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| 暴露于异丙隆中文蛤差异表达基因的研究 | |
| 引用本文： | 赵艳景,胡虹,王颖.暴露于异丙隆中文蛤差异表达基因的研究[J].江苏农业科学,2009(6). |
| 作者姓名： | 赵艳景 胡虹 王颖 |
| 作者单位： | 1. 淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏连云港,222005 2. 连云港中医药高等职业技术学校,江苏连云港,222006 3. 中国药科大学,江苏南京,210009 |
| 基金项目： | 江苏省海洋生物技术重点建设实验室开放基金，淮海工学院引进人才科研启动基金 |
| 摘 要： | 为了研究文蛤经异丙隆处理后引起的细胞基因表达变化,探索文蛤暴露于农药后分子水平上基因的开放、关闭或表达量的改变,以寻找和发现有价值的指示农药污染的生物标记物基因.在恒定温度(25℃)条件下驯化文蛤7 d,将驯化后的文蛤分为2组(每组20个),给药组文蛤暴露于添加除草剂异丙隆的海水中处理30 d,对照组文蛤暴露于天然海水中处理30 d,用酸性酚-硫酸氰胍-氯仿提取法纯化文蛤鳃总RNA,用4种锚定引物,以总RNA为模板在反转录酶的作用下合成cDNA第一链,以cDNA第一链为模板,在锚定引物和随机引物的作用下连续进行2轮PCR反应,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,银染法显色.对聚丙烯酰胺凝胶电泳显示的差异条带进行回收,并对差异基因片段进行第2次扩增,经琼脂糖电泳后回收基因片段.结果共得到cDNA扩增片段约400条,其中有60余种基因片段的表达发生了明显的差异.在文蛤适应除草剂污染过程中有12个基因表达上调,有11个基因表达下调,有22个基因片段只在试验组表达,有23个基因片段只在对照组表达.基因差异片段可能与指示农药污染的生物标记基因的表达有关. |
| 关 键 词： | 文蛤 异丙隆 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染 克隆 |
Research on diferentially expressed genes in Meretrix exposed to isoproturon |
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| Abstract: | |
| Keywords: | DDRT-PCR |
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