简单实用的分子标记技术——随机扩增多态性DNA（RAPD）

近几年来，ＲＡＰＤ技术在植物遗传基础的应用研究中取得了很大的进展。通过对ＲＡＰＤ分子标记技术的发展状况，技术特点，应用现状的介绍，揭示了ＲＡＰＤ在农业研究中的巨大应用潜力。     

叶用甜菜随机扩增多态DNA(RAPD)分析

利用ＲＡＰＤ技术,对３０（１份糖甜菜,对照）份Ｂｅｔａ属叶用甜菜种质资源材料的总ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,并利用ＵＰＧＭＡ法绘制聚类分析图谱。结果表明：１）２９份叶用甜菜样品和１份糖甜菜样品护增多态性高,１２个引物共扩增出１１０条带,公共带９条,多态性频率高达９１．８１％,平均每个引物扩弱９．１７条带,特有带６条;２）３０个材料间遗传距离变异范围为０．１５００～０．６７１２,亲缘关系最近的是ＢＣ００４和ＢＣ００５（０．１５００）,最远的是ＢＣ０２７和甜研７号（０．６７１２）;３）来源于希腊、土耳其的叶用甜菜与中国叶用甜菜种质间存在一定的种内遗传变异,一部分与中国叶用甜菜亲缘关系更近一些。本研究首次建立了以叶用甜菜聚类在一起,尤其是与中国叶用甜菜亲缘关系更近一些。本研究首次建立了以叶用甜菜嫩花蕾为试材,采用略有改进     

RAPD在玉米温敏型核雄性不育研究中的应用

对适用于玉米的ＲＡＰＤ实验体系进行研究,摸索出适用于玉米的ＲＡＰＤ的反应适宜条件闻稳定的玉米ＲＡＰＤ分析体系,应用这一体系对温敏核雄性不育玉米琼４２－Ｑｍｓ及其可育的近等基因系琼４２进行ＲＡＰＤ分析,在３００多个引物中发现１个引物在两种中扩增带型有差异,经重复试验,初步认为此差异与玉米雄性不育基因连锁。     

贵农21与P38的SDS—PAGE蛋白质图谱及RAPD分析

利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白质电泳及ＲＡＰＤ技术对贵农２１（ＧＮ２１）和Ｐ３８两个材料进行分析,发现Ｇ２１、Ｐ３８和它们的亲本的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白质图谱表现出一些差异。在ＲＡＰＤ分析中,ＧＮ２１和Ｐ３８在１４４个引物的扩增中,有１０１个引物都扩增出特征带,其中有６个引物在ＧＮ２１和Ｐ３８的ＲＡＰＤ图谱中有差异。     

海南主栽芒果品种基因组DNA的RAPD分析

采用６个随机引物对海南岛主栽的１０个芒果品种进行ＲＡＰＤ研究,共扩增出３２５个ＤＮＡ片段,其中清晰可辨,重复的有２０１条,占６１％;检测出不同品种的ＲＡＰＤ标记,计算了各品种间的相似系数;初步确立了ＲＡＰＤ技术进行芒果ＤＮＡ指纹图谱构建的研究体系。     

分子标记的发展及其在植物研究中的应用

本文概述了分析标记的研究进展和种类,对ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＡＦＬＰ等各种现有分子标记技术的原理及操作步骤进行了简要介绍,并对其在植物研究领域中的应用及其应用前景作了评述和展望。     

利用RFLP和RAPD标记示踪高粱黑束病,霜霉病和丝黑穗病的抗性基因

利用ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ标记示踪高粱黑束病、霜霉病和丝黑穗病的抗性基因Ｏｈ，Ｂ．Ｊ．Ｇｏｗｄａ等限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和随机放大多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）标记已经用于示踪具有重要农艺性状的基因。一旦ＲＦＬＰ或ＲＡＰＤ有效地用于特殊性状标记，就可根...     

