赤拟谷盗乙酰胆碱酯酶生化及毒理学特性研究

为了阐明赤拟谷盗[Tribolium castaneum (Herbst)]体内乙酰胆碱酯酶(AChE)在其各虫态间的变化关系,以期为该虫的综合治理提供一定的理论依据,本试验采用微量滴度酶标板法,分别对其10d龄和20d龄幼虫、蛹及成虫体内AChE的生化及毒理学特性进行了较为系统的研究。结果表明,赤拟谷盗各虫态AChE酶源蛋白含量、酶活力和比活力差异显著,酶源蛋白含量从低到高依次为：10d龄幼虫<20d龄幼虫<成虫<蛹;AChE活力和比活力依次为：成虫<蛹<10d龄幼虫<20d龄幼虫。酶动力学分析发现,AChE米氏常数Km值大小依次为：蛹<成虫<10d龄幼虫<20d龄幼虫,但成虫和蛹之间的差异不显著。此外,幼虫AChE的最大反应速度Vmax亦显著高于成虫和蛹。通过对幼虫AChE离体抑制作用测定表明,毒扁豆碱、马拉氧磷和西维因对20d龄幼虫的抑制中浓度I50均高于10d龄幼虫,说明20d龄幼虫体内的AChE对3种抑制剂的抑制作用更不敏感。     

不同磷化氢抗性的赤拟谷盗亚致死浓度下生长发育比较

在室温30℃±2℃、相对湿度75％±50环境中研究了对磷化氢抗性和敏感的赤拟谷盗3个品系在磷化氢亚致死浓度下卵、幼虫和蛹的发育与死亡情况,3个赤拟谷盗品系对磷化氢的抗性系数分别为R1=1、R170=170和R247=247,研究中设定的磷化氢亚致死浓度分别为0mg／L、0．0028mg／L和0．014mg／L。主要结果为：磷化氢亚致死浓度下赤拟谷盗抗性和敏感品系的发育历期延长;亚致死浓度磷化氢熏蒸下,3个品系间幼虫发育速率差异不明显,但抗性品系卵期和蛹期的发育速率增加较敏感品系显著。在亚致死浓度下,赤拟谷盗敏感品系的卵、幼虫和蛹的死亡率增加都明显高于抗性害虫,抗性品系的存活能力明显大于敏感害虫。     

赤拟谷盗PH_3抗性与CarE的关系研究

羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)是昆虫体内代谢杀虫剂重要的水解酶之一。以重要储藏物害虫赤拟谷盗为供试对象,利用微量滴度酶标板法比较研究了PH3抗性与敏感品系成虫、幼虫、蛹阶段CarE的活力及动力学参数等生化指标。结果表明,各供试虫态中,赤拟谷盗各品系成虫期的CarE比活力均最高。与敏感品系相比,赤拟谷盗2个PH3抗性品系CarE的活力及比活力均低于敏感品系。进一步的动力学参数研究表明,各品系中,HSTC-R品系3个虫态的Km和Vmax值均最高,而HYTC-R品系的Km和Vmax值总体上也略高于敏感品系ABTC-S。Km在抗性品系中上升的事实表明CarE在抗性品系中结构发生了改变,这可能是该酶在抗性品系中水解能力下降的原因。     

赤拟谷盗磷化氢抗性与体内能源物质含量的关系研究

多糖、甘油三酯和可溶性蛋白是昆虫体内主要的三种能源物质.本研究通过乙酰丙酮法、蒽酮比色法和考马斯亮蓝G-250法测定了赤拟谷盗 Tribolium castaneum(Herbst)磷化氢(PH3)抗性品系与敏感品系成虫、蛹和幼虫体内三种能源物质的含量.结果表明,除幼虫体内的甘油三酯和多糖外,其它的测定结果均为敏感品系最高,说明抗性品系赤拟谷盗的能源物质储量可能产生了一定程度的缺失.     

