昆虫病原线虫共生细菌的研究概况

一、绪言Bovien(1937)首次报道了感染期的斯氏线虫Steinernema bibionis与细菌有共生的关系。以后,Weiser(1955)和Dutky(1959)分别发现昆虫病原线虫S.feltiae(=Neoaplectana carpocapsae)的捷克品系及DD—136品系与细菌亦有类似的关系。现已证明:至少有二个属的昆虫病原线虫可携带并将细菌释放到活昆虫寄主的血淋巴中。这些线虫为斯氏线虫属steinernema和异小杆线虫属Heterorhabditis。     

几种斯氏线虫侧区形态比较：小杆目：斯氏线虫科

斯氏线虫属Steinernema Travassos,1927,异名新线虫属Neoaplectana Steiner1929,是斯氏线虫科Steihernematidae中唯一的一个类群(Wouts,etal.1982),迄今为众多学者认可的种类有八个,包括Steinernema Kraussei(Steiner)、 S. glaseri (Steiner)、 S. feltiae (Filipjev)、 S. bibionis(Bovien)、 S. affinis(Bovien)、 S. anomali (Kozodoi)、 S. intermedia     

昆虫病原线虫对甘薯蚁象的致病力测定

昆虫病原线虫是隐蔽性害虫的有效生物防治因子,对8种斯氏线虫和3种异小杆线虫进行筛选证实夜蛾斯氏线虫Steinernema feltiae对甘薯蚁象Cylas formicarius的致病力最强;在此基础上进一步研究了11个不同地理来源的S.feltiae品系对甘薯蚁象末龄幼虫的致病力,获得强致病力的品系S.feltiae JY-17并测定了不同因素对该线虫品系致病力的影响。研究结果表明：在25℃条件下,甘薯蚁象不同发育阶段对S.feltiae JY-17的敏感性依次为末龄幼虫〉低龄幼虫〉蛹〉预蛹期〉成虫;在不同测试温度条件下,sfeltiae JY-17致病力由高到低顺序为25℃〉20℃〉30℃〉15℃〉10℃〉35℃;在25℃条件下,当寄主密度为196．6头·m^-2时,线虫对蚁象末龄幼虫的LD50=5．532条·头^-1,LD90=28．049条·头^-1;当线虫与寄主比例为5：1时,LT50=44．306h。本研究为利用昆虫病原线虫防治甘薯蚁象提供了理论依据。     

昆虫病原线虫发光杆菌的分离和鉴定

新线虫和异小杆线虫都是昆虫病原线虫。近年来,被认为是一类很有希望的害虫生物防治因子。Khan et al(1976),Thomas and Poinar(1977,1979)先后从异小杆线虫分离出一种产色素的具生物发光的细菌,这些细菌栖息于线虫的咽、肠腔与线虫共生。当异小杆线虫侵入昆虫寄主时,把细菌从肛门排出释放到昆虫的血腔,由于细菌的增殖,在24～48小时内,致使昆虫因败血症而死亡。因此,在应用线虫防治昆虫中,共生菌起着重要的作用。实验证明,共生菌对线虫的繁殖和发育也是必需的,它能转化昆虫的物质为线虫所需要的营养。因此分离和培养共生菌对大量繁殖线虫,尤其以人工饲料工厂化生产线虫以用于大田时更有着重要的实践和经济意义。本文报导了首次从我国广东阳江(8204,8401菌株)、海南岛琼中(8405菌株)发现的异小杆线虫的共生菌的分离和鉴定,并对其致病性作了测定。     

格氏线虫侵染日本血吸虫中间寄主钉螺的初步试验

钉螺是日本血吸虫的唯一中间寄主。室内试验:Steinernema glaseri(格氏线虫),S.feltiae,S.bibionis,Heterorhabditis heliothidis和H.heliothidis T327五种线虫均能侵染和杀死钉螺。对格氏线虫作了进一步研究,每平方厘米土面用格氏线虫300、200和100条,钉螺死亡率分别为97.5％、92％和47％,死亡率与格氏线虫用量成正比。线虫能在螺体大量增殖,死螺体内的线虫,一周繁殖总数,可增长14.5～68.9％。线虫繁殖力强,对人畜安全,可能是一条有希望的生物防治钉螺的新途径。     

不同昆虫病原线虫—共生细菌组合的生化特性研究

本文分别以无菌的小卷蛾斯氏线虫的A24品系线虫与其自身携带的共生细菌菌株和与格氏线虫RS92品系的共生细菌菌株,以及以无菌的嗜菌异小杆线虫的H06品系线虫与其自身携带的共生细菌菌株和与大异小杆线虫HNA品系的共生细菌菌株建立单菌组合;测定了各组合感染期线虫的致病力、干重和体内主要生化物质的含量。结果发现,共生细菌除了对感染期线虫的致病力产生显著影响外,对线虫干重、蛋白质、氨基酸、糖原和脂肪酸等生化物质的含量也有很大的影响。     

