| 仿刺参补体AjC3部分基因的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张思,李明,张建清,卢亚楠,翟钰,张峰.仿刺参补体AjC3部分基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J].水产科学,2017(1):94-98. |
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| 作者姓名： | 张思 李明 张建清 卢亚楠 翟钰 张峰 |
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| 作者单位： | 大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连,116023 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30471223) |
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| 摘 要： | 通过制备仿刺参补体C3(AjC3)多克隆抗体,为进一步研究仿刺参补体AjC3免疫机制奠定基础。利用PCR技术扩增AjC3部分基因片段(4556~5110bp),将该片段与原核表达载体pGS-21a连接。将重组表达质粒转化到Transetta(DE3)中经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱纯化后,作为抗原免疫小鼠制备AjC3多克隆抗体。分别用间接ELISA,Western blot检测抗体的效价和特异性。结果显示,PCR扩增得到约555bp的目的片段,重组蛋白分子量大小约56ku;间接ELISA检测抗体效价达1∶25600,Western blot结果显示,多克隆抗体具有良好的特异性。该试验成功的制备了补体AjC3多克隆抗体,为补体AjC3的进一步研究提供了检测工具。
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| 关 键 词： | 仿刺参 AjC3 多克隆抗体 原核表达 |
Prokaryotic Expression of Gene Fragments of AjC3 and Preparation of Polyclonal Antibody in Sea Cucumber Apostichopus japonicus |
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| ZHANG Si,LI Ming,ZHANG Jianqing,LU Yanan,ZHAI Yu,ZHNAG Feng.Prokaryotic Expression of Gene Fragments of AjC3 and Preparation of Polyclonal Antibody in Sea Cucumber Apostichopus japonicus[J].Fisheries Science,2017(1):94-98. |
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| Authors: | ZHANG Si LI Ming ZHANG Jianqing LU Yanan ZHAI Yu ZHNAG Feng |
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