PH3和CO2混合增效熏蒸防治PH3抗性害虫研究

在新型房式仓内的小型粮垛中进行了PH3、CO2混合增效熏蒸抗性害虫的试验。试虫有采自河南安阳的赤拟谷盗,对PH3的抗性系数R1＝180;采自吉林四平的赤拟谷盗,为PH3敏感品系;采自河南商丘的谷合,对PH3的抗性系数R1＝190;采自广东潮州的谷蠹,为PH3的敏感品系;采自河南许昌的玉米泉,为PH3敏感品系。结果表明在AIP（片剂）1．2g／m3、CO28％、温度27℃、RH75％的情况下,密封100天可杀死对PH2具有较高抗性的赤拟谷盗和谷蠹等品系。     

国外粮油贮藏(文摘)

采用饱和滤纸和喷洒试验测定谷物保护剂对米象、谷蠢、赤拟谷盗粉斑螟(马拉硫磷敏感和抗性品系)的防治效果,由饱和滤纸法测定的抗马拉硫磷因子,米象是4、谷蠢为6、赤拟谷盗为39     

赤拟谷盗磷化氢抗性及快速测定方法研究

研究了磷化氢对赤拟谷盗成虫的半数击倒时间ＮＴ５０与致死中量ＬＣ５０的关系，证明了ＮＴ５０≥３０ｍｉｎ的赤拟谷盗对ＰＨ３具有抗性，证明ＮＴ５０与ＬＣ５０、ＮＴ１００与ＬＣ９９．９之间均存在线性关系并分析求出了回归方程。同时，利用该方法测了测定了４个赤拟谷盗品系对ＰＨ３的抗性系数。     

磷化氢敏感和抗性赤拟谷盗聚集信息素的比较

研究了磷化氢敏感和抗性赤拟谷盗信息素的种类和相对含量,表明两者存在差异。两者的GC-MS检测结果均表明可能含有目前已报道的4,8-二甲基癸醛和1-十五烯两种聚集信息素;磷化氢抗性赤拟谷盗信息素种类比敏感赤拟谷盗多1-十六烯、1,3-二异丙基萘和2,4-二异丙基萘这三种信息素,缺少反式十氢化萘和(Z)-7-十六碳烯醛这两种信息素。对比4,8-二甲基癸醛相对含量,磷化氢敏感赤拟谷盗比抗性赤拟谷盗的4,8-二甲基癸醛高2倍。     

华南地区主要害虫防治新技术应用研究

通过不同食物引诱剂与害虫诱捕器结合对不同虫种储粮害虫进行诱捕,试验表明水平距离5m、粮食深度2m左右诱捕检测害虫效果明显,对主要储粮害虫有良好的诱捕效果;摆放位置对于诱捕器的诱捕效果影响大;采用控氧储存技术进行生态储粮,经分析,米象、米象抗性品系、谷蠹、谷蠹抗性品系及赤拟谷盗对除氧剂毒力LD99.9分别为8.60g/kg、11.01g/kg、9.14g/kg、8.16g/kg、4.18g/kg,其中赤拟谷盗最敏感,米象抗性品系需要脱氧剂最多;试验粮堆投放除氧剂量为0.50g/kg、1.0g/kg、1.5g/kg、2.0g/kg、2.5g/kg、3.0g/kg,脱氧剂在用量为2.5g/kg、3.0g/kg对谷蠹、谷蠹抗性品系、米象、米象抗性品系、赤拟谷盗及用量1.5g/kg、2.0g/kg对赤拟谷盗杀灭效果在90%以上;脱氧剂在用量为2.0g/kg时对谷蠹抗性品系、米象、米象抗性品系杀灭效果在85%以上;经实仓应用除氧剂用量为2.5g/kg、3.3g/kg、2.5g/kg并抽真空、3.3g/kg并抽真空能保证稻谷储存1年基本无活虫,可保证稻谷储存安全;经应用除氧宝0.5g/kg、1.0g/kg、1.5g/kg、2.0g/kg、2.5g/kg、3.0g/kg、3.3g/kg对稻谷发芽无显著影响。     

三种储粮害虫对防虫磷敏感性的试验报告

对浙江省46个县（市、区）、58个库点的100个品系试虫进行防虫磷敏感性鉴别。结果表明：29个玉米象品系中，敏感品系21个，占82．8％，轻度抗性品系5个，占17．2％。无显著抗性品系；29个谷蠹品系中，敏感品系23个，占79．3％，轻度抗性品系6个，占20．7％，无显著抗性品系；42个赤拟谷盗品系中，轻反抗性品系32个，占76．2％，显著抗性品系10个，占23．8％，无敏感品系。对11个代表品系试虫进行抗性程度测定，结果表明：最高抗性系数，玉米象为0．97，谷蠹为3．02．赤拟谷盗为10．6。上述数据为分析抗性发生和发展规律，合理使用防虫磷，制定延缓或防止害虫产生抗性的新对策提供依据。     

