| 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究 |
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| 引用本文： | 张建峰,侯加法,张皎,姚静.鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究[J].中国农业科学,2005,38(10):2129-2133. |
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| 作者姓名： | 张建峰 侯加法 张皎 姚静 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院 南京210095
(张建峰，侯加法，张皎)，南京农业大学动物医学院 南京210095(姚静) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30270998）和江苏省自然科学基金（Q200443）资助. |
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| 摘 要： | 应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增，然后将特异性片段连接到pMD18-T载体，测序结果表明，与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达，经Tricine-SDS-PAGE分析，原核表达产物为7.6 kD的重组蛋白，占菌体总蛋白的23%，Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在，经7 mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5 mol·L-1精氨酸复性液处理，表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应，结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
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| 关 键 词： | 鸡 类胰岛素生长因子Ⅰ基因 原核表达 MTT法 |
| 收稿时间： | 07 28 2004 12:00AM |
| 修稿时间： | 2004-07-28 |
The Cloning, Expression and Bioactivity Research of Recombinant Chicken IGF-Ⅰ |
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| ZHANG Jian-feng,HOU Jia-fa,ZHANG Jiao,YAO Jing.The Cloning, Expression and Bioactivity Research of Recombinant Chicken IGF-Ⅰ[J].Scientia Agricultura Sinica,2005,38(10):2129-2133. |
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| Authors: | ZHANG Jian-feng HOU Jia-fa ZHANG Jiao YAO Jing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chicken Insulin-like growth factor Ⅰ gene Prokaryotic expression MTT |
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