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猪伪狂犬病病毒LY株gD基因的克隆与核酸疫苗研究
引用本文:马凤龙,王文成,向华,傅兴伦,赵怀龙,马振宇,宣华.猪伪狂犬病病毒LY株gD基因的克隆与核酸疫苗研究[J].中国兽医学报,2008,28(4):412-417.
作者姓名:马凤龙  王文成  向华  傅兴伦  赵怀龙  马振宇  宣华
作者单位:1. 济南军区疾病预防控制中心,山东,济南,250014;吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
2. 辽宁省益康生物制品有限公司,辽宁,辽阳,111000
3. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
4. 济南军区疾病预防控制中心,山东,济南,250014
摘    要:将伪狂犬病病毒LY株的免疫糖蛋白基因(gD基因)分别克隆到核酸疫苗载体pIRESneo、pEGFP-C1的多克隆位点上,成功地构建了含有相应目的基因的重组质粒pIgD、pFgD和PRRSVLX-1株的E基因的双基因共表达二联核酸疫苗质粒pID-E。将构建的各核酸疫苗质粒,通过脂质体法分别转染到BHK-21细胞中,经ELISA检测所有目的蛋白均得到表达,表达产物也均具有一定的反应原性。小鼠免疫试验证实这些核酸疫苗质粒具有很好的免疫原性,能诱导小鼠产生特异性抗体,第3次免疫后,抗体阳性率为100%,pIgD抗体效价均不低于1∶160,最高可达1∶640。pIE与pIgD的联合应用时,不影响各自特异性抗体的产生。构建的含有PRRSVE基因和PRVgD基因的双基因共表达质粒pID-E,脂质体转染BHK-21细胞后,经ELISA检测,相应的PRRSV和PRV的目的蛋白均获得了瞬时表达;小鼠免疫试验表明E和gD2种糖蛋白基因能在小鼠体内共表达,且能诱导免疫小鼠产生针对PRRSV和PRV的相应中和抗体。上述研究为进一步探讨PRRSVE蛋白及PRVgD蛋白的免疫生物学特性,进而为开展PRRSV与PRV相关基因在哺乳动物细胞中的联合表达及基因免疫提供理论基础。

关 键 词:猪伪狂犬病病毒  gD基因  核酸疫苗  基因表达  免疫  猪伪狂犬病  病毒  基因免疫  克隆  核酸  疫苗研究  nucleic  acid  vaccine  studies  strain  pseudorabies  virus  glycoprotein  理论  联合表达  动物细胞  哺乳  相关基因  免疫生物学特性  白及  中和抗体  诱导免疫
文章编号:1005-4545(2008)04-0412-05
修稿时间:2006年7月26日

Cloning of the glycoprotein D from pseudorabies virus LY strain and studies on its nucleic acid vaccine
MA Feng-long,WANG Wen-cheng,XIANG Hua,FU Xing-lun,ZHAO Huai-long,MA Zhen-yu,XUAN Hua.Cloning of the glycoprotein D from pseudorabies virus LY strain and studies on its nucleic acid vaccine[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(4):412-417.
Authors:MA Feng-long  WANG Wen-cheng  XIANG Hua  FU Xing-lun  ZHAO Huai-long  MA Zhen-yu  XUAN Hua
Abstract:
Keywords:
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