甲酸对谷蠹乙酰胆碱酯酶及酯酶活性的影响

研究离体条件下甲酸对谷蠹酯酶和乙酰胆碱酯酶的抑制作用,结果表明较高浓度的甲酸对谷蠹酯酶和乙酰胆碱酯酶有抑制作用,但其抑制中浓度远远高于甲酸乙酯对谷蠹的致死中浓度,这说明甲酸对害虫酯酶和乙酰胆碱酯酶的抑制作用不是甲酸乙酯杀虫的主要机理。     

棉蚜乙酰胆碱酯酶对杀虫剂不敏感的分子机制

棉蚜是第一个用RT-PCR方法发现具有2个不同乙酰胆碱酯酶(AChE)基因的昆虫,2个基因编码的氨基酸序列的相似性仅48%.进化分析表明,两者相距甚远,分化于昆虫纲出现以前.从棉蚜2个AChE中发现多个抗药性相关突变位点,但功能表达证实AChE-1可能是两类杀虫剂的主要作用靶标,AChE-1的S431F和A302S突变导致对多种有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的敏感性降低,但对某些杀虫剂品种的敏感性反而升高.并讨论了需进一步研究的问题.     

桔全爪螨田间种群对双甲脒的敏感性及其两种酶的生化特性

分别对采自重庆市北碚、忠县、万州和长寿四个地区的桔全爪螨雌成螨对双甲脒的敏感性进行了生物测定,其LD50分别为0.014、0.031、0.111和0.007 mg/L。同时测定了四个地区桔全爪螨成螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性,其中羧酸酯酶活性依次为7.78、3.15、6.56和6.00nmol/（min·insect）,乙酰胆碱酯酶比活力依次为1.07、0.49、0.50和0.37nmol/（min·mg）。四个地区桔全爪螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的动力学常数也存在不同程度的差异。离体抑制作用表明,双甲脒对四个地区桔全爪螨羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶具有明显的抑制作用,当双甲脒浓度达到14.67mmol/L时,抑制作用最强,对北碚、忠县、万州和长寿四个地区桔全爪螨羧酸酯酶的抑制率分别为65.27%、73.84%、81.44%和88.36%,对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为86.84%、84.36%、73.32%和70.85%。     

Cry1Ab蛋白在果蝇体内的富集作用及对其体内保护酶活性的影响

为了研究Cry1Ab蛋白对非靶标生物的生态安全性,通过采用酶联免疫技术(ELISA)测定了果蝇体内的Cry1Ab蛋白含量,运用紫外分光光度法检测了超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果表明：在前10天内Cry1Ab蛋白在果蝇体内不断累积,果蝇体内的AChE、SOD和GSH-Px酶活性与对照相比均受到抑制,SOD和GSH-Px酶活性的抑制程度随其体内毒蛋白含量的增高而降低,AChE酶活性的抑制程度则随之而升高;但10天后果蝇体内Cry1Ab蛋白含量逐渐降低,其体内3种酶的活性均随体内毒蛋白含量的降低而逐渐升高,但仍低于对照。该研究表明Cry1Ab蛋白在果蝇体内具有富集效应,并且其体内Cry1Ab蛋白含量对其体内SOD、GSH-Px、AChE具有抑制作用。     

Microbiological and Physicochemical Properties of Carbamate Insecticides Treated Soil

Treatment of clay loam soil with carbaryl (sevin), thiodicarb (larvin) and methomyl (lannate) at field and 10 folds the recommended doses showed a variable effect on population of total bacteria, azotobacters and nitrifying bacteria, in addition to the soil content of total soluble salts; the effect differed according to the herbicide and the dose level. The bacterial population was significantly increased in the first five days of treatment, then a decrease was recorded. The increase in the microbial population and total soluble salts were proportion to the levels of the insecticides. Moreover, supplementation of glucose to the soil caused substantial increase over that in the insecticide and/or glucose free soils.     

