冬小麦东农冬麦1号miR5049-3p和miR1120a前体与靶基因的克隆及低温和ABA作用下的表达调控

为研究外源ABA对miRNA响应低温胁迫的影响，利用实验室已有的冬小麦品种东农冬麦1号miRNA库，通过生物信息学手段筛选出了与糖代谢相关差异表达的miR5049-3p和miR1120a，预测出其靶基因分别为 6PGL（6-磷酸葡糖酸内酯酶基因）和FBA（果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因）。生物信息学分析表明，两种miRNA的前体序列均能形成稳定的茎环结构，但其成熟体的碱基保守性较差，它们的启动子序列包含多种响应环境因子的顺式作用元件。经qRT-PCR分析，随着温度的降低，miR5049-3p和miR1120a分别与其靶基因呈负相关调控；外源ABA处理后，随着温度的降低，miR5049-3p和miR1120a的表达量皆呈“升-降-升”的趋势，其靶基因表达则相应明显降低，表明mi5049-3p和miR1120a可能分别负向调控靶基因 6PGL和FBA，进而介导糖代谢途径来响应低温胁迫。