| H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 黄文科,林宝珍,罗琴芳,牛学锋,郭霄峰.H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达[J].华南农业大学学报,2008,29(2):90-93. |
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| 作者姓名： | 黄文科 林宝珍 罗琴芳 牛学锋 郭霄峰 |
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| 作者单位： | 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV 0025(HSN1)株和KMⅢ(H9N2)株的血凝素(hemagglutinin,HA)基因,然后分别亚克隆到pET-32a( )、pET-28a( )表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9.将阳性重组质粒转化进B121(DE3)宿主菌中,通过改变IPTG浓度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0 mmol/L、诱导时间4～5 h.经SDS-PAGE和 Western-blotting 分析表明,重组蛋白相对分子质量约为85 000和63 000,主要存在于包涵体中,具有良好的免疫学活性.
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 HA基因 基因克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1001-411X(2008)02-0090-04 |
| 修稿时间： | 2007年10月15 |
Prokaryotic Expression of Hemagglutinin Genes of AIV H5 and H9 Subtypes |
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| HUANG Wen-ke,LING Bao-zhen,LUO Qing-fang,NIU Xue-feng,GUO Xiao-feng.Prokaryotic Expression of Hemagglutinin Genes of AIV H5 and H9 Subtypes[J].Journal of South China Agricultural University,2008,29(2):90-93. |
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| Authors: | HUANG Wen-ke LING Bao-zhen LUO Qing-fang NIU Xue-feng GUO Xiao-feng |
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