| 水稻HL-CMS中线粒体基因orf216原核表达载体构建及蛋白纯化 |
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| 引用本文： | 郭锐进,刘学群,谭艳平,程钢.水稻HL-CMS中线粒体基因orf216原核表达载体构建及蛋白纯化[J].广东农业科学,2012,39(16):146-148. |
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| 作者姓名： | 郭锐进 刘学群 谭艳平 程钢 |
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| 作者单位： | 中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室,湖北武汉,430074 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目 |
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| 摘 要： | 将orf216基因克隆到含有组氨酸标签的原核表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒pET-30a(+)-orf216,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)plys菌株感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE和Western Blot检测分析表达产物。通过Ni-NTA亲和层析系统纯化获得高纯度目的蛋白。研究结果表明,成功构建了pET-30a(+)-orf216原核表达载体并转化大肠杆菌。SDS-PAGE和Western Blot结果显示30 ku处有单一条带,确定其能高效表达并且诱导表达产物为ORF216蛋白。同时对利用Ni-NTA层析系统纯化高纯度高含量ORF216融合蛋白的条件进行了优化。
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| 关 键 词： | 水稻 原核表达 组氨酸标签 亲和纯化 |
Protokaryotic expression and purification of mitochondria ORF216 protein in honglian cytoplasmic male sterile rice line |
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| GUO Rui-jin
,
LIU Xue-qun
,
TAN Yan-ping
,
CHENG Gang.Protokaryotic expression and purification of mitochondria ORF216 protein in honglian cytoplasmic male sterile rice line[J].Guangdong Agricultural Sciences,2012,39(16):146-148. |
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| Authors: | GUO Rui-jin LIU Xue-qun TAN Yan-ping CHENG Gang |
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| Institution: | (College of Life Science,South-Central University for Nationnalities/ Key Laboratory for Biotechnology of the State Ethnic Affairs Commission,Wuhan 430074,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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