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猪链球菌2型38 000蛋白主要功能区基因的克隆与表达
引用本文:王华,王君玮,陈义平,赵永刚,赵云玲,徐天刚,王志亮.猪链球菌2型38 000蛋白主要功能区基因的克隆与表达[J].中国兽医学报,2008,28(11).
作者姓名:王华  王君玮  陈义平  赵永刚  赵云玲  徐天刚  王志亮
作者单位:1. 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心ABSL-3实验室,山东,青岛,266114;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009
2. 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心ABSL-3实验室,山东,青岛,266114
基金项目:国家科技攻关项目,山东省青岛市科技发展基金 
摘    要:根据GenBank中已发表的猪链球菌2型38000蛋白基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用PCR方法,以四川分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增38000蛋白主要功能区基因。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接转化宿主菌DH5α,提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。将目的片段定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、0.8mmol/LIPTG条件下进行诱导表达,结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为35000的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western blotting)证实该重组蛋白可以与猪链球菌2型阳性血清发生特异性反应。

关 键 词:猪链球菌2型  38000蛋白  克隆  表达

Cloning and expression of main regions of 38 000 gene of stre ptococcus suis serotype 2 in Escherichia coli
WANG Hua,WANG Jun-wei,CHEN Yi-ping,ZHAO Yong-gang,ZHAO Yun-ling,XU Tian-gang,WANG Zhi-liang.Cloning and expression of main regions of 38 000 gene of stre ptococcus suis serotype 2 in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(11).
Authors:WANG Hua  WANG Jun-wei  CHEN Yi-ping  ZHAO Yong-gang  ZHAO Yun-ling  XU Tian-gang  WANG Zhi-liang
Abstract:
Keywords:Streptococcus suis serotype 2  38 000 protein  cloning  expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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