7种杀虫剂防治荔枝蝽象的药效试验

为了寻找出对荔枝蝽象(Tessaratoma papillosa Drury)高效、持效、安全的杀虫剂,通过室内毒力试验和田间药效试验研究7种杀虫剂对荔枝蝽象的防治效果。结果表明,30%敌百虫乳油1000倍液和5%锐劲特悬浮剂2000倍液对荔枝蝽象成虫的杀虫效果最好、药效最稳定,室内施药后72 h时30%敌百虫乳油1000倍液对荔枝蝽象成虫的校正死亡率达到100%、5%锐劲特悬浮剂2000倍液对荔枝蝽象成虫的校正死亡率达到98.35%,田间施药后1、3和7天此2种杀虫剂对荔枝蝽象的虫口减退率和田间防治效果均在90%以上。其次10%吡虫啉可湿性粉剂1000倍液、52.25%农地乐乳油2000倍液和2.5%敌杀死乳油3000倍液也表现出对荔枝蝽象良好的防治效果,室内施药后72 h时10%吡虫啉可湿性粉剂1000倍液对荔枝蝽象成虫的校正死亡率为96.65%、52.25%农地乐乳油2000倍液对荔枝蝽象成虫的校正死亡率为95.00%、2.5%敌杀死乳油3000倍液对荔枝蝽象成虫的校正死亡率为93.35%;田间施药后3、7天此3种杀虫剂对荔枝蝽象的虫口减退率和防治效果均达到90%以上。     

甘薯小象甲防治药剂的筛选及田间药效

为了筛选适合湛江等热带地区防治甘薯小象甲的高效、经济、安全药剂,以甘薯小象甲成虫为实验材料,对12种药剂进行室内毒力测定、盆栽药效试验和田间药效试验筛选。结果表明,3.2%阿维菌素乳油、20%虫酰肼悬浮剂、5%啶虫脒乳油和16%虫肼·茚虫威乳油4种药剂对湛江地区甘薯小象甲防治效果较好,其中3.2%阿维菌素乳油和20%虫酰肼悬浮剂盆栽药效试验72 h防治效果分别为97.78%和91.59%;田间药效试验4天后防治效果分别达到了91.01%和92.26%,8天后依然能达到70.76%,67.84%。3.2%阿维菌素乳油和20%虫酰肼悬浮剂对甘薯小象甲成虫具有良好的防治效果、持效性,适合在湛江等热带地区作为田间防治甘薯小象甲成虫的主要药剂。     

5种生物农药对水稻褐飞虱的防治效果

为了明确5种生物农药对水稻褐飞虱的控制效果,以喷雾施药法进行了防治五（3）代褐飞虱低龄若虫的田间试验,结果表明：单用7 d后,以0.5%藜芦碱WP 3000 mL/hm2和4.0×1010孢子/g球孢白僵菌WP 1800 g/hm2制剂用量的杀虫效果较好,分别为78.6%和79.0%,与对照药剂2.5%噻嗪酮WP 600 mL/hm2的防效接近,但单用的速效性较差。而以单用的剂量减半两两混合使用,以球孢白僵菌+ 噻嗪酮防效最高,药后1 d达到65.0%,药后7 d达到87.6%。因此,球孢白僵菌和藜芦碱可以部分替代高毒、高残留的化学农药,用于防治褐飞虱低龄若虫。     

不同药剂对稻田稻螟蛉的防治效果

2009年在第三代稻螟蛉严重发生的稻田内,进行了不同药剂的防治试验。结果表明,分别用20%甲维.毒死蜱WP1.5~1.8kg/hm²、30.2%甲维.毒死蜱EC1.05~1.35kg/hm²和20%甲维.毒死蜱EC1.5kg/hm²于药后第1~3天,20%虫酰.辛硫磷EC1.5kg/hm²和5%丁烯氟虫腈EC0.6kg/hm²于药后第3天的杀虫效果均达95%以上,40%二嗪.辛硫磷EC1.2kg/hm²于药后3~9天的杀虫效果稳定在80%以上。以上各药剂处理在药后第6天时,对初孵幼虫的控制效果均表现明显下降。