| 表达鸡α干扰素重组酿酒酵母菌的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 杜伟立,尹美辰,杨理凯,张涛,王令,路宏朝.表达鸡α干扰素重组酿酒酵母菌的构建与鉴定[J].动物医学进展,2017,38(9). |
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| 作者姓名： | 杜伟立 尹美辰 杨理凯 张涛 王令 路宏朝 |
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| 作者单位： | 陕西理工大学生物科学与工程学院,陕西汉中,723000 |
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| 基金项目： | 陕西省农业科技创新与攻关项目 |
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| 摘 要： | 通过构建鸡α干扰素真核表达载体,以获得能够表达鸡α干扰素的酵母工程菌株。首先根据GenBank公布的鸡α干扰素基因序列设计上、下游引物,以略阳乌鸡基因组DNA为模板,PCR扩增鸡α干扰素基因片段。然后,利用基因重组技术将鸡α-干扰素基因插入真核表达载体,通过菌落PCR和DNA测序确定目标载体,构建成功后转化至酿酒酵母AH109,再通过营养缺陷培养、质粒提取和PCR鉴定带JMB440-ChIFN-α载体的重组酵母菌株。最终通过酵母培养、总蛋白收集、SDS-PAGE电泳和Western blot等,确定鸡α干扰素基因能够与酵母菌株重组,并表达α干扰素,蛋白条带大小约为23ku,与预期结果一致,表明成功构建了表达鸡干扰素基因的工程酵母菌株。
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| 关 键 词： | 略阳乌鸡 鸡α-干扰素 真核表达载体 酿酒酵母 |
Construction and Identification of Saccharomyces cerevisiae Expressing Chicken Interferon Alpha |
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| DU Wei-li,YIN Mei-chen,YANG Li-kai,ZHANG Tao,WANG Ling,LU Hong-zhao.Construction and Identification of Saccharomyces cerevisiae Expressing Chicken Interferon Alpha[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(9). |
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| Authors: | DU Wei-li YIN Mei-chen YANG Li-kai ZHANG Tao WANG Ling LU Hong-zhao |
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