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猪卵母细胞不同孤雌激活方法的研究
引用本文:李莉,郑新民,华再东,刘西梅,毕延震,肖红卫.猪卵母细胞不同孤雌激活方法的研究[J].湖北农业科学,2011(21):4431-4434.
作者姓名:李莉  郑新民  华再东  刘西梅  毕延震  肖红卫
作者单位:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室;贵州大学动物科学学院/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室;
基金项目:转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-148B); 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室项目(2011ZD125)
摘    要:通过对不同电激活参数的摸索,电激活和化学激活联合的研究,以确定适合于猪卵母细胞孤雌激活的最佳方案。结果表明,体外成熟猪卵母细胞在电场时程60μs,1次直流脉冲的条件下,电场强度1.6kV/cm时其卵裂率(88.68%)和桑葚胚率(81.13%)较其他各组高。在电场强度为1.6 kV/cm,1次直流脉冲的条件下,脉冲时程20μs时,卵母细胞卵裂率仅为75.38%,桑葚胚率为64.62%;40和80μs时,卵裂率分别是84.62%和77.17%;100μs时,卵母细胞的卵裂率和桑葚胚率都明显下降。在电场强度为1.6kV/cm,电场时程为60μs的条件下,2次电脉冲激活卵母细胞的卵裂率(87.50%)、桑葚胚率(81.25%)和1次电脉冲的卵裂率(88.68%)、桑葚胚率(80.13%)之间无显著性差异(P﹥0.05),但两者均显著高于3次电脉冲的卵裂率(72.50%)和桑葚胚率(70.27%)。成熟卵母细胞经电刺激(ES)后,分别用CB(7.5μg/mL)、CHX(10μg/mL)、6-DMAP(2 mmol/L)、CB(7.5μg/mL)+CHX(10μg/mL)、CB(7.5μg/mL)+6-DMAP(2 mmol/L)各自处理4 h,ES+CB+CHX和ES+CB+6-DMAP组卵裂率显著高于其他3组,但其桑葚胚率差异不显著。结果显示,电场强度为1.6 kV/cm,电场时程60μs,1次脉冲的电刺激对体外成熟的猪卵母细胞(IVM)孤雌激活效果最好;1次或2次电脉冲就足以激活猪卵母细胞,过高脉冲对细胞反而有伤害作用;电激活和化学激活联合应用可提高猪卵母细胞的卵裂率。

关 键 词:卵母细胞  体外培养  孤雌激活  

Different Parthenogenetic Activation Method for Porcine Oocytes
LI Li,ZHENG Xin-min,HUA Zai-dong,LIU Xi-mei,BI Yan-zhen,XIAO Hong-wei.Different Parthenogenetic Activation Method for Porcine Oocytes[J].Hubei Agricultural Sciences,2011(21):4431-4434.
Authors:LI Li  ZHENG Xin-min  HUA Zai-dong  LIU Xi-mei  BI Yan-zhen  XIAO Hong-wei
Institution:LI Li1,ZHENG Xin-min1,HUA Zai-dong2,LIU Xi-mei1,BI Yan-zhen1,XIAO Hong-wei1 (1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary,Hubei Academy of Agriculture Sciences/Hubei Key Laboratory of Animal Embryo Engineering and Molecular Breeding,Wuhan 430064,China,2.College of Animal Science,Guizhou University / Guizhou Key Laboratory of Animal Genetics,Breeding and Reproduction,Guiyang 550025,China)
Abstract:
Keywords:oocytes  in vitro culture  activation  pigs  
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