红肉苹果MdMKK9互作蛋白的筛选与鉴定 |
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引用本文: | 孙晓红,李欣欣,王彦博,陈奕州,张玉刚.红肉苹果MdMKK9互作蛋白的筛选与鉴定[J].山东农业科学,2023(2):20-29. |
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作者姓名: | 孙晓红 李欣欣 王彦博 陈奕州 张玉刚 |
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作者单位: | 1. 青岛农业大学生命科学学院;2. 山东省园艺作物基因改良工程实验室;3. 青岛农业大学园艺学院 |
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基金项目: | 山东省自然科学基金项目(ZR2019MC003);;山东省农业良种工程项目(2021LZGC024);;国家现代苹果产业技术体系项目(CARS-27); |
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摘 要: | MKK9是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族重要成员之一,是在植物细胞响应外界胁迫信号转导中发挥重要作用的酶。为深入研究苹果MKK9的相关功能,以红肉苹果‘黛红’为材料,克隆到MdMKK9基因CDS序列,利用酵母双杂交试验筛选苹果cDNA文库,并通过酵母双杂交筛选、体内双分子荧光互补(BiFC)和体外Pull-down试验进行MdMKK9互作蛋白验证。结果表明,通过对苹果cDNA文库的筛选,共获得11个参与调控植物生长发育及应答逆境胁迫的候选互作蛋白;选取花青苷合成相关蛋白MdCHS及氮胁迫调控相关蛋白MdSPX3进行酵母双杂交、体内BiFC及体外Pull-down试验,结果证明MdMKK9可与MdSPX3互作。
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关 键 词: | 红肉苹果 MdMKK9 酵母双杂交 双分子荧光互补 互作蛋白 |
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