利用RPAD对中国热带地区疫霉菌分类的初步研究

以来自中国热带地区的２个疫霉种（柑桔褐腐疫霉Ｐ．ｃｉｔｒｏｐｈｔｈｏｒａ和芋疫霉Ｐ．ｃｏｌｏｃａｓｉａｅ）１６个菌株的菌丝体的总ＤＮＡ为模板,使用５种随机引物进行ＰＣＲ扩增,获得随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析与各菌株相对应的ＲＡＰＤ的相似性。结果表明,ＲＡＰＤ不但能辨别这２个疫霉种间的差异,而且可以辨别种内的分类单元,初步肯定了ＲＡＰＤ可以用于中国热带地区疫霉菌的分类鉴定。     

PCR,RAPD技术在植物研究中的应用

ＰＣＲ、ＲＡＰＤ技术在植物研究中的应用石太渊，张华，冯立军（辽宁省农科院高粱所１１０１６１）ＰＣＲ，即英文聚合酶连锁反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｍｒｅａｃｔｉｏｎ）的缩写字母，又称无细胞分子克隆法。这一技术是８０年代发展起来的，能有选择地、重复...     

大豆RAPD影响因素的探讨

为确保ＲＡＰＤ结果的重复性和真实性,本文对影响大豆ＲＡＰＤ结果的主要因素进行了研究,这些因素包括：Ｔａｑ酶、ＭｇＣｌ２、模板、ｄＮＴＰｓ引物浓度、双引物扩增及热徨数。最终优化的大豆ＲＡＰＤ反应体系为：２５ｕｌ反应液中,１０倍反应缓冲液（１００ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌｐＨ８．０,５００ｍＭＫＣｌ,０．１％ｇｅｌａｔｉｎ）,２．０ｍＭＭｇＣｌ２,ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰ、ｄＡＴＰ和０．２ｍＭ,１５ｎｍ     

我国甜菜多倍体品种的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对15个甜菜多倍体品种进行了遗传分析。从以前在甜菜中使用过的14个随机引物中筛选出具有非常明显多态性的引物8个,它们在多倍体品种间共扩增出47条不同位置的带,平均5.9条,特异带32条,特异带比率为68%;两个“双引物”共扩增出10条带,公共带仅1条,多态性频率高达90%。15份材料的遗传相似系数在0.75￣0.99。经聚类分析,可将这些材料分成5个组。RAPD聚类结果基本与血缘、系谱及其在生产实践中的表现相吻合,但也有例外。从分子水平上进一步证明了我国糖甜菜育种中存在的遗传材料基础狭窄的问题。     

甜菜DNA提取新方法初探

本文报道了一个全新的甜菜DNA提取方法，该方法较以往的甜菜DNA提取方法有所不同。它是利用鲜嫩的花蕾为试材，以略有改进的苯酚／氯仿抽提法提取DNA。利用冷冻研磨或者用玻璃棒直接捣碎试材，来提取DNA。该方法简单，易操作，DNA纯度较高，可以直接用于RAPD分析，实验效果较好。     

甜菜抗丛根病基因(Rz1)ISSR分子标记的初步研究

利用ISSR(简单重复间序列)技术对感病甜菜品种KVS3418及3个以KWS3418为轮回亲本的甜菜抗丛根病近等基因系进行分析，综合RAPD、SSR两种分子标记技术，经过多次重复，在一套ISSR引物中，筛选到与抗病性状相连锁的3个RAPD标记：Boya940、Boya800、Boya770。筛选到一个引物BA0061，在甜菜抗丛根病基因系间表现多态性。当用这个引物对已知的3个抗病材料及其它不舍此基因的感病材料进行检测时，多态性标记BA0061-1200，可从3个含抗丛根病基因的抗病材料中检测到1条12001bp的多态性带，而在其它感病材料中未出现。此标记可用于甜菜的分子育种。     

