| 一种快速、特异性检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata）的巢式 PCR 方法 |
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| 引用本文： | 秦召,李巧云,段宗彪,姜玉梅,牛吉山.一种快速、特异性检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata）的巢式 PCR 方法[J].河南农业科学,2014(10). |
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| 作者姓名： | 秦召 李巧云 段宗彪 姜玉梅 牛吉山 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心，河南 郑州 450002; 河南农业大学 生命科学学院，河南 郑州 450002
2. 河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心,河南 郑州,450002 |
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| 基金项目： | 863计划项目(2012AA101105)；河南省重大科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 为建立检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata ）的方法，从河南省小麦黑胚籽粒上分离得到7个优势 A．alternata 病原菌株，对其 rDNA 的内部转录间隔区序列（ITS）进行测序，序列比较表明，分离到的病原菌株与 GenBank 公布的 A．alternata 的 ITS 区序列一致性达到99％～100％。根据 Alternaria 属菌株（A．alternata、A．tenuis、A．tenuissima）和麦类根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana ）的 ITS 序列比对结果，设计出1对 A．alternata 特异性引物 Aa1F/Aa1R。利用多种河南省小麦的主要病原真菌对该引物的特异性进行验证，只有在 A．alternata 中能特异性地扩增出1条443 bp 的 DNA 片段。以真菌通用引物 ITS1/ITS4为外侧引物、特异性引物Aa1F/Aa1R 为内侧引物进行巢式 PCR 扩增，能检测到 A．alternata DNA 的最低质量浓度为50 pg/μL。因此，建立的巢式 PCR 方法能够快速、特异地检测小麦中的 A．alternata。
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| 关 键 词： | 小麦 链格孢菌 检测 巢式 PCR |
A Rapid and Specific Nest-PCR Method for Detection of Alternaria alternata in Wheat |
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| QIN Zhao,LI Qiao-yun,DUAN Zong-biao,JIANG Yu-mei,NIU Ji-shan.A Rapid and Specific Nest-PCR Method for Detection of Alternaria alternata in Wheat[J].Journal of Henan Agricultural Sciences,2014(10). |
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| Authors: | QIN Zhao LI Qiao-yun DUAN Zong-biao JIANG Yu-mei NIU Ji-shan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | wheat Alternaria alternata detection nest-PCR |
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