),但回收胚胎平均数前者低于后者(0.01＜P＜0.05),尤其是后者的可用胚胎平均数明显高于前者(P＜0.01);⑥宁波生产的FSH制剂分为4个剂量等级进行超数排卵,4组之间无显著差异(P＞0.05).150 u剂量组的回收胚胎平均数均低于其他剂量组(0.01＜P＜0.05),180 u剂量组可用胚平均数显著低于其他3个剂量组(P＜0.01); ⑦超排1次或2次,排卵数无显著差异(P＞0.05);但超排2次以上,黄体数明显下降(P＜0.01).超排3次以上回收胚胎数明显低于其他两组(P＜0.01);⑧精液质量直接影响超排效果,精液活力越高效果越好.     

不同剂量PMSG和HCG及冲胚方法对小鼠超排效果的影响

小鼠具有个体小、生长快、繁殖力强、饲养方便等特点,是胚胎工程中最常用的实验动物之一。借用外源性促性腺激素对小鼠进行超排,是获得胚胎工程研究必需的大量卵母细胞或早期胚胎的有效途径。由于受激素组合、小鼠日龄、环境等多因素影响,试验结果差异较大。为进一步探索小鼠超排及其早期胚胎收集的有效方法,试验采用4种不同剂量的孕马血清促性腺激素(PMSG) 人绒毛膜促性腺激素(HCG)组合处理小鼠,并在冲胚过程中对比子宫输卵管直接冲胚法和输卵管全段剖开冲胚法,现报道如下。1材料和方法1.1试验动物65只清洁级昆明系小白鼠(其中17只雄鼠)…     

牛胚胎移植的生物安全措施

对胚胎的质量检查,目前只能凭其形态进行评估分级,而对胚胎的内在质量却无从判断,尤其是胚胎的生物安全问题往往被忽视。牛胚胎移植是从处于无菌状态的供体牛子宫内采取胚胎,在体外进行一系列操作,再移植到受体牛子宫内,其基本过程包括:供体牛和受体牛的选择,同期发情处理,供体牛的超排和配种,胚胎的回收与保存,检胚和移胚。在这一系列的过程中,如果被微生物污染,首先会影响胚胎的发育,造成胚胎早期死亡或者不受孕。即使胚胎能正常发育受孕,也可能造成传染性疾病的传播。因此,进行牛胚胎移植时,采取必须的生物安全措施,对提高胚胎的质量及其…