不同昆虫病原线虫一共生细菌组合的生化特性研究

本文分别以无菌的小卷蛾斯氏线虫的A24品系线虫与其自身携带的共生细菌菌株和与格氏线虫RS92品系的共生细菌菌株，以及以无菌的嗜菌异小杆线虫的H06品系线虫与其自身携带的共生细菌菌株和与大异小杆线虫HNA品系的共生细菌菌株建立单菌组合；测定了各组合感染期线虫的致病力、干重和体内主要生化物质的含量。结果发现，共生细菌除了对感染期线虫的致病力产生显著影响外，对线虫干重、蛋白质、氨基酸、糖原和脂肪酸等生化物质的含量也有很大的影响。     

利用昆虫致病线虫防治蛀干害虫和叶蜂

昆虫致病线虫能侵染多种害虫,黑暗、潮湿的环境有利于其活动和存活。我们应用线虫Steinernema bibionis的不同品系S.feltiae,S.glaseri和Heterorhabditis bacteriophora分别对杨树光肩星天牛Anoplophora glabripennis、柳树黄斑星天牛A.nobilis、小褐木蠹蛾Cos-sus formosana、杨树叶蜂Pristiphora sp.和蔷薇叶蜂Arge przhevalskii进行了试验,均取得较好的结果。现将结果简报如下     

利用昆虫病原线虫防治桃红颈天牛

1991～1992年在郑州进行了利用昆虫病原线虫防治桃红颈天牛(Aromia bungii Fald)幼虫的室内及田间试验。在室内条件下,用6个线虫种(品系)测定的结果,所有线虫对桃红颈天牛均有侵染力。以Steinernema bibionis Otio和S.feltiae Mexican对桃红颈天牛幼虫的侵染力较强,LT50分别为1.19天和1.40天,详见表1。     

夜蛾斯氏线虫对亚洲玉米螟防治的研究

应用液体发酵培养的夜蛾斯氏线虫(Steinernema feltiae)治亚洲玉米螟,当时间在36～54 h,线虫悬浮液浓度在60-80 Us/ml时,杀虫效果最好,可达到93.30%.在其他时闻和浓度下,死亡率虽然会有所增加,但综合效益会下降.     

利用昆虫病原线虫防治草菇双额岩小粪蝇

草菇双额岩小粪蝇Bifronsina bifrons是当前草菇生产中的重要害虫。本文测定了5个线虫品系在（30±0.5）℃下对草菇双额岩小粪蝇的致死率和LT50。结果表明,各线虫品系在浓度4000 IJs mL 1下的LT50范围为2.13～4.71 d,其中夜蛾斯氏线虫Steinernema feltiae SN品系对双额岩小粪蝇的毒力最大,LT50为2.13 d,侵染5 d后的致死率达86.67%。菇房施用4×106IJs.m 2S.feltiae SN品系和嗜菌异小杆线虫Heterorhabditisbacteriophora H06品系悬浮液于培养基表面6 d后,对双额岩小粪蝇的防治效果分别达到70.37%和45.68%,SN线虫对双额岩小粪蝇的防效与阿维菌素相当。     

应用斯氏线虫防治8种鳞翅目、鞘翅目昆虫的研究

1991—1993年在哈尔滨、牡丹江和阿城等地进行了应用斯氏线虫防治8种害虫的研究,其中鳞翅目5种:粘虫、甘蓝夜蛾、银纹夜蛾、向日葵螟、小菜蛾;鞘翅目3种:白星金龟子、马铃薯瓢虫和细胸金针虫。用3个种5个品系线虫测定的结果表明,除金针虫外,斯氏线虫对其它7种害虫均能侵染。室内试验表明,Beijing品系对粘虫、甘蓝夜蛾、向日葵螟和小菜蛾的致病力最强,害虫死亡率范围为79.3％—100.0％。田间试验表明,Beijing品系线虫对马铃薯二十八星瓢虫具有较好的防治效果。而NC32和Beijing品系在室内和田间对细胸金针虫均未表现出致病力。这些结果表明,斯氏线虫在本省具有广阔的应用前景。     

夜蛾斯氏线虫对菜青虫几种保护酶活力的影响

为探索昆虫病原线虫对菜青虫保护酶活力的影响,分别用10、50、100头夜蛾斯氏线虫（Steinernema feltiae）侵染4龄菜青虫（Pieris rapae）,对侵染后菜青虫体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活力变化进行了研究。结果表明,接入线虫后,菜青虫的SOD活力显著上升。16 h时各处理的SOD活力均达到最大值,10、50、100头线虫处理的菜青虫SOD活力分别为44.266 7、49.866 7、68.033 3 U/g,均显著高于对照的35.033 3 U/g（p<0.01或p<0.05）,3种线虫剂量处理之间也存在显著差异（p<0.01或p<0.05）。POD的活性在接虫后8 h各处理均显著高于对照（p<0.05）,酶活性随侵染线虫数量的增加而增大,到24 h以后酶的活性开始显著下降,线虫剂量越大下降越快。CAT活力在处理后均显著上升,16~32 h各处理均维持在较高的水平,32 h以后开始显著下降。这反映出菜青虫在昆虫病原线虫侵染初期防御能力增强,16~32 h以后防御能力显著下降。     

