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| 生长抑素基因靶向siRNA表达载体的构建及对生长抑素基因表达的抑制作用 | |
| 引用本文： | 吴琼,张永亮,赵志辉,刘宇鹏,周立光,任晓慧,侯锋,章倩倩,吕铁钢,郝林琳,刘松财.生长抑素基因靶向siRNA表达载体的构建及对生长抑素基因表达的抑制作用[J].中国兽医学报,2008,28(3):276-280. |
| 作者姓名： | 吴琼 张永亮 赵志辉 刘宇鹏 周立光 任晓慧 侯锋 章倩倩 吕铁钢 郝林琳 刘松财 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林长春,130062 2. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林长春,130062;华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642 3. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林长春,130062;河北农业大学海洋学院,河北,秦皇岛,066003 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 吉林大学农学部青年科研基金 |
| 摘 要： | 合成含靶向生长抑素（Somatostatin,SS）前体基因的siRNA转录模板的发夹结构,插入pSilencerTM2.1-U6载体构建重组质粒2.1-S。提取小鼠下丘脑组织总RNA,PCR扩增获得SS前体基因cDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS。将2.1-S分别与pcDNA3.1-SS、pEGFP-SS共转染入细胞中瞬时表达,检测SS前体基因表达变化。结果显示,重组质粒在E.coli（DH5α）内扩增,酶切及测序鉴定证明siRNA转录模板完整,正确地插入到pSilencerTM2.1-U6质粒中,重组质粒pcDNA3.1-SS与pEGFP-SS经测序序列完全正确。转染细胞在mRNA水平及蛋白水平均检测到2.1-S对SS前体基因表达的抑制。这表明,SS基因靶向siRNA稳定表达载体能在哺乳动物细胞中表达,并对靶基因呈抑制作用。 |
| 关 键 词： | 生长抑素 siRNA 稳定表达栽体 生长抑素 基因靶向 siRNA expression vector 表达载体的构建 基因表达 抑制作用 in vitro somatostatin inhibition targeting 靶基因 动物细胞 哺乳 体能 稳定表达 蛋白水平 mRNA 转染细胞 完全 序列 |
| 文章编号： | 1005-4545(2008)03-0276-05 |
| 修稿时间： | 2006年11月20 |
Construction siRNA expression vector targeting somatostatin and its inhibition on somatostatin expression in vitro |
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| WU Qiong,ZHANG Yong-liang,ZHAO Zhi-hui,LIU Yu-peng,ZHOU Li-guang,REN Xiao-hui,HOU Feng,ZHANG Qian-qian,LU Tie-gang,HAO Lin-lin,LIU Song-cai.Construction siRNA expression vector targeting somatostatin and its inhibition on somatostatin expression in vitro[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(3):276-280. | |
| Authors: | WU Qiong ZHANG Yong-liang ZHAO Zhi-hui LIU Yu-peng ZHOU Li-guang REN Xiao-hui HOU Feng ZHANG Qian-qian LU Tie-gang HAO Lin-lin LIU Song-cai |
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