AFLP分子标记及其在茶树遗传育种中的应用

AFLP是发展起来的一种新的DNA分子标记技术，该技术原理简单，既具RFLP技术的可靠性，又具有RAPD技术的高效性，可广泛应用于植物遗传标记分析和分离植物基因等研究。本文介绍了AFLP分子标记的基本原理和技术流程。对AFLP分子标记在茶树领域中的应用做了综述并对其应用前景做了展望。     

甜菜抗丛根病种质创新与分子生物技术

甜菜坏死黄脉病毒（BNYVV）及其新变异株P型和IV-A型仍对甜菜生产造成重大损失。选育抗病品种是防治该病的唯一有效措施。用ELISA和实时定量逆转录PCR技术测定BNYVV和P．betae可对杂交后代分离群体或转基因后代中的抗病个体进行选择。AFLP、KAPD和PCR等分子标记的建立可对抗病基因位点Rz1（Holly）、Rz2（WB42）、Rz3（WB41）和Rz4（C50,R22）进行辅助选择。在分离植物抗病基因方面,已获得含Rz1的BAC克隆和候选基因。转基因甜菜含重复倒置的BNYVV复制酶基因、RNA-2转运蛋白P15突变基因或CP基因显著提高了抗病性。国际合作可有效地利用资源,加快抗病种质创新。     

浅析叶用甜菜(Beta.v.cicla L.)的研究进展

叶用甜菜是中国仅有的甜菜种质资源,在中国已有２５００年栽培历史。叶用甜菜不仅可以用作蔬菜、草药和饲料,而且还是糖甜菜（Ｂ．ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．）的近缘种,是改良糖甜菜遗传基础的一个重要资源。本文综述了叶用甜菜的起源、分布、及分子生物学的研究进展。展望了叶用甜菜的利用和开发前景。     

甜菜对不同施用部位磷种肥的吸收与利用

用P~(32)示踪法研究结果表明,甜菜在1～2片真叶期已开始吸收磷肥。至叶丛繁茂期,单株绝对吸磷量和对磷肥利用率均明显增高,但单株相对含磷量却明显降低;磷肥施到距种子2、4cm以下可显著提高甜菜对磷肥的利用率。至7月中旬利用率分别达4％和7.9％,比种、肥混施分别提高60％和2倍;磷酸二铵做种肥,其分解产生的NH_4对甜菜有毒害作用,可降低出苗率、保苗率,也影响对磷肥的吸收利用。采用种、肥分层施可缓解和避免NH_4~ 对甜菜的伤害。     

SSR标记技术在水稻遗传育种中的应用

SSR是建立在PCR基础上的分子标记,与RFLP、RAPD、AFLP相比,SSR具有多态性高、结果稳定可靠、重复性好、操作简单等特点,已在水稻研究中被广泛应用。阐述了SSR标记的基本原理与操作规程,介绍了其在构建水稻连锁图谱、水稻品种特异性鉴定及水稻分子标记辅助育种等方面的应用情况。并分析了目前SSR在应用中所存在的问题,提出相应的解决方法,以期推动SSR标记技术在遗传育种研究中的进展,从而加速育种进程。     

黑龙江省甜菜病害种类调查研究

调查研究表明,黑龙江省甜菜苗期立枯病有５种,叶部病害有５种,根部病害有６种、缺硼生理性病害１种、采种甜菜花梗腐烂病１种。目前,黑龙江省发生普遍、危害严重的是甜菜根腐病和褐斑病。在个别地区发现了对甜菜危险性大的甜菜丛根病、甜菜蛇眼病和黑斑病发生有上升和加重趋势。     

利用RAPD技术鉴定花生种质资源的差异

利用RAPD技术对 7个不同植物学类型的花生种质资源进行了分析 ,在所用的 83个随机引物中 ,1 3个引物的扩增产物显示出不同品种间的多态性 ,能显示花生品种间DNA多态性的引物占1 5 .7%。这 1 3个引物共扩增出 1 2 1条DNA带 ,其中具多态性的片段 2 6条 ,占 2 1 .48%。根据本实验结果 ,利用RAPD技术鉴定花生种质资源的多态性是有效的