芜菁夜蛾线虫对沟眶象和臭椿沟眶象侵染力的研究

室内应用斯氏线虫3个种的5个品系,对越冬沟眶象幼虫进行侵染力比较,结果表明,施线虫后8天,芜菁夜蛾线虫A24品系和Beijing品系,可使在土壤内的幼虫死亡率分别达100％和90％,14天后Beijing品系的致死率亦达100％,其它3个品系均达90％左右;在土壤含水量为10～20％范围内,幼虫死亡率随土壤含水量的增加而递增,施线虫后5天,含水量20％的处理,幼虫死亡率达70％,而10～15％含水量中,死亡率为45～50％;线虫对沟眶象成虫的致死率很低仅15％。对为害臭椿树的沟眶象幼虫,用A24和Beijing品系进行防治,效果分别为77.3％和70.0％。     

Suppressive effect of bacteriophage on bacterial palea browning of rice caused by Pantoea ananatis

Bacterial palea browning of rice, caused by Pantoea ananatis from infection during flowering, occurs widely in Japan and degrades the quality of rice. In a search for environmentally friendly control measures, effects of bacteriophages on the incidence of the disease were examined. Phages lytic to both pathogenic and nonpathogenic P. ananatis were isolated from an inflorescence of eulalia (Miscanthus sinensis), a gramineous weed, and one of the phages was sprayed with and without a nonpathogenic isolate of P. ananatis on rice plants at the flowering stage. Coapplication of the phage and nonpathogenic P. ananatis suppressed the disease in sunlight. Surprisingly, application of the light-labile phage by itself was suppressive. The phage retarded the growth of the pathogen on rice plants and on LB medium. Because nonpathogenic Pantoea strains are abundant on rice panicles at the flowering stage and could be hosts of the phage and the optimum infection period of rice with P. ananatis is during the flowering stage, disease suppression by the phage is thought to be due to the combined effects of the phage, naturally inhabiting nonpathogenic bacteria, and the limited susceptible period.     

不同介质对海滨斯氏线虫抗紫外胁迫的影响

为了筛选合适的介质以提高昆虫病原线虫抵抗紫外胁迫的能力,本文研究了储存于木质素磺酸钙、预胶化淀粉、蛭石、黑炭和无菌蒸馏水(CK)中的海滨斯氏线虫Steinernema litorale在距18 W紫外灯30 cm处照射30、60、90 min和120 min的存活率、对大蜡螟Galleria mellonella末龄幼虫致死率和水平运动能力的差异。紫外胁迫后,不同介质中储存的海滨斯氏线虫的平均存活率从大到小依次为预胶化淀粉(69.39%)、木质素磺酸钙(51.75%)、蛭石(48.06%)、无菌蒸馏水(47.17%)、黑炭(16.92%)。储存于木质素磺酸钙中的海滨斯氏线虫经紫外胁迫30 min后处理大蜡螟幼虫,其72 h的校正致死率在93.33%~96.67%;紫外胁迫60 min后,储存于预胶化淀粉、蛭石、木质素磺酸钙中的海滨斯氏线虫对大蜡螟幼虫的校正致死率在83.33%~90.00%;紫外胁迫90 min后,储存于蛭石中海滨斯氏线虫对大蜡螟幼虫的校正致死率在90.00%~96.67%;紫外胁迫120 min后,5种介质中的海滨斯氏线虫对大蜡螟幼虫的校正致死率在60.00%~76.67%,无显著差异(P>0.05)。紫外胁迫4个处理中,储存于木质素磺酸钙中的海滨斯氏线虫24 h后92.33%~96.67%的个体运动到3.6 cm圆孔中。研究结果表明,与测定的其他介质相比,木质素磺酸钙能显著提高海滨斯氏线虫抗紫外胁迫的能力。因此,推荐使用木质素磺酸钙储存海滨斯氏线虫,以增强其对紫外线的耐受能力。     

夜蛾斯氏线虫对松树上松墨天牛的毒力测定和室内防治效果

在室内测定了夜蛾斯氏线虫对松枝中松墨天牛的致死中量和致死中时。将TDM模型引入试验结果的分析中，72h后松墨天牛老龄幼虫的LD50为1．2767条／头，LB50为1．6716d；蛹的LD50为1．4417条／头，LB0为1．2627d。结果表明：随着时问的延长，LD50逐渐减少；随着线虫剂量的增加，LT50逐渐缩短。通过线虫寻向移动速度试验得出：夜蛾斯氏线虫与松墨天牛幼虫相距4—10cm情况下的效果较好。通过不同防治方法试验得出：施入夜蛾斯氏线虫防治松墨天牛，12d后，浸泡法的效果最好，海绵法次之